PBFI, AM, cell permeant - Special Packaging

Le PBFI est une molécule sensible au potassium utilisée pour mesurer les flux K⁺ intracellulaires dans les cellules animales, végétales et les vacuoles. Bien que la sélectivité du PBFI pour le K⁺ soit inférieure à celle des indicateurs de calcium tels que la fura-2, elle est suffisante pour détecter des concentrations physiologiques de K⁺ en présence d’autres cations monovalents. La réponse spectrale du PBFI sur la liaison ionique permet d’effectuer des mesures du rapport d’excitation et cet indicateur peut être utilisé avec les mêmes filtres et équipements optiques que ceux utilisés pour la fura-2.

En savoir plus sur les indicateurs d’ions, notamment les indicateurs de calcium, de potassium, de pH et de potentiel de membrane ›

Caractéristiques des indicateurs d’ions fluorescents  :
• Marquage (Ex/Em) : PBFI (environ 340,380/500 nm)
• Le produit lyophilisé peut être dissous dans du DMSO pour utilisation
• Le produit est généralement chargé dans des cellules en ajoutant l’indicateur dissous au milieu contenant des cellules

Considérations relatives à la sélectivité et stratégies de chargement de cellules
Le K_d du PBFI pour le K⁺ dépend fortement de la présence de Na⁺, avec une valeur de 5,1 mM en l’absence de Na⁺ et de 44 mM dans des solutions avec une concentration combinée en Na⁺ et K⁺ de 135 mM (qui se rapproche de la force ionique physiologique). Dans les tampons dans lesquels le Na⁺ est remplacé par du chlorure de tétraméthylammonium, le K_d du PBFI pour le K⁺ est de 11 mM ; le chlorure de choline et la N-méthylglucamine sont deux autres remplacements possibles du Na⁺ dans le milieu. Bien que le PBFI ne soit que 1,5 fois plus sélectif pour le K⁺ que pour le Na⁺, cette sélectivité est généralement suffisante, les concentrations intracellulaires de K⁺ étant normalement près de 10 fois supérieures aux concentrations de Na^+.

Le PBFI est disponible sous forme de sel acide imperméant aux cellules (P1265MP) et d’esters acétoxyméthyliques (AM) perméants aux cellules (P1267MP). Les formes d’acide anionique peuvent être chargées dans des cellules à l’aide de notre réactif de chargement cellulaire pinocytique Influx™ (I14402, Chélateurs, tampons pour étalonnage, ionophores et réactifs de chargement cellulaire—Section 19.8), ou par micro-injection, par perfusion à partir d’une pipette à patch ou par électroporation. Pour le chargement de l’ester AM (Chargement et étalonnage des indicateurs d’ions intracellulaires—Remarque 19.1), l’ajout de Pluronic™ F-127 (P3000MP, P6866, P6867) ou de PowerLoad™ (P10020) des agents dispersants ainsi qu’un temps d’incubation relativement long, supérieur à quatre heures, sont généralement nécessaires.

Trouvez des indicateurs fluorescents pour le Na⁺ et le K⁺
Nous proposons un certain nombre d’indicateurs fluorescents pour la mesure du Na⁺ et du K⁺. Consultez la section 21.1—Indicateurs Na+ et K+ fluorescents du manuel de sondes moléculaires™ pour de plus amples informations sur ces produits.

Réservé à la recherche. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.