Le rouge DND-99 LysoTracker est un colorant fluorescent rouge perméable aux cellules qui colore les compartiments acides dans une cellule, comme les lysosomes. Le rouge DND-99 est doté d’une excitation et d’une émission maximale de 577 / 590 nm et peut être efficacement excité à l’aide d’un filtre TRITC. Les sondes LysoTracker sont disponibles dans un large choix de couleurs fluorescentes. Bien qu’il ne génère pas de réticulation avec les cellules, le rouge DND-99 LysoTracker montre une rétention transitoire après une fixation au formaldéhyde sans méthanol pendant une courte période de temps.

Coloration et suivi simples, hautement spécifiques, en une étape des organites acides
Les sondes LysoTracker sont constituées d’un fluorophore lié à une base faible qui n’est que partiellement protonée à un pH neutre. Dans un état de charge neutre, les sondes LysoTracker peuvent librement se diffuser sur les membranes plasmiques intactes des cellules vivantes. En raison des propriétés intrinsèquement acides dans le lysosome, la fraction faiblement basique est protonée lors de la diffusion dans le lysosome. Dans cet état chargé, la sonde ne se diffuse pas facilement à travers la membrane de l’organite, fournissant une accumulation localisée pour la coloration distincte des organites acides tels que les lysosomes. Efficaces aux concentrations nanomolaires, les sondes LysoTracker sont hautement sélectives pour les organites acides et offrent une coloration simple en une étape qui ne dépend pas de la détection des anticorps.

Les lysosomes sont acides par nature en raison de la production et du stockage des enzymes digestives (hydrolases). L’environnement acide des lysosomes permet la dégradation des glucides, des lipides, des acides nucléiques et des peptides. Les protéines extracellulaires, les virus ou les bactéries peuvent également être internalisés et traqués au lysosome pour leur dégradation par la voie de protéolyse lysosomale. En outre, les protéines mal repliées ou les organites endommagés deviennent des cibles pour la dégradation lysosomale par l’induction de l’autophagie. L’autophagie est importante pour la différenciation cellulaire, la survie pendant la privation de nutriments et le contrôle normal de la croissance. La nature acide inhérente à l’intérieur des lysosomes et tout changement de pH durant la biosynthèse ou la pathogenèse peuvent être exploités par diverses sondes qui répondent à un environnement acide. Les produits LysoTracker permettent la détection par fluorescence pour la coloration des cellules vivantes des environnements acides et peuvent être utilisés pour le marquage et le suivi des organites acides tels que les lysosomes.