Les kits de sous-clonage TOPO™ TA Cloning™ offrent une stratégie de clonage en une seule étape, en 5 minutes et très efficace (“clonage TOPO™”) pour l’insertion directe de produits PCR amplifiés par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique à des fins de sous-clonage. Chaque kit utilise le vecteur TA pCR 2.1-TOPO™ avec des sites de restriction pratiques pour le sous-clonage. Les kits de clonage sont disponibles dans une vaste gamme de cellules compétentes, ou sans cellules compétentes, selon vos besoins et votre budget. Caractéristiques des kits TOPO™ TA Cloning™ pour le sous-clonage :

• Simples et rapides—seulement trois étapes, réalisées en cinq minutes à peine, séparent le clonage de la PCR
• Efficaces—obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
• Résultats prouvés—performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
• Simples—aucune ligase, procédure post-PCR ou amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques n’est requise

Kits TOPO™ TA Cloning™ pour sous-clonage—présentation

• Vecteur : vecteur TA pCR 2.1-TOPO™—vecteur de sous-clonage avec 15 sites de restriction pratiques qui flanquent votre insert pour un sous-clonage directionnel facile
• Méthode de clonage : TOPO™ TA Cloning™ —Basée sur la topoisomérase, ligature en cinq minutes de produits PCR avec des saillies 3′-A (amplification avec des polymérases Taq) vers un vecteur TOPO™ avec des saillies T
• Cellules compétentes : plusieurs options—faites votre choix parmi les kits qui proposent des cellules compétentes générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide ; ou utilisez les vôtres.

vecteur TA pCR 2.1-TOPO™—simplicité de clonage et de sous-clonage
Le vecteur TA pCR 2.1-TOPO™ est linéarisé avec des saillies de 3’-thymidine (T) pour la ligature directe de produits PCR amplifiés par des polymérases Taq (TA cloning™) et est “activé” avec la topoisomérase I liée de manière covalente. Il n’est pas nécessaire d’ajouter de ligase et le clonage est terminé en cinq minutes. Les sites EcoRI flanquant le site d’insertion du produit PCR permettent une excision facile des inserts ou utilisent n’importe quelle combinaison de 15 sites de restriction pratiques flanquant votre insert PCR pour un sous-clonage directionnel facile.

Sélection et manipulation des clones pCR 2.1-TOPO™ TA
Le vecteur TA pCR 2.1-TOPO contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et le gène ™LacZα pour la sélection bleu/blanc.

Clonage simplifié basé sur TOPO™
Grâce à la technologie de clonage TOPO™, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer les cellules compétentes E. coli.

Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TA pCR 2.1 polymérase-TOPO™ utilisé dans ce kit est livré avec des saillies de 3’- T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés par polymérase Taq, qui contiennent des saillies de 3’A.

La norme du clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO™ est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple à utiliser et efficace, le clonage TOPO™ a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.

Kits TOPO™ TA Cloning™ pour sous-clonage—options de kit
Le kit de séquençage TOPO™ TA Cloning™ peut être acheté avec une variété de cellules compétentes offrant différents avantages selon vos besoins :

• Clonage général : Cellules TOP10 (No de catalogue K4500-01, K4500-40)
• Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K4560-01, K4560-40)
• Clonage général, résistance au bactériophage T1 : Cellules DH5α-T1R (No de catalogue K4520-01, K4520-40)
• Croissance rapide : Mach1™ -T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K4510-20)
• Fournissez le vôtre : pour une souplesse et des économies accrues (réf. 450641)

Nous proposons également deux versions du kit qui incluent un kit de minipréparation d’ADN plasmidique rapide PureLink™ (réf. K4500-02 et K4510-02) à utiliser pour l’isolement de plasmide recombinant propre et prêt pour le séquençage.