CellLight™ Early Endosomes-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ Early Endosomes-RFP는 초기 엔도솜(endosome) 표지자와 적색 형광 단백질의 융합 구조를 발현하는 변형된 곤충 바이러스(baculovirus)입니다. CellLight™ reagent은 형광 단백질의 유용성과 선택성을 BacMam 기술의 transduction 효율성과 결합하여 살아있는 포유류 세포에서 세포소기관(organelle), 세포 구조의 확실한 염색과 처리를 가능하게 합니다. 이 제품은 바로 사용할 수 있는 형식으로 제공되어—간단히 첨가, 배양, 가시화만으로 분석이 이루어집니다.—세포주, 일차 세포, 줄기 세포, 신경 세포에서 매우 효율적으로 발현됩니다.

CellLight™ Early Endosomes-RFP의 특징:

• 우수한 효율성: >일차 세포, 줄기 세포, 신경 세포 등 다양한 포유류 cell line에서 90% transduction 효율
• 신속성과 편리성: 간단히 CellLight™ Early Endosomes-RFP reagent를 세포에 첨가하여 하룻밤 배양한 후 영상으로 가시화하거나 냉동 보관하였다가 나중에 분석에 이용합니다.
• 안전성: Cell Light reagent는 포유류에서 복제되지 않고 눈에 뛸만한 세포변성 효과가 없어 생물 안전성 수준(biosafety level, BSL) 1 취급에 적합합니다.
• 유연성: 여러 실험 또는 co-localization을 위해 하나 이상의 BacMam reagent를 동시에 transduction 할 수 있으며 용량만을 변경시켜 발현 수준을 면밀히 제어할 수 있습니다.

CellLight™ Reagent 원리
CellLight™ reagent는 단일 펩티드 또는 세포 구조 단백질과 premiere emGFP, TagRFP 또는 CFP의 융합 구조로 세포 내 분획과 구조에 대한 정확한 특이적 표적이 가능합니다. 세포골격(cytoskeleton), 미토콘드리아, secretory compartment 등의 다양한 표적을 이용할 수 있어 높은 공간적 및 시간적 분해능이 필요한 동적인 세포 내 활성의 가시화, multiplexing, co-localization 연구를 편리하게 할 수 있습니다. CellLight™ reagent는 포름알데히드 고정에 내성이 있기 때문에 고정 세포 분석에 이용할 수 있습니다.

BacMam 기술
BacMam 기술은 포유류 세포에서 효율적인 transduction 및 일과성 발현을 위한 것으로 곤충 바이러스(baculovirus)를 기반으로 합니다. Baculovirus는 CellLight™ 융합 구조를 갖는 발현 카세트가 포함되도록 변형되었습니다.

BacMam 2.0은 transduction 의 효율과 발현 수준을 크게 향상시키는 성분이 통합되어 있습니다. 보다 효율적인 세포 도입(cell entry)을 위한 캡시드 단백질 위형(pseudotyped capsid protein), 증강된 CMV promoter, Woodchuck hepatitis post-transcriptional regulatory element (WPRE)).

Baculoviruse는 포유류 세포에서 복제되지 않으므로 세포에서의 안전성 프로필이 탁월하며 세포 변성 효과(cytopathic effect)가 적습니다.

편리한 워크플로우
발현 vector와 달리 BacMam reagent는 일시적인 단백질 발현의 재현성과 적정성(titratable)을 높입니다. 강한 자극을 주는 transfection 방법이나 지루한 클로닝이 필요하지 않습니다. CellLight™ reagent을 완전한 배지의 세포에 첨가한 후 배양하여 다음 날 가시화하며 줄기 세포, 신경 세포, 일차 세포 등의 민감한 세포에서도 매우 효율적인 발현을 달성할 수 있습니다.

Co-transduction 효율이 높아 한 실험에서 여러 구조 또는 경로를 표지해야 할 때 여러 CellLight™ reagent를 쉽게 사용할 수 있습니다. CellLight™ reagent는 포름알데히드 고정에도 내성이 있어 항체 기반 고정 세포 분석에 사용할 수 있습니다.

일부 초대 배양 세포와 같이 세포 분열이 느린 세포에서는 최대 2주까지 발현이 확인되고 최종 분화된 신경 세포에서 transduction 후 3주 이상 영상을 기록하였지만 보통 일시적으로 transduction된 세포는 약 5일 동안 융합 단백질을 발현합니다.

관련 제품
본사는 CellLight™ reagent 외 다양한 BacMam 기반 reagent를 제공합니다. BacMam GFP Transduction Control
은 기술 검증에 적합하며 transduction 조건을 최적화합니다. Premo™ Autophagy Sensor 등의 Premo™ Biosensor, 이온 채널 약물 표적, 경로, 분석 키트 등도 제공합니다.

이 제품과 BacMam 기술에 대해 더 알아보기

다른 영상 도구 및 Reagent 보기

연구용으로만 사용할 수 있습니다. 치료 또는 진단 목적으로 동물이나 사람에게 사용할 수 없습니다.