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Invitrogen™
pEXP4-DEST Vector Kit
Système d’expression d’E. coli Expressway™ Tag-On-Demand™ sans cellules avec technologie Lumio™ permet l’expression in vitro pratique de protéines étiquetées ouAfficher plus
| Référence | Quantité |
|---|---|
| V96004 | 6 μg |
Référence V96004
Prix (EUR)
620,00
6 µg
Quantité:
6 μg
Prix (EUR)
620,00
6 µg
Système d’expression d’E. coli Expressway™ Tag-On-Demand™ sans cellules avec technologie Lumio™ permet l’expression in vitro pratique de protéines étiquetées ou non à partir d’un vecteur unique, la détection en temps réel de la synthèse protéique et la détection facile de protéines en gel. Ce système permet de :
• Sélectionner rapidement les niveaux d’expression des protéines de pleine longueur
• Économiser du temps et de l’effort en clonant une seule fois pour exprimer la protéine étiquetée ou native
• Exprimer une protéine étiquetée C-terminale à partir d’un clone ORF Ultimate™ dans un système in vitro
Le système Tag-On-Demand™ Expressway™ inclut un lysat d’E. coli spécialisé dérivé d’un mutant slyD pour la synthèse sans cellules. Ce lysat élimine la liaison non spécifique du réactif de Lumio™ Green à la protéine endogène SlyD, fournissant un arrière-plan optimal pour la détection des protéines recombinantes.
Fonctionnement
Clonez simplement votre gène d’intérêt contenant un codon d’arrêt TAG (ambré) dans le pEXP4-DEST fourni (Figure 1). Le vecteur pEXP4-DEST possède des sites attR pour une recombinaison Gateway™ efficace, l’étiquette Lumio™ C-terminal et 6 x étiquettes His pour une identification et une purification simplifiées, ainsi que des composants pour la synthèse de protéines sans cellules. En présence de l’ARNt suppresseur Tag-On-Demand™ Expressway™, le codon TAG n’est pas reconnu et la traduction se poursuit à travers l’étiquette Lumio™ et les 6 x étiquettes His. En l’absence de l’ARNt suppresseur, le codon d’arrêt TAG est reconnu et la protéine native est produite (figure 2). À partir du même vecteur, vous pouvez déterminer rapidement le niveau d’expression de la protéine C-terminale, pleine longueur, puis exprimer la protéine native exempte de tout effet indésirable que l’étiquette peut avoir sur sa structure, son activité ou ses interactions moléculaires.
• Sélectionner rapidement les niveaux d’expression des protéines de pleine longueur
• Économiser du temps et de l’effort en clonant une seule fois pour exprimer la protéine étiquetée ou native
• Exprimer une protéine étiquetée C-terminale à partir d’un clone ORF Ultimate™ dans un système in vitro
Le système Tag-On-Demand™ Expressway™ inclut un lysat d’E. coli spécialisé dérivé d’un mutant slyD pour la synthèse sans cellules. Ce lysat élimine la liaison non spécifique du réactif de Lumio™ Green à la protéine endogène SlyD, fournissant un arrière-plan optimal pour la détection des protéines recombinantes.
Fonctionnement
Clonez simplement votre gène d’intérêt contenant un codon d’arrêt TAG (ambré) dans le pEXP4-DEST fourni (Figure 1). Le vecteur pEXP4-DEST possède des sites attR pour une recombinaison Gateway™ efficace, l’étiquette Lumio™ C-terminal et 6 x étiquettes His pour une identification et une purification simplifiées, ainsi que des composants pour la synthèse de protéines sans cellules. En présence de l’ARNt suppresseur Tag-On-Demand™ Expressway™, le codon TAG n’est pas reconnu et la traduction se poursuit à travers l’étiquette Lumio™ et les 6 x étiquettes His. En l’absence de l’ARNt suppresseur, le codon d’arrêt TAG est reconnu et la protéine native est produite (figure 2). À partir du même vecteur, vous pouvez déterminer rapidement le niveau d’expression de la protéine C-terminale, pleine longueur, puis exprimer la protéine native exempte de tout effet indésirable que l’étiquette peut avoir sur sa structure, son activité ou ses interactions moléculaires.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Résistance aux antibiotiques des bactériesAmpicilline (AmpR), Zeocin™ (ZeoR)
Type de produitVecteur d’expression de destination du système Gateway
Quantité6 μg
Agent de sélection (eucaryotique)Néant
VecteurpEXP, pDEST
Méthode de clonageGateway™
Gamme de produitsExpressway, Gateway
AccélérateurT7
Marqueur de protéineLumio
Unit Size6 µg
Contenu et stockage
Le système d’expression d’E. coli exempt de cellules Tag-On-Demand™ Expressway™ avec technologie Lumio™ comprend le vecteur pEXP4-DEST (lorsqu’indiqué), le plasmide témoin d’expression positive, l’extrait d’E. coli mutant Tag-On-Demand™ slyD, le tampon de réaction d’E. coli, le tRNA suppresseur Tag-On-Demand™, la méthionine, l’eau distillée exempte de Dnase / RNase, Rnase A, le mélange enzymatique T7, tubes de réaction 2 ml, kit de détection Lumio™ Green et l’étalon de protéines fluorescentes Benchmark™. Le kit de vecteur pEXP4-DEST Gateway™ comprend le pEXP4-DEST et un plasmide de contrôle. Stockage des vecteurs, des réactifs de détection et des étalons de protéines à -20°C. Conserver tous les autres composants à -80°C. Garantie stable pendant 6 mois sous réserve d’un stockage correct.