Kit de coloration bleue et fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation UV
Kit de coloration bleue et fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation UV
Kit de coloration bleue et fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation UV
Invitrogen™

Kit de coloration bleue et fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation UV

Le kit de coloration bleu et fixable de cellules mortes LIVE/DEAD™ est utilisé pour déterminer la viabilité des cellules avantAfficher plus
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RéférenceQuantité
L23105200 dosages
L34961
également connu sous le numéro L-34961
80 dosages
L34962400 dosages
Référence L23105
Prix (EUR)
356,65
Precio exclusivo en nuestra web
476,00
Économisez 119,35 (25%)
Each
Quantité:
200 dosages
Prix (EUR)
356,65
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Each
Le kit de coloration bleu et fixable de cellules mortes LIVE/DEAD™ est utilisé pour déterminer la viabilité des cellules avant la fixation et la perméabilisation nécessaires à la coloration à l’aide d’anticorps intracellulaires ou avant l’élimination de matières présentant un risque biologique à l’aide d’une fixation au formaldéhyde. Ce kit a été optimisé et validé pour une utilisation avec un cytomètre en flux à laser UV.

• Stable—les colorants sont lyophilisés dans des flacons distincts pour assurer leur stabilité

• Robuste—le profil de coloration est identique avant et après la fixation

• Signal lumineux—permet de distinguer facilement les cellules vivantes des cellules mortes dans un seul canal

Consultez un guide de sélection pour tous les colorants de viabilité fixables pour la cytométrie en flux.

Stable
Contrairement aux produits qui sont vendus sous la forme d’une solution,la coloration bleue fixable LIVE / DEAD™ de ce kit d’échantillonneur ont été conditionnés de manière pratique dans des flacons de 40 tests afin de garantir la stabilité et les performances du colorant au fil du temps. Les colorants amino-réactifs de la solution perdront en efficacité en peu de temps. C’est pourquoi, il est recommandé d’utiliser intégralement le flacon une fois celui-ci réhydraté. Si cela n’est pas possible, aliquotez les flacons en petits volumes et stockez-les à -80°C en évitant les cycles de congélation-décongélation.

Robuste
Les colorations de discriminateurs de cellules mortes robustes peuvent perdre la sensibilité après traitement avec des fixateurs tels que le formaldéhyde ou les méthodes de fixation à base d’éthanol requises pour les études de phosphorylation intracellulaire. Le colorant LIVE/DEAD™ bleu fixable est un colorant qui réagit aux amines, qui se lie par covalence aux amines intracellulaires et extracellulaires et dont le schéma de coloration est préservé suite à une fixation au formaldéhyde.

Luminosité optimale
™ La coloration bleue fixable LIVE/DEAD a été sélectionnée en fonction de ses propriétés fluorescentes pour fournir un signal lumineux lorsqu’elle est excitée par un laser UV. Le colorant réactif bleu fluorescent a une excitation maximum d’environ 350 nm, ce qui en fait un colorant idéal pour utilisation avec un laser UV et une émission d’environ 450 nm. En passant la coloration de viabilité d’un canal laser bleu de 488 nm au laser UV, vous libèrerez un canal sur votre cytomètre en flux pour d’autres réactifs qui sont difficiles à trouver en couleurs autres que FITC ou PE. Utiliser le laser UV élimine les problèmes de chevauchement spectral avec d’autres colorants courants ; il n’est donc plus nécessaire de compenser les colorations de viabilité à partir d’autres colorants de votre panel. Comme les cellules vivantes et les cellules mortes peuvent être distinguées à l’aide d’un seul colorant et d’un seul canal de cytomètre en flux, c’est un produit idéal pour les expériences multicolores.

Fonctionnement
Dans les cellules aux membranes endommagées, le colorant réagit avec les amines libres autant à l’intérieur de la cellule qu’à sa surface, ce qui produit une coloration fluorescente intense. Dans les cellules viables, la réactivité du colorant se limite aux amines à la surface des cellules, ce qui se solde par une fluorescence moins intense. En règle générale, l’écart d’intensité est 50 fois supérieur entre les cellules vivantes et les cellules mortes, ce qui facilite la discrimination.

Couleurs disponibles
Les colorants LIVE/DEAD™ fixables pour cellules mortes sont disponibles dans une grande variété de couleurs pour répondre aux besoins de votre panel multi-couleurs.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Perméabilité cellulaireImperméable
Type de celluleCellule eucaryote
DescriptionKit de coloration bleue et fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation UV
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantColoration bleue fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™
FormeSolide
FormatTube(s)
Quantité200 dosages
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
SolubilitéDMSO (diméthylsulfoxyde)
CouleurBleu
Emission450 nm
Excitation Wavelength Range350 nm
À utiliser avec (application)Test de viabilité
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
Gamme de produitsLIVE/DEAD
Type de produitKit de coloration de cellules mortes
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient 5 flacons de coloration fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™ et 500 μl de DMSO.

Conserver à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

I need to use a dead cell control for my viability assay. Do you have a protocol for killing cells for this?

Heat killing is commonly used. Place your cells in a tube in buffer and heat at 60oC for 20 minutes. You can also kill your cells by fixing them with ice cold 70% ethanol for 15 minutes. The ethanol-killed cells can then be stored at -20oC until needed, at which point you wash out the ethanol and replace with buffer.

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Regarding the LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kits, which can discriminate between live and dead cells using flow cytometry with one emission wavelength. Can these kits be used with microscopy?

This dye gives a dim surface label for live cells, but is internalized and gives a brighter signal for dead cells. Flow cytometry is a very sensitive technique and can easily distinguish between the two populations. Microscopy is not as sensitive and may not be able to distinguish the cells because of a less sensitive detector.

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How do I prepare dead cell controls for LIVE/DEAD cell viability assays?

There are two easy options. One is to heat-inactivate the cells by placing at 60 degrees C for 20 minutes. The second is to subject the cells to 70% ethanol. Alcohol-fixed cells can be stored indefinitely in the freezer until use, potentially up to several years.

Centrifuge cells, pellet, and remove supernatant.
Fix cells: Add 10 mL ice cold 70% ETOH to a 15 mL tube containing the cell pellet, adding dropwise at first while vortexing, mix well.
Store in freezer until use.
When ready to use, wash twice and resuspend in buffer of choice.

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Which cell viability kits are compatible with fixation?

The LIVE/DEAD Fixable kits for flow cytometry analysis are compatible with fixation. These kits use amine-reactive cell-impermeant dyes that stain the cell surface of live cells and also the cytosol of dead cells-live cells are dim and dead cells are bright. Since the dye is covalently bound to the cells, it will be retained after fixation. Unfortunately, this method does not work well for imaging-based assays, as all cells are stained and it is difficult to distinguish bright dead cells from dim live cells with a microscope. Ethidium monoazide (EMA; Cat No. E1374) is a cell impermeant nucleic acid stain that can be applied to live cultures and stains only dead cells. After incubation and washing away unbound dye, the cells can be exposed to light to photoactivate EMA to crosslink to dead cell DNA. After crosslinking to dead cell DNA, the samples may be fixed and permeabilized. Image-IT DEAD Green Viability Stain (Cat. No. I10291) for imaging and high-content screening (HCS) analysis is a live-cell impermeant DNA binding dye that is compatible with fixation and permeabilization with good retention up to 48 hours. We also have a LIVE/DEAD Reduced Biohazard Cell Viability Kit (Cat. No. L7013) for imaging and flow analysis that contains two DNA binding dyes, SYTO 10 and Dead Red, that are sufficiently retained to be analyzed soon after 4% glutaraldehyde fixation.
Note: In general, DNA-binding dyes and calcein AM are not compatible with fixation, as these dyes are not covalently bound to components of the cell and will thus slowly diffuse out of cells after fixation, gradually staining all cells as dead.

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Why do I need to include a viability stain in my assays?

Many antibodies and stains will label dead cells. This will give you misleading data if you do not exclude the dead cells from your analysis. Of course, if you are labeling fixed cells, they are already dead and you do not need a viability stain. However, if you label your cells prior to fixation, then you need to use one of the LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stains.

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Citations et références (15)

Citations et références
Abstract
Long-term remission of diabetes in NOD mice is induced by nondepleting anti-CD4 and anti-CD8 antibodies.
Authors:Yi Z, Diz R, Martin AJ, Morillon YM, Kline DE, Li L, Wang B, Tisch R,
Journal:Diabetes
PubMed ID:22751694
Residual ß-cells found at the time of clinical onset of type 1 diabetes are sufficient to control hyperglycemia if rescued from ongoing autoimmune destruction. The challenge, however, is to develop an immunotherapy that not only selectively suppresses the diabetogenic response and efficiently reverses diabetes, but also establishes long-term ß-cell-specific tolerance ... More
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Authors:Chattopadhyay PK, Melenhorst JJ, Ladell K, Gostick E, Scheinberg P, Barrett AJ, Wooldridge L, Roederer M, Sewell AK, Price DA,
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'The ability to quantify and characterize antigen-specific CD8+ T cells irrespective of functional readouts using fluorochrome-conjugated peptide-major histocompatibility complex class I (pMHCI) tetramers in conjunction with flow cytometry has transformed our understanding of cellular immune responses over the past decade. In the case of prevalent CD8+ T cell populations that ... More
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Authors:Zarling S, Berenzon D, Dalai S, Liepinsh D, Steers N, Krzych U
Journal:J Immunol
PubMed ID:23589611
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