Coloration d’acide nucléique rouge profond SYTOX™, pour cellules fixes/mortes

Le colorant d’acides nucléiques rouge profond SYTOX est un colorant d’acide nucléique à haute affinité qui pénètre facilement dans les cellules ayant des membranes plasmiques altérées mais ne traverse pas les membranes cellulaires de cellules vivantes. Avec une coloration cytoplasmique minimale, le colorant rouge profond SYTOX est particulièrement utile dans les expériences d’immunocytochimie (ICC), d’immunohistochimie (IHC) et d’immunofluorescence (IF) pour la coloration des noyaux des cellules fixes. Après une brève incubation avec le colorant rouge profond SYTOX, les acides nucléiques des cellules mortes ou fixées fluorescent en un rouge profond/lointain brillant et peuvent être détectés avec un ensemble de filtres standard CY5/rouge profond ou une configuration laser.

Caractéristiques du colorant d’acide nucléique rouge profond SYTOX :
• Imperméable aux cellules vivantes ; perméable aux cellules mortes ou fixées
• Pic d’excitation / émission : 660/682 nm
• Utilisation avec un ensemble de filtres traditionnels Cy5 ou ligne laser 647
• Fonctionne avec des cellules de mammifères en culture cellulaire mono-couche ou 3D, des tissus animaux et des bactéries
• Détectables avec des micro¬scopes à fluorescence, des fluoromètres, des lecteurs de microplaques à fluorescence et des cytomètres en flux

Le colorant d’acide nucléique rouge profond SYTOX est multiplexable avec des fluorophores bleus, verts, oranges, rouges et proches IR, lorsque des configurations de filtres fluorescents / laser compatibles sont utilisées. Le colorant rouge profond SYTOX montre une fluorescence accrue avec des concentrations croissantes d’ADNds, mais ne présente pas beaucoup d’affinité pour l’ARN ou l’ADNsb. Il possède un signal initial lumineux et une excellente stabilité d’imagerie dans une expérience d’imagerie typique. Ces propriétés font du colorant rouge profond SYTOX un colorant simple et quantitatif de marquage de noyau de cellules mortes / fixées à une étape pour une utilisation avec des micro¬scopes à fluorescence, des fluoromètres, des lecteurs de microplaques à fluorescence et des cytomètres en flux.

Le colorant d’acides nucléiques rouge profond SYTOX a été utilisé avec succès dans les cellules monocouche, les tissus à coupe mince, les cultures cellulaires 3D / sphéroïdes et les bactéries. Il est fourni à une concentration de 1 mM dans DMSO (concentration d’environ 2 000X). Une concentration de 0,5 µm (1X) est recommandée pour la plupart des applications et des types de cellules. Dans l’imagerie de fluorescence de diverses cellules de mammifères, une plage de concentration de 2,5 µm à 0,25 µm a été utilisée. Pour les tests de viabilité par cytométrie en flux, une concentration de 1 µm à 10 nm a été utilisée pour les cellules Jurkat et une plage de 4 µm à 0,5 µm a été utilisée avec E. coli.