DES™-Inducible/Secreted Kit with pCoBlast
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Invitrogen™

DES™-Inducible/Secreted Kit with pCoBlast

Le kit DES-™Inductible/Secreted fournit le vecteur pMT/BiP/V5-His pour l’expression inductible et sécrétée de protéines recombinantes et le choix entre blasticidineAfficher plus
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RéférenceQuantité
K5130011 kit
Référence K513001
Prix (EUR)
2 865,00
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Quantité:
1 kit
Prix (EUR)
2 865,00
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Le kit DES-™Inductible/Secreted fournit le vecteur pMT/BiP/V5-His pour l’expression inductible et sécrétée de protéines recombinantes et le choix entre blasticidine (pCoBlast) et hygromycine (pCoHygro). Ce vecteur offre un promoteur de la métallothionéine inductible qui est induit lors de l’ajout de sulfate de cuivre ou chlorure de cadmium. La séquence de signal d’extrémité N-terminale du gène BiP de l’insecte est fournie à la protéine de fusion recombinante directe par voie sécrétoire des cellules S2 en milieu de culture. Le vecteur pMT/BiP/V5-His offre les caractéristiques supplémentaires suivantes :

• Petite taille (3,6 kb) pour améliorer les rendements d’ADN et accroître l’efficacité du sous-clonage
• Marqueur d’épitope V5 d’extrémité C-terminale pour une détection rapide avec un anticorps anti-V5 Invitrogen
• Marqueur 6xHis d’extrémité C-terminale pour la purification simple des protéines de fusion recombinante en utilisant de la résine de chélation de nickel

Pour faciliter le clonage, un ensemble de trois vecteurs, A, B et C, est fourni. Chaque vecteur possède le site de clonage multiple dans un cadre de lecture différent par rapport à la séquence de signaux BiP.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de produitKit inductible / secrété
Position du marqueur de protéine (sur votre gène)C-terminal
Quantité1 kit
VecteurpMT
Méthode de clonageGateway™
Gamme de produitsDES
AccélérateurMT
Marqueur de protéineÉtiquette His (6x), étiquette d’épitope V5
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Les kits DES™ Inducible / Secreted contiennent 20 µg de chaque vecteur de sélection (pCoHygro ou pCoBlast), un vecteur pMT / BiP / V5-His A, B, C et pMT / BiP / V5-His / GFP, un kit de transfection de phosphate de calcium, des amorces sens et antisens (2 µg chacune), un milieu Drosophila GIBCO™ Schneider, des cellules S2 congelées et l’agent de sélection approprié. Conserver les cellules S2 dans de l’azote liquide. Conserver le milieu et l’agent de sélection à +4°C. Conserver tous les réactifs à -20°C. La stabilité de tous les composants est garantie pendant 6 mois lorsque ceux-ci sont correctement stockés.

Foire aux questions (FAQ)

What is the doubling time of Drosophila S2 cells?

When grown at the optimal temperature of 27-28ºC, Drosophila S2 cells grow very quickly, with an approximate 14-16 hr doubling time. The cells can also be grown at 22-25ºC with doubling time of 24hrs. Humidity is an issue, so a shallow pan of water can be left in the incubator, but the incubator does not need to be turned on.

Growth medium is also a factor in doubling time - the doubling times listed here are for Sf900 II medium.

The cells can reach maximum densities of 1 to 2.5 x 10E7 cells/ml in shake flask cultures.