Milieu de montage anti-atténuation Or ProLong™
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Milieu de montage anti-atténuation Or ProLong™

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P3693010 mL
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Le milieu de monteur ProLong Gold Antifade est un monteur liquide appliqué directement sur les échantillons de tissus ou cellules marqués par fluorescence présents sur les lames de microscope. Il est formulé sans coloration d’ADN ou avec la coloration d’ADN bleue DAPI ou avec la coloration d’ADN rouge profond SYTOX. Le milieu de montage ProLong Gold contient des composants chimiques conçus pour protéger les colorants fluorescents contre la décoloration (photoblanchiment) lors des expériences de microscopie par fluorescence, et assure cette protection sans absorber considérablement le signal de fluorescence initial. C’est un milieu de montage durcissant qui forme un parcours optique quasi-parfait (1,47 RI) et permet le stockage à long terme de lʼéchantillon. Il est prêt à lʼemploi (stockage à température ambiante et pas de mélange requis)—il vous suffit dʼappliquer une goutte sur lʼéchantillon, dʼajouter une lamelle, de traiter et de prendre des images.

Le milieu de montage anti-atténuation ProLong Gold n’est pas recommandé pour le montage dʼéchantillons contenant des protéines fluorescentes, comme GFP. Pour une protection supérieure des protéines et des colorants fluorescents contre lʼatténuation, il est recommandé dʼutiliser le milieu de monteur anti-atténuation ProLong Diamond. En savoir plus sur les principales différences entre les milieux de montage anti-atténuation ProLong Gold et ProLong Diamond.

Principaux attributs :

• Protège les colorants contre la décoloration pendant l’imagerie
• Liquide prêt à l’emploi qui durcit pour un stockage prolongé
• Les échantillons montés sont stables pendant des mois
• Préserve le signal de fluorescence—peu ou pas d’extinction
• Idéal pour les colorants Alexa Fluor

Pour les milieux de montage à indice de réfraction de 1,52, optimisé pour l’imagerie objective à immersion dans l’huile, essayez le milieu de montage anti-atténuation en verre durcissant Prolong ou le milieu de montage anti-atténuation SlowFade Glass Soft-Set non durcissant.

Le milieu de montage anti-atténuation ProLong Gold est déjà mélangé et est prêt à l’emploi dans un flacon compte-gouttes ou dans un flacon de 10 ml avec ou sans coloration d’ADN. La coloration DAPI est excitée par lumière UV à 360 nm en cas de liaison à l’ADN avec un maximum d’émission à 460 nm et est détectée à l’aide d’un filtre DAPI classique. La coloration rouge profond SYTOX est excitée par la lumière rouge à 660 nm en cas de liaison à l’ADN, avec une émission maximale à 682 nm et est détectée à l’aide d’un filtre rouge profond/Cy5 classique.

Bénéficiez d’une protection contre le photoblanchiment sans extinction
De nombreux milieux de montage peuvent réduire l’intensité du signal de fluorescence initial jusqu’à 80 %. Pour créer la série de milieux de montage Molecular Probes Gold, nos scientifiques ont mis au point une formule dʼadditifs chimiques qui minimisent cette extinction de signal initial pour la gamme de couleurs et de colorants la plus vaste.

Signaux stables pendant lʼimagerie et pour le stockage à long terme
Si les milieux de montage à base dʼépoxy utilisés dans notre série FluoCells de cellules préparées peuvent être stables pendant des années et garantir le niveau de protection le plus élevé contre la décoloration, ils sont difficiles à utiliser et impliquent la réalisation dʼune série dʼétapes dans les solvants organiques avant le montage. Le milieu de montage anti-atténuation ProLong Gold constitue la meilleure option pour lʼarchivage des échantillons. En outre, il est particulièrement indiqué pour la préservation de lʼintensité du signal pendant les sessions dʼimagerie prolongées, par exemple lors dʼanalyses répétées dans des conditions dʼéclairage confocal à balayage laser. Il est facile à utiliser—il suffit de sécher vos échantillons colorés à lʼair pour éliminer lʼexcès dʼeau et de le monter. Pour une visualisation immédiate de l’échantillon, choisissez notre milieu de montage non durcissant, milieu de montage anti-atténuation SlowFade Gold.

Obtenez une excellente correspondance d’indice de réfraction sans résines acryliques
Pour les applications d’imagerie à haute résolution modernes, la correspondance d’indice de réfraction est essentielle. Le milieu de montage anti-atténuation ProLong Gold durcit à une Rf de 1,47. De plus, grâce à ses propriétés durcissantes, vous pouvez éviter les résines acryliques salissantes (p. ex., vernis à ongles), qui peuvent endommager ou détruire les objectifs de microscope modernes en cas de contact.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
DescriptionProLong™ Gold Antifade Mountant, 1 x 10 mL
Concept écologiqueMoins dangereux, emballage durable
Quantité10 mL
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Gamme de produitsProLong
Type de produitMilieu de montage anti-décoloration
Type de réactifSolution anti-décoloration
Volume (métrique)10 mL
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Le stockage à température ambiante est recommandé, mais il peut également être conservé congelé (-5 à -30°C). Conserver à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

What is the difference between ProLong and SlowFade antifade reagents?

Our ProLong antifade reagents dispense as a liquid that will solidify upon the evaporation of water. SlowFade antifade reagents remain liquid. If you are going to image right away and then dispose of your sample, you do not need a mountant that hardens, such as the SlowFade reagents. If you wish to archive your slide for more than a day, you will want a mounting medium that hardens (or “cures”). This hardening will limit the off-rates of various dye-conjugated antibodies and provides a better refractive index. Also, there will be a lower diffusion rate of free radicals, limiting photobleaching.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

If I use ProLong Gold Antifade Mountant to mount my slides, should I seal the edges?

ProLong Gold Antifade Mountant hardens overnight at room temperature. For short-term storage (a couple of weeks) you do not need to seal the edges of the coverslip, and the sample should be stable. Beyond that time, though, some dye conjugates will have an off-rate into the medium, so cold storage is recommended. Sealing the edges will prevent long-term discoloration (golden color) from developing around the edges of the coverslip as the anti-oxidants oxidize.

The edges may be sealed with melted paraffin, VALAP (1:1:1 vaseline, lanolin, paraffin) or epoxy glue. Nail polish is not recommended as various components of nail polish may diffuse into the mountant and quench fluorescent dyes.

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Some antifade mounting media stay as liquid whereas others harden. What is the benefit of having one that hardens?

If you are going to image right away and then dispose of your sample, you probably want a mountant that does not harden. If you wish to archive your slide for more than a day, you want a mountant that hardens (or "cures"). This hardening will slow or prevent off-rate of your dye or conjugate and often produces a better refractive index. Secondary sealing is usually not necessary. Also there will be lower diffusion of free radicals, thus limiting photobleaching.

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I mounted my cells in ProLong antifade mounting medium, but now I want to go back and re-label them. Is there a way I can unmount the coverslip after it has cured (hardened)?

Yes. Put the slide in a Coplin jar or beaker filled with warm (37oC) PBS buffer and let it sit, no agitation is required. The hardened ProLong mountant will swell and may slide off or be easily dislodged. If cells are adherent to the coverslip, make certain the coverslip side containing the cell or tissue sample does not land face down in the container or become scratched upon handling. Remove the coverslip, wash a couple of times, and proceed with re-staining and re-mounting in new ProLong mountant.

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I am using ProLong antifade mounting medium. Do I need to let it cure before imaging? Do I need to seal the edges of the coverslip?

You can image before it cures (hardens), and it will still slow photobleaching, but you have to let it cure overnight to get the best refractive index (resolution). There is no need to seal the edges. In fact, if you seal before it cures, it won't cure correctly. If you are archiving the slide for more than a month, though, seal the edges with resin, paraffin or VALAP (1:1:1 vaseline, lanolin, paraffin) after it cures or there may be slight discoloration along the edges over time.

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Citations et références (45)

Citations et références
Abstract
Cell death and autophagy under oxidative stress: roles of poly(ADP-Ribose) polymerases and Ca(2+).
Authors:Wyrsch P, Blenn C, Bader J, Althaus FR,
Journal:Mol Cell Biol
PubMed ID:22751932
On the cellular level, oxidative stress may cause various responses, including autophagy and cell death. All of these outcomes involve disturbed Ca(2+) signaling. Here we show that the nuclear enzymes poly(ADP-ribose) polymerase 1 (PARP1) and PARP2 control cytosolic Ca(2+) shifts from extracellular and intracellular sources associated with autophagy or cell ... More
Large store-operated calcium selective currents due to co-expression of Orai1 or Orai2 with the intracellular calcium sensor, Stim1.
Authors:Mercer JC, Dehaven WI, Smyth JT, Wedel B, Boyles RR, Bird GS, Putney JW
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:16807233
'The molecular nature of store-operated Ca(2+)-selective channels has remained an enigma, due largely to the continued inability to convincingly demonstrate Ca(2+)-selective store-operated currents resulting from exogenous expression of known genes. Recent findings have implicated two proteins, Stim1 and Orai1, as having essential roles in store-operated Ca(2+) entry across the plasma ... More
Human stem cell delivery for treatment of large segmental bone defects.
Authors:Dupont KM, Sharma K, Stevens HY, Boerckel JD, García AJ, Guldberg RE,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:20133731
'Local or systemic stem cell delivery has the potential to promote repair of a variety of damaged or degenerated tissues. Although various stem cell sources have been investigated for bone repair, few comparative reports exist, and cellular distribution and viability postimplantation remain key issues. In this study, we quantified the ... More
Androgen induces expression of the multidrug resistance protein gene MRP4 in prostate cancer cells.
Authors:Cai C, Omwancha J, Hsieh CL, Shemshedini L
Journal:Prostate Cancer Prostatic Dis
PubMed ID:17003774
'Multidrug resistance-associated proteins (MRPs) may mediate multidrug resistance in tumor cells. Using a gene array analysis, we have identified MRP4 as an androgen receptor (AR)-regulated gene. Dihydrotestosterone induced MRP4 expression in both androgen-dependent and -independent LNCaP cells, whereas there was little detectable expression in PC-3 or normal prostate epithelial cells. ... More
Estimating relative carbonyl levels in muscle microstructures by fluorescence imaging.
Authors:Feng J, Navratil M, Thompson LV, Arriaga EA,
Journal:Anal Bioanal Chem
PubMed ID:18548236
'The increase in the levels of protein carbonyls, biomarkers of oxidative stress, appears to play an important role in aging skeletal muscle. However, the exact distributions of carbonyls among various skeletal muscle microstructures still remain largely unknown, partly owing to the lack of adequate techniques to carry out these measurements. ... More