Réactif de transfection souche Lipofectamine™
Pair with TrueCut Cas9 Protein v2 to help achieve higher editing efficiency.
Réactif de transfection souche Lipofectamine™
Invitrogen™

Réactif de transfection souche Lipofectamine™

Le réactif de transfection de tige de lipofectamine est optimisé pour atteindre une efficacité maximale avec une différenciation précoce minimaleAfficher plus
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STEM000080,75 ml
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Référence STEM00008
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Le réactif de transfection de tige de lipofectamine est optimisé pour atteindre une efficacité maximale avec une différenciation précoce minimale dans un large éventail de cellules souches. Il peut co-administrer des complexes d’ADN, d’ARN et de ribonucléoprotéiques Cas9 (RNP). Le réactif Lipofectamine Stem est compatible avec un grand nombre de systèmes de milieux, y compris sans convoyeur, ce qui aide à soutenir et à simplifier le flux de travail de votre culture de cellules souches. Les chercheurs peuvent obtenir jusqu’à 80 % ou une meilleure efficacité de transfection dans les cellules souches pluripotentes (CSP) et les cellules souches neurales (NSC), et jusqu’à 45 % dans les cellules souches mésenchymateuses (MSC).

La transfection de cellules souches sans inhiber la viabilité cellulaire et la croissance cellulaire peut être difficile en raison de la sensibilité de ces cellules. Lipofectamine Stem est un réactif à faible toxicité, nécessitant de faibles quantités d’acide nucléique, permettant à vos cellules souches de rester en bonne santé et de continuer à proliférer sans induire de différenciation. Le réactif Lipofectamine Stem est :

Supérieur en performance : jusqu’à 3 fois plus efficace sur les CSPi, hESCs, NSC et MSC que sur d’autres réactifs
Polyvalent : un réactif pour l’ADN, l’ARN, la protéine Cas9, et co-transfection
Non-agressif pour les cellule : il maintient la prolifération cellulaire sans induire de différenciation
Flexible : transfecte des cellules en adhérence ou suspension—une alternative à l’électroporation

Atteint l’édition génétique à haute efficacité dans les cellules souches
Les applications de montage génétique exigent généralement la capacité de co-administrer l’ADN, l’ARN et / ou la protéine dans les cellules. Le réactif de transfection Lipofectamine Stem est conçu pour co-administrer des complexes CRISPR / Cas9 dans des cellules souches humaines pour un montage génétique à haute efficacité. Ce réactif unique peut être utilisé pour transfecter de grands plasmides d’ADN, tels que les vecteurs CRISPR / Cas9 tout-en-un, et fournir une gamme d’ARN, tels que de grands ARNm Cas9 avec des complexes tracr / ARNcr ou un ARN guide simple (sg), et de protéines telles que la protéine Cas9 associée au complexe tracr / ARNcr ou à l’ARNsg.

Une alternative de faible toxicité à l’électroporation
La transfection de cellules souches par des méthodes d’électroporation peut être difficile et fastidieuse. Les protocoles d’électroporation recommandent une culture de suspension à cellule unique pour garantir une efficacité maximale et une toxicité minimale. Grâce au protocole de transfection inverse, le réactif de transfection Lipofectamine Stem s’avère être une alternative efficace et moins toxique à l’électroporation pour les cellules souches. Il nécessite de faibles quantités d’acide nucléique pour atteindre une efficacité maximale de transfection, par électroporation, tout en soutenant la prolifération continue sans induire la différenciation.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
ClassificationAucun composant d’origine animale
À utiliser avec (application)Transfection
Gamme de produitsLipofectamine
Type de produitRéactif de transfection
Quantité0,75 ml
Compatible avec le sérumNon
Conditions d’expéditionWet Ice
Type de celluleCellule souche
Type d’échantillonCellules
Transfection TechniqueTransfection basée sur les lipides
Unit Size0.75 mL
Contenu et stockage
Conserver au réfrigérateur (entre 2 et 8°C) à l’abri de la lumière

Foire aux questions (FAQ)

With Lipofectamine Stem Transfection Reagent, how can I improve the transfection efficiency in my stem cells?

To obtain the highest percent of stem cells transfected with Lipofectamine Stem Transfection Reagent, we highly recommend that you follow cell culture conditions that promote formation of a monolayer versus clumps of cells. If the density of your stem cells is greater than 50% or they are being grown as colonies in other media, more Lipofectamine Stem Transfection Reagent may improve transfection efficiency. For additional details, please refer to the Lipofectamine Stem Transfection Reagent protocol pertinent to your cell type and media on the product page (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/STEM00008?ICID=search-product), under Documents, Product Literature.

Can I co-transfect plasmid and Cas9 protein (RNP) with Lipofectamine Stem Transfection Reagent?

Yes. Lipofectamine Stem Transfection Reagent can be used to co-deliver multiple payloads, including DNA, mRNA, and Cas9 protein (RNP) into stem cells.

At what density should I plate my stem cells before transfecting them using Lipofectamine Stem Transfection Reagent?

Cell confluency can impact the amount of Lipofectamine Stem Transfection Reagent that is needed for efficient transfection. Stem cells that are near confluency do not transfect well. Plating density should be such that cells are not overgrown 24 hours after transfection. To obtain the highest percent of stem cells transfected, we highly recommend that you dissociate both colony type and monolayer cultures into small clumps of 3-5 cells. If you are growing human pluripotent stem cells in a 24-well plate in Essential 8 Medium on Vitronectin, plate the cells to achieve 30-60% confluency on the day of transfection. For additional details, please refer to the Lipofectamine Stem Transfection Reagent protocol pertinent to your cell type and media on the product page (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/STEM00008?ICID=search-product), under Documents, Product Literature.

Can I use Lipofectamine Stem Transfection Reagent to transfect neural stem cells (NSCs)?

Yes. Lipofectamine Stem Transfection Reagent can be used to transfect a wide range of stem cell types, while supporting continued proliferation without inducing differentiation. It is our recommended solution for transfecting neural stem cells.

I used Lipofectamine Stem Transfection Reagent. Why are only the outer cells of my stem cell colonies transfected ?

For cells that have aggregated into large colonies, transfection attempts may result in ONLY the outer cells of the colonies being successfully transfected. Transfection in suspension at the time of passaging and re-plating can maximize access of the reagent to all the cells and increase transfection efficiency. We recommend cell culture conditions that promote formation of a monolayer versus clumps of cells. To avoid cell aggregates that form large colonies, gently dissociate colonies to small clumps of 3-5 cells to promote efficient transfection. Follow recommended seeding densities for the cell culture medium and passaging reagents used so that cells are at the recommended starting confluency of 30-60% at the time of transfection and have room to grow for 24-48 hours during transfection.