pHrodo™ Green S. aureus BioParticles™ Phagocytosis Kit for Flow Cytometry
pHrodo&trade; Green <i>S. aureus</i> BioParticles&trade; Phagocytosis Kit for Flow Cytometry
Invitrogen™

pHrodo™ Green S. aureus BioParticles™ Phagocytosis Kit for Flow Cytometry

Le kit de phagocytose S. aureus vert pHrodo™ BioParticles™ pour cytométrie en flux permet de détecter l’activité phagocytaire dans desAfficher plus
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P353821 kit
Référence P35382
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Le kit de phagocytose S. aureus vert pHrodo™ BioParticles™ pour cytométrie en flux permet de détecter l’activité phagocytaire dans des échantillons de sang entiers et des lignées cellulaires vivantes par cytométrie en flux. Le kit comprend tous les réactifs requis pour évaluer l’ingestion de particules et la lyse des érythrocytes. Des réactifs suffisants sont fournis dans le kit pour effectuer environ 100 dosages à l’aide de 100 µl de sang total par dosage.

Consultez un guide de sélection pour tous les indicateurs pHrodo utilisés en imagerie, cytométrie en flux et dosages sur microplaques.

Le dosage pHrodo™ vert S. aureus BioParticles™ permet une détection sensible sans nécessiter l’extinction de réactifs et des étapes supplémentaires de lavage, ce qui permet de gagner du temps et de minimiser l’incertitude quant à la dérive des signaux de particules des particules internes.

Le kit de phagocytose pHrodo™ vert S. aureus BioParticles™ est :

• Spécifique : colorant fluorogénique, sensible au pH pour détecter la phagocytose
•Rapide et reproductible : aucune étape de lavage ou colorant extincteur requis
•Flexible : multiplexé avec des réactifs excités par d’autres lignes laser
• Compatible : multiplexé avec des réactifs standard et des marqueurs CD

Mode de fonctionnement
Les conjugués pHrodo™ verts S. aureus BioParticles™ sont des S. aureus inactivés et non opsonisés, qui fonctionnent comme des particules fluorogéniques hautement sensibles pour détecter l’ingestion phagocytaire. Le système unique pHrodo™ basé sur les colorants mesure l’activité phagocytaire selon l’acidification des particules lors de leur ingestion, tout en éliminant les étapes de lavage et d’extinction qui sont nécessaires avec des indicateurs non fluorogéniques d’absorption bactérienne.

Nouveau colorant pHrodo™ vert
Le nouveau colorant vert pHrodo™ Molecular Probes™ exclusif et sensible au pH est non fluorescent à pH neutre, mais devient vert vif lors de l’acidification. Étant donné qu’il est à la fois fluorogène et sensible au pH, le colorant pHrodo™ Vert peut être utilisé comme capteur spécifique d’événements phagocytiques ; l’acidification du phagosome après la phagocytose est marquée par une fluorescence verte. C’est donc un outil idéal pour étudier la phagocytose et sa régulation par les médicaments et/ou les facteurs environnementaux.

Le fluorophore est facilement excité par l’émission laser à l’argon-ion de 488 nm et l’émission de fluorescence peut être collectée à l’aide d’un filtre BP standard de 530/30 nm sur la plupart des cytomètres en flux. Il est donc facilement multiplexable avec des réactifs utilisés sur d’autres lasers.

Rapide et reproductible
Les étapes de lavage et les colorants extincteurs ne sont pas nécessaires car le colorant vert pHrodo™ n’est pas fluorescent à l’extérieur de la cellule, ce qui rend le protocole de coloration simple et rapide. L’élimination des étapes de lavage et des colorants extincteurs améliore également la reproductibilité des dosages, en particulier dans les dosages sur lecteur de plaques.

Utilisation avec des bactéries
L’analyse de la phagocytose par des bactéries à gram-positif ou gram-négatif est facilement réalisée à l’aide des conjugués verts et prêts à l’emploi pHrodo™ Vert BioParticles™. Utilisez des conjugués pHrodo™ Green BioParticles™ prêts à l’emploi pour l’analyse pratique de la phagocytose des bactéries à gram-positif ou à gram-négatif, ou de l’ester réactif à l’amine pHrodo™ Green STP pour le marquage des micro-organismes ou des protéines de votre choix.

Indicateurs pHrodo™ pour la phagocytose
Le kit de phagocytose pHrodo™ Green S. aureus BioParticles™ fait partie d’une offre de réactifs plus vaste pour la mesure de la phagocytose. Les scientifiques peuvent utiliser une variété de réactifs pHrodo™ dans les lecteurs de plaques, l’imagerie par microscopie par fluorescence et la cytométrie en flux.

Informations complémentaires sur les produits pHrodo™ Green, les produits pHrodo™ Red et d’autres indicateurs pHrodo™ pour la phagocytose.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantpHrodo™ vert
FormatTube(s), lame(s), Tube(s), lame(s)
Quantité1 kit
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
EspècesS. aureus
Emission509 / 533
À utiliser avec (équipement)Cytomètre en flux
Gamme de produitspHrodo
Type de produitKit de phagocytose
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient un tampon de lyse (10 ml), un tampon B (200 ml), un tampon de lavage (200 ml) et un kit S. aureus vert pHrodo™ BioParticles™ (5 flacons, produit lyophilisé). Conserver au réfrigérateur (2–8°C) et à l’abri de la lumière. Ne pas congeler.

Foire aux questions (FAQ)

Are the Invitrogen BioParticles products sterile?

While the bacteria have been attenuated with formaldehyde and alcohol desiccation, the BioParticles products are not considered sterile, and we do not recommend incubation of more than 4 hours. This applies to all of our dye-labeled (pHrodo, Alexa Fluor, etc.) and unlabeled BioParticles products.

How should I store the pHrodo BioParticles included within pHrodo BioParticles Phagocytosis kits for flow cytometry?

The pHrodo BioParticles are supplied within the kits in lyophilized form. We recommend storing the pHrodo BioParticles vial(s) at 2-8 degrees C, desiccated and protected from light. Once reconstituted, the pHrodo BioParticles can be stored at 2-8 degrees C for several weeks, as long as sodium azide is added to a final concentration of 2 mM. If no sodium azide is added, the cell suspension needs to be used right away or on the same day to avoid contamination.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What is the type of bond that attaches the dyes to the BioParticles probes?

We use amine-reactive dyes to covalently attach fluorescent dyes to all of our BioParticles probes such as the Escherichia coli (K-12 strain) BioParticles probes, Staphylococcus aureus (Wood strain without protein A) BioParticles, and the Zymosan A (S. cerevisiae) BioParticles probes.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What cellular processes can be analyzed with a flow cytometer?

-Calcium flux: Each of the Oregon Green calcium indicators binds intracellular calcium with increasing affinity, providing a sensitivity range to match many applications. Oregon Green probes emit green fluorescence at resting levels of Ca2+ and increase their fluorescence intensity 14-fold with increasing Ca2+ concentration. The cell-permeant formulation (Cat. No. O6807) can be loaded in cell media and is compatible with flow cytometry.
-Rhodamine-based calcium indicators comprise a range of probes for large or small changes in Ca2+ concentration. They exhibit a 50-fold increase in fluorescence upon calcium binding and offer a range of wavelengths that can be used in conjunction with GFP or green-fluorescent dyes for multiplexing. Rhod-2, AM (Cat. No. R1245MP), in particular, localizes to mitochondria and can be used with flow cytometry.
-Membrane potential: A distinctive feature of the early stages of apoptosis is the disruption of the mitochondria, including changes in membrane and redox potential. We offer a range of products specifically designed to assay mitochondrial membrane potential in live cells by flow cytometry, with minimal disruption of cellular function. The MitoProbe family of mitochondrial stains (Cat. Nos. M34150, M34151, and M34152) provide quick, easy, and reliable flow cytometric detection of the loss of mitochondrial membrane potential that occurs during apoptosis. MitoTracker dyes (Cat. Nos. M7510 and M7512) are membrane potential-dependent probes for staining mitochondria in live cells. The staining pattern of MitoTracker dyes is retained throughout subsequent flow cytometry immunocytochemistry, DNA end labeling, in situ hybridization, or counterstaining steps. The Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay (Cat. No. M34153) provides a more direct method of measuring mitochondrial permeability transition pore opening than assays relying on mitochondrial membrane potential alone. The mitochondrial permeability transition pore (MPTP) is a non-specific channel formed by components from the inner and outer mitochondrial membranes, and appears to be involved in the release of mitochondrial components during cell death.
-Phagocytosis: In phagocytosis, cells internalize particulate matter such as microorganisms, and this process is important for immune responses and during the clearance of apoptotic cells. Probes for studying phagocytosis include BioParticles indicators—bacteria and yeast labeled with fluorescent dyes.
-Tracking phagocytosis using a quench/wash-based assay can report on simple uptake, or a pH indicator can be used to monitor stages in the pathway. We have no-wash assays labeled with pHrodo Red or Green (Cat. Nos. A10010, P35361, P35364, P35365, P35366, and P35367) and no-wash assays for whole blood (Cat. Nos. A10025, A10026, P35381, and P35382), all suitable for flow cytometry.
-pH changes: Sensitive pH determinations can be made in a physiological range using either fluorescent intensity or ratiometric measurements. pHrodo dyes (Cat. Nos. P35373 and P35372) provide signal intensity modulation from pH 2 to pH 9 and with a choice of fluorescent wavelengths. Tracking internalization of fluorescent dextran is a routine method for analyzing pH changes in cellular compartments. Dextran conjugates of pHrodo dyes (Cat. Nos. P35368 and P10361) provide the most complete solution by allowing discrimination of vesicles from early endosomes to lysosomes, with no quench or wash required.
-Reactive oxygen species: Cells that are environmentally stressed usually contain greatly increased levels of reactive oxygen species (ROS). CellROX reagents are fluorogenic probes developed for the detection and quantitation of ROS in live cells. These cell-permeant reagents are non-fluorescent or very weakly fluorescent in the reduced state; however, when oxidized, they become brightly fluorescent and remain localized within the cell. We offer CellROX Green (Cat. No. C10492), CellROX Orange (Cat. No. C10493), and CellROX Deep Red (Cat. No. C10491) Assay Kits validated for flow cytometry.

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