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Invitrogen™

pGlow TOPO™ TA Expression Kit

Le kit d’expression pGlow TOPO® TA utilise le mutant cycle 3 GFP (1) comme protéine rapporteur pour l’activité transcriptionnelle. LeAfficher plus
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RéférenceQuantité
K48300120 réactions
Référence K483001
Prix (EUR)
1 278,00
Each
Quantité:
20 réactions
Prix (EUR)
1 278,00
Each
Le kit d’expression pGlow TOPO® TA utilise le mutant cycle 3 GFP (1) comme protéine rapporteur pour l’activité transcriptionnelle. Le cycle 3 GFP est idéal pour l’analyse non-invasive des éléments du promoteur dans les cellules vivantes intactes. La propriété fluorescente du cycle 3 GFP permet la détection in vivo dans presque tous les types de cellule ou espèces en utilisant la microscopie avec des ensembles de filtres GFP de type sauvage ou par méthodes de tri cellulaire activées par fluorescence.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de livraisonTransfection
À utiliser avec (application)Dosages de rapporteurs, clonez votre propre promoteur
Type de produitKit d’expression TOPO TA
Quantité20 réactions
Gène rapporteurGFP (cycle 3)
Agent de sélection (eucaryotique)Geneticin™ (G-418)
VecteurVecteurs pGlow, TOPO-TA
Méthode de clonageTOPO™-TA
Gamme de produitsTOPO
AccélérateurAucun (sans promoteur)
Marqueur de protéineNon étiqueté
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Les kits d’expression pGlow TOPO™ TA contiennent deux boîtes. La boîte TOPO™ TA Cloning contient des vecteurs linéarisés pGlow-TOPO™ activés par I, des dNTPs, des amorces pour le séquençage, une solution saline et un modèle et des amorces PCR de contrôle ; conserver à -20°C. La boîte One Shot™ contient des cellules E. coli One Shot™ TOP10, un milieu S.O.C. et un plasmide de contrôle superenroulé ; conserver à -80°C. La stabilité des kits est garantie pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement conservés.

Foire aux questions (FAQ)

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Can I use pBlue- or pGlow-TOPO reporter vectors to evaluate promoter function in E. coli?

pBlue-TOPO contains a cryptic prokaryotic promoter upstream of the lacZ reporter gene, due to which E. coli transformants may appear to be light blue when screened on plates containing X-Gal. Hence, we do not recommend using pBlue-TOPO to evaluate promoter function in E. coli. However, pGlow-TOPO can be used for these studies. Note that background expression of beta-galactosidase from pBlue-TOPO does not occur in mammalian cells.

Do you offer a vector that I could use to do some promoter analysis studies?

Yes, we do offer the pBlue-TOPO and pGlow-TOPO vectors that facilitate cloning of the DNA sequence of interest directly upstream of either the b-galactosidase or Cycle 3 GFP gene, respectively.
pBlue-TOPO is ideal for functional analysis of promoters with low transcriptional activity, since assays for beta-galactosidase are easy to perform and are quantitative at very low levels of expression. pGlow-TOPO is ideal for non-invasive analysis of promoter elements within intact, living cells. The fluorescent property of Cycle 3 GFP allows in vivo detection in virtually any cell type or species using microscopy with wild-type GFP filter sets or by fluorescence-activated cell sorting methods.

Can GFP fluorescence be detected in cells that have been stained for beta-galactosidase?

We recommend looking for GFP fluorescence before staining for beta-galactosidase. This is because the beta-galactosidase staining process produces a very high autofluorescence that will interfere with detection of GFP fluorescence.