Kit de coloration turquoise fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation à 405 nm
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Kit de coloration turquoise fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation à 405 nm

Le kit de coloration turquoise et fixable de cellules mortes LIVE/DEAD™ est utilisé pour déterminer la viabilité des cellules avantAfficher plus
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RéférenceQuantité
L34966400 dosages
L34957200 dosages
L3496580 dosages
Référence L34966
Prix (EUR)
576,00
Each
Quantité:
400 dosages
Prix (EUR)
576,00
Each
Le kit de coloration turquoise et fixable de cellules mortes LIVE/DEAD™ est utilisé pour déterminer la viabilité des cellules avant la fixation et la perméabilisation nécessaires à la coloration à l’aide d’anticorps intracellulaires ou avant l’élimination de matières présentant un risque biologique à l’aide d’une fixation au formaldéhyde. Ce kit a été optimisé et validé pour une utilisation avec un cytomètre en flux à laser violet.

• Stable — les colorants sont lyophilisés dans des flacons séparés pour maintenir la stabilité

•Robuste — le motif de coloration est le même avant et après la fixation

• Faible compensation — chevauchement spectral minimal entre les autres fluorophores

Consultez un guide de sélection pour tous les colorants fixables pour la cytométrie en flux.

Stable
Contrairement aux produits vendus en solution, le colorant turquoise LIVE/DEAD™ fixable a été conditionné de façon pratique dans des flacons de 40 tests pour garantir la stabilité et les performances du colorant au fil du temps. Les colorants amino-réactifs de la solution perdront en efficacité en peu de temps. C’est pourquoi, il est recommandé d’utiliser intégralement le flacon une fois celui-ci réhydraté. Si cela n’est pas possible, aliquotez les flacons en petits volumes et stockez-les à -80°C en évitant les cycles de congélation-décongélation.

Robuste
Les colorations de discriminateurs de cellules mortes robustes peuvent perdre la sensibilité après traitement avec des fixateurs tels que le formaldéhyde ou les méthodes de fixation à base d’éthanol requises pour les études de phosphorylation intracellulaire. Le colorant turquoise LIVE/DEAD™ fixable est un colorant réactif à l’amine qui se lie de façon covalente aux amines intracellulaires et extracellulaires, et le profil de coloration est préservé après la fixation au formaldéhyde.

Faible compensation
Le colorant turquoise LIVE/DEAD™ a été sélectionné en fonction de ses propriétés fluorescentes afin de minimiser la compensation entre d’autres colorants violets et colorants qui excitent le laser bleu à 488 nm. Le colorant réactif aqua-fluorescent a une excitation maximale d’environ 375 nm, mais il est bien excité par le laser violet de 405 nm, et il a des maxima d’émission d’environ 512 nm, de sorte qu’il peut être collecté dans le second canal sur la plupart des cytomètres à flux laser violet.

Fonctionnement
Dans les cellules avec membranes compromises, le colorant réagit avec les amines libres à la fois à l’intérieur des cellules et à la surface des cellules, ce qui donne une coloration fluorescente intense. Dans les cellules viables, la réactivité du colorant se limite aux amines à la surface des cellules, ce qui se solde par une fluorescence moins intense. En règle générale, l’écart d’intensité est 50 fois supérieur entre les cellules vivantes et les cellules mortes, ce qui facilite la discrimination.

Couleurs disponibles
Les colorants LIVE/DEAD™ fixables pour cellules mortes sont disponibles dans une grande variété de couleurs pour répondre aux besoins de votre panel multi-couleurs.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Perméabilité cellulaireImperméable
Type de celluleCellule eucaryote
DescriptionKit de coloration turquoise et fixable des cellules mortes LIVE/DEAD™ pour excitation à 405 nm
Méthode de détectionFluorescent, Fluorescence
Type de colorantColoration turquoise fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™
FormeSolide
FormatTube
Quantité400 dosages
Conditions d’expéditionTempérature ambiante, Température ambiante
CouleurTurquoise
Emission526 nm
Excitation Wavelength Range375 nm
À utiliser avec (application)Test de viabilité
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
Gamme de produitsLIVE/DEAD
Type de produitColoration
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient 10 flacons de coloration fixable pour cellules mortes LIVE/DEAD™ et 500 μl de DMSO.

Conserver à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

How do I prepare dead cell controls for LIVE/DEAD cell viability assays?

There are two easy options. One is to heat-inactivate the cells by placing at 60 degrees C for 20 minutes. The second is to subject the cells to 70% ethanol. Alcohol-fixed cells can be stored indefinitely in the freezer until use, potentially up to several years.

Centrifuge cells, pellet, and remove supernatant.
Fix cells: Add 10 mL ice cold 70% ETOH to a 15 mL tube containing the cell pellet, adding dropwise at first while vortexing, mix well.
Store in freezer until use.
When ready to use, wash twice and resuspend in buffer of choice.

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Which cell viability kits are compatible with fixation?

The LIVE/DEAD Fixable kits for flow cytometry analysis are compatible with fixation. These kits use amine-reactive cell-impermeant dyes that stain the cell surface of live cells and also the cytosol of dead cells-live cells are dim and dead cells are bright. Since the dye is covalently bound to the cells, it will be retained after fixation. Unfortunately, this method does not work well for imaging-based assays, as all cells are stained and it is difficult to distinguish bright dead cells from dim live cells with a microscope. Ethidium monoazide (EMA; Cat No. E1374) is a cell impermeant nucleic acid stain that can be applied to live cultures and stains only dead cells. After incubation and washing away unbound dye, the cells can be exposed to light to photoactivate EMA to crosslink to dead cell DNA. After crosslinking to dead cell DNA, the samples may be fixed and permeabilized. Image-IT DEAD Green Viability Stain (Cat. No. I10291) for imaging and high-content screening (HCS) analysis is a live-cell impermeant DNA binding dye that is compatible with fixation and permeabilization with good retention up to 48 hours. We also have a LIVE/DEAD Reduced Biohazard Cell Viability Kit (Cat. No. L7013) for imaging and flow analysis that contains two DNA binding dyes, SYTO 10 and Dead Red, that are sufficiently retained to be analyzed soon after 4% glutaraldehyde fixation.
Note: In general, DNA-binding dyes and calcein AM are not compatible with fixation, as these dyes are not covalently bound to components of the cell and will thus slowly diffuse out of cells after fixation, gradually staining all cells as dead.

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