Pierce™ NHS-Activated Agarose, Dry

La agarosa activada por NHS Thermo Scientific Pierce es una resina de agarosa en partículas, reactiva a aminas y de alta calidad para una inmovilización rápida y estable de proteínas, péptidos y otros ligandos a través de aminas primarias.

Características de la agarosa activada por NHS:

• Fácil de usar: inmovilice en una simple reacción de un solo paso y minimice el tiempo de intervención
• Rápido y eficiente: acoplamiento superior al 85 % para la mayoría de las proteínas en 30 minutos
• Formato innovador: la agarosa seca concentra la muestra, por lo que es ideal para inmovilizar proteínas diluidas
• Seguro: no se necesitan sustancias químicas peligrosas (por ejemplo, cianoborohídrido sódico y bromuro de cianógeno)
• Versátil: la resina de afinidad se adapta a la columna y a las técnicas de cromatografía de afinidad por lotes, así como a aplicaciones de FPLC
• Compatible: se puede usar con cualquier compuesto primario que contenga aminas
• Reutilizable: la química resistente a las fugas significa que puede reutilizar la resina de afinidad
• Alta capacidad de unión: capacidad de acoplamiento de > 25 mg/ml (resina seca)

La agarosa activada por NHS es una resina de agarosa con gránulos entrecruzados al 6 % que contiene grupos funcionales de N-hidroxisuccinimida (NHS). La resina activada reacciona con las aminas primarias para formar enlaces de amida estables que inmovilizan covalentemente anticuerpos u otras proteínas para su uso en procedimientos de purificación por afinidad. La agarosa activada por NHS Pierce tiene una capacidad de acoplamiento superior a 25 mg/ml para la resina seca reconstituida.

Aplicaciones:
• Inmovilización rápida de anticuerpos de cabra antirratón y anti-conejo para purificar las IgG producidas en animales o hibridomas.
• Inmovilización a granel de la proteína A para la purificación de anticuerpos monoclonales
• Inmovilización de ligandos para la purificación de proteínas recombinantes

La resina de agarosa activada por NHS Pierce utiliza una química de éster NHS fiable y no requiere productos químicos peligrosos para la inmovilización. Otros soportes reactivos de amina, como las resinas de periodato oxidado, utilizan productos tóxicos, como el cianoborohidruro sódico, para estabilizar la vinculación de la reacción a aminas primarias y tardan entre 4 y 6 horas en completar el proceso. Los métodos tradicionales, como los soportes activados con bromuro cianógeno, admiten también el acoplamiento de aminas; no obstante, esta química genera uniones no específicas y la fuga lenta y constante del ligando acoplado. Las reacciones con la agarosa activada por NHS Pierce se llevan a cabo en menos de una hora y producen enlaces mucho más estables.

La reacción de acoplamiento de la agarosa activada por NHS se realiza en un tampón sin aminas a un pH de entre 7 y 9. Por lo general, la eficacia en el acoplamiento de proteínas es superior al 80%, al margen del peso molecular o pl del ligando. Una vez inmovilizado el ligando, la resina preparada se puede utilizar en múltiples procedimientos de purificación por afinidad. La agarosa granulada entrecruzada tiene un potencial de flujo lineal rápido y resulta útil en aplicaciones de flujo por gravedad y de presión baja a media.

La exclusiva forma seca no precisa de almacenamiento, extracción ni eliminación del disolvente de acetona. Además, la resina seca es ideal para reacciones de acoplamiento con muestras diluidas, ya que concentra la muestra a medida que la resina se hincha, reduciendo el volumen del material inicial y dando lugar a una inmovilización de ligandos altamente eficaz.

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