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Citas y referencias (3)
Thermo Scientific™
Kit de fraccionamiento subcelular de proteínas para células cultivadas
El kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares Thermo Scientific para células de cultivo permite la segregación y el enriquecimiento deMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| 78840 | 1 kit |
Número de catálogo 78840
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 kit
El kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares Thermo Scientific para células de cultivo permite la segregación y el enriquecimiento de proteínas de cinco compartimentos celulares diferentes.
Características del kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares para células de cultivo:
• Conciso: extraiga fracciones de proteínas citoesqueléticas, unidas a cromatina, nucleares solubles, de membrana y citoplasmáticas funcionales de células de mamíferos cultivadas en menos de tres horas
• Práctico: realice un procedimiento sencillo sin necesidad de ultracentrifugación por gradientes
• Completo: obtenga fracciones de proteínas citoesqueléticas, unidas a cromatina, nucleares solubles, de membrana y citoplasmáticas a partir de un solo kit
• Células cultivadas: desarrollado y optimizado para el uso con células de mamíferos cultivadas; para las muestras de tejidos utilice el kit de fraccionamiento subcelular para tejidos
• Compatible: utilice extractos para aplicaciones posteriores, como ensayos de proteínas, Western blot, ensayos electroforéticos de cambio de movilidad y ensayos de genes indicadores y de actividad enzimática.
Aplicaciones del fraccionamiento subcelular:
• Extraiga y enriquezca proteínas de diferentes compartimentos celulares
• Aísle proteínas citoplasmáticas, nucleares, de membrana y citoesqueléticas de las mismas células
• Perfile células para proteínas del citoplasma, núcleo, membrana y citoesqueleto
• Estudie la translocación de proteínas
El fraccionamiento de proteínas subcelulares permite la evaluación de la localización de proteínas y el enriquecimiento de proteínas de determinados compartimentos celulares. El kit de fraccionamiento subcelular de proteínas Thermo Scientific incluye una combinación de reactivos para la lisis celular escalonada en fracciones de proteínas citoesqueléticas, unidas a cromatina, nucleares solubles, de membrana y citoplasmáticas en menos de 3 horas. Los extractos de cada compartimento subcelular suelen tener menos del 15 % de contaminación entre fracciones, una pureza suficiente para la mayoría de los experimentos que estudian la localización y redistribución de proteínas.
El kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares para células de cultivo contiene cuatro tampones de extracción, una nucleasa estabilizada y un cóctel inhibidor de proteasa Thermo Scientific Halt. Cada kit contiene suficientes reactivos para fraccionar 50 sedimentos de células de 20 µl cada uno, lo que equivale a aproximadamente 2 g de pasta celular. (Para muestras de tejidos, utilice nuestro kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares para tejidos).
Cuando el primer reactivo del kit se agrega a un sedimento celular, causa la permeabilización selectiva de la membrana, liberando el contenido soluble del citoplasma. El segundo reactivo disuelve las membranas de ER-golgi, mitocondrias y plasma, pero no solubiliza las membranas nucleares. Tras recuperar por centrifugación los núcleos intactos, un tercer reactivo produce el extracto nuclear soluble. Se realiza una extracción nuclear adicional con nucleasas de micrococos para liberar las proteínas nucleares unidas a cromatina. El sedimento insoluble recuperado se extrae con el reactivo final para aislar las proteínas citoesqueléticas.
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Características del kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares para células de cultivo:
• Conciso: extraiga fracciones de proteínas citoesqueléticas, unidas a cromatina, nucleares solubles, de membrana y citoplasmáticas funcionales de células de mamíferos cultivadas en menos de tres horas
• Práctico: realice un procedimiento sencillo sin necesidad de ultracentrifugación por gradientes
• Completo: obtenga fracciones de proteínas citoesqueléticas, unidas a cromatina, nucleares solubles, de membrana y citoplasmáticas a partir de un solo kit
• Células cultivadas: desarrollado y optimizado para el uso con células de mamíferos cultivadas; para las muestras de tejidos utilice el kit de fraccionamiento subcelular para tejidos
• Compatible: utilice extractos para aplicaciones posteriores, como ensayos de proteínas, Western blot, ensayos electroforéticos de cambio de movilidad y ensayos de genes indicadores y de actividad enzimática.
Aplicaciones del fraccionamiento subcelular:
• Extraiga y enriquezca proteínas de diferentes compartimentos celulares
• Aísle proteínas citoplasmáticas, nucleares, de membrana y citoesqueléticas de las mismas células
• Perfile células para proteínas del citoplasma, núcleo, membrana y citoesqueleto
• Estudie la translocación de proteínas
El fraccionamiento de proteínas subcelulares permite la evaluación de la localización de proteínas y el enriquecimiento de proteínas de determinados compartimentos celulares. El kit de fraccionamiento subcelular de proteínas Thermo Scientific incluye una combinación de reactivos para la lisis celular escalonada en fracciones de proteínas citoesqueléticas, unidas a cromatina, nucleares solubles, de membrana y citoplasmáticas en menos de 3 horas. Los extractos de cada compartimento subcelular suelen tener menos del 15 % de contaminación entre fracciones, una pureza suficiente para la mayoría de los experimentos que estudian la localización y redistribución de proteínas.
El kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares para células de cultivo contiene cuatro tampones de extracción, una nucleasa estabilizada y un cóctel inhibidor de proteasa Thermo Scientific Halt. Cada kit contiene suficientes reactivos para fraccionar 50 sedimentos de células de 20 µl cada uno, lo que equivale a aproximadamente 2 g de pasta celular. (Para muestras de tejidos, utilice nuestro kit de fraccionamiento de proteínas subcelulares para tejidos).
Cuando el primer reactivo del kit se agrega a un sedimento celular, causa la permeabilización selectiva de la membrana, liberando el contenido soluble del citoplasma. El segundo reactivo disuelve las membranas de ER-golgi, mitocondrias y plasma, pero no solubiliza las membranas nucleares. Tras recuperar por centrifugación los núcleos intactos, un tercer reactivo produce el extracto nuclear soluble. Se realiza una extracción nuclear adicional con nucleasas de micrococos para liberar las proteínas nucleares unidas a cromatina. El sedimento insoluble recuperado se extrae con el reactivo final para aislar las proteínas citoesqueléticas.
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
TampónTampón de lisis
Cantidad1 kit
Tipo de reactivoTampón de lisis celular, solución detergente, fraccionamiento subcelular
Suficiente para50 muestras
FormularioLíquido
Tipo de productoKit de fraccionamiento de proteínas subcelulares
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Tras su recepción, almacenar el kit a -20 °C o almacenar los componentes individuales como se indica anteriormente. El kit se envía con hielo seco.
Preguntas frecuentes
What products are available for the isolation of subcellular components?
Can you provide the shelf-life for the Subcellular Protein Fractionation Kit for Cultured Cells?
Can I use the Subcellular Protein Fractionation Kit for Cultured Cells (Cat. No. 78840) for subsequent co-immunoprecipitation (co-IP) analysis of different nuclear proteins?
Will M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent extract membrane or cytoskeletal proteins?
What kits do you offer for cell fractionation?
Citations & References (3)
Citations & References
Abstract
DRIM modulates Src activation and regulates angiogenic functions in vascular endothelial cells.
Journal:Cell biology international
PubMed ID:39648301
Downregulated in Metastasis Protein (DRIM) was discovered in malignant epithelial cells and was thought to be mainly a nucleus protein affecting cancer cells. Recent single-cell sequencing analysis suggests that DRIM is abundantly expressed in vascular endothelial cells. There has been no knowledge of the role of DRIM in the endothelium.
Protocol to identify human subcellular alternative protein interactions using cross-linking mass spectrometry.
Journal:STAR protocols
PubMed ID:37384523
Since the start of mass-spectrometry-based proteomics, proteins from non-referenced open reading frames or alternative proteins (AltProts) have been overlooked. Here, we present a protocol to identify human subcellular AltProt and decipher some interactions using cross-linking mass spectrometry. We describe steps for cell culture, in cellulo cross-link, subcellular extraction, and sequential digestion.
Evaluation of a Low-Toxicity PARP Inhibitor as a Neuroprotective Agent for Parkinson's Disease.
Journal:Molecular neurobiology
PubMed ID:33788167
Repurposing PARP-1 inhibitors (PARPi) for non-oncological applications offers an attractive therapeutic strategy for pathological conditions characterized by PARP-1 hyperactivity. In the context of Parkinson's disease (PD), PARP-1 hyperactivity has been linked to neuronal death and disease progression. From a therapy perspective, the evaluation of PARPi as neuroprotective agents may offer