Réactif NucBlue™ Live ReadyProbes™ (Hoechst 33342)

Hoechst 33342 est un contre-colorant nucléaire populaire, perméant aux cellules, qui émet une fluorescence bleue en cas de liaison à l’ADN. Grâce au réactif NucBlue™ Live ReadyProbes™, nous avons formulé cette coloration classique dans une solution stable à température ambiante, fournie dans un flacon compte-gouttes pratique à utiliser. Verser à peine deux gouttes par ml pour colorer vos cellules.

• Pas besoin de diluer, peser ou pipetter
• Flacon compte-gouttes pratique—utiliser à peine deux gouttes par ml
• Stable à température ambiante—à garder à portée de main dans votre champ d’application ou zone de culture cellulaire
• Excitation par une lumière UV et émission de la fluorescence bleue à 460 nm en cas de liaison à l’ADN

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Applications d’imagerie cellulaire
Les propriétés spectrales du Hoechst 33342 (2’-[4-éthoxyphényl]-5-[4-méthyl-1-pipérazinyl]-2,5’-bi-1H-benzimidazole), y compris un grand déplacement de Stokes, en font un choix privilégié pour un usage avec les fluorophores verts (Alexa Fluor™ 488, FITC, GFP) et rouges (Alexa Fluor™ 594, Texas Red™, rhodamine, mCherry, mKate-2) dans des expériences multicolores. Compte tenu de sa haute affinité à l’ADN, le Hoechst 33342 est aussi fréquemment utilisé dans les études sur le comptage des cellules, le cycle cellulaire et la réplication cellulaire pour distinguer le nucléique condensé dans les cellules apoptotiques, dans les études de cycle cellulaire associées à la coloration Click-iT™ EdU ou BrdU, en tant qu’outil de segmentation nucléaire dans l’analyse d’imagerie à haut débit et pour trier les cellules en fonction de leur contenu en ADN.

Suggestions d’emploi
Vous pouvez ajouter directement le colorant des cellules vivantes NucBlue™ aux cellules dans des milieux de culture complets ou des solutions tampon.
• Dans la plupart des cas, 2 gouttes/ml et une incubation de 15 à 30 minutes permettront une coloration nucléaire brillante. Néanmoins, l’optimisation peut être requise pour certains types de cellules, conditions et applications. Dans ces situations, ajoutez simplement une goutte de plus ou de moins jusqu’à obtenir une intensité de coloration optimale. Dans la plupart des cas, la coloration s’intensifie sur la durée si les cellules ne sont pas lavées avant l’imagerie.
• La coloration de cellules vivantes NucBlue™ est excitée par lumière UV à 360 nm en cas de liaison à l’ADN avec un maximum d’émission à 460 nm. Il est détecté à travers un filtre bleu / cyan comme un filtre DAPI, des filtres GFP bleus, ou le jeu de filtres pour colorants Semrock BrightLine™ Alexa Fluor™ 350.