Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit
Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit
Invitrogen™

Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit

El kit de ensayo de ácido glutámico/glutamato oxidasa Amplex™ Red proporciona un método sencillo y sensible para detectar la actividadMás información
Have Questions?
Número de catálogoCantidad
A12221200 ensayos
Número de catálogo A12221
Precio (MXN)
-
Cantidad:
200 ensayos
El kit de ensayo de ácido glutámico/glutamato oxidasa Amplex™ Red proporciona un método sencillo y sensible para detectar la actividad de ácido glutámico/glutamato oxidasa mediante un lector de microplacas de fluorescencia o un fluorímetro.

Consulte nuestra línea completa de ensayos de microplacas de fluorescencia.

• Detecta concentraciones tan bajas como L-ácido glutámico de 10 nm o 40 µU/ml de L-glutamato oxidasa purificado
• Su formato permite realizar varias mediciones en un punto de tiempo
• Diseñado para una mínima interferencia de autofluorescencia

El kit de ensayo de ácido glutámico/glutamato oxidasa Amplex™ Red proporciona un método ultrasensible para detectar ácido glutámico o para supervisar continuamente la actividad del glutamato oxidasa mediante un lector de microplacas de fluorescencia o un fluorímetro. En el ensayo, el glutamato oxidasa oxida el L-ácido glutámico para producir α-cetoglutarato, NH3 y peróxido de hidrógeno. La transaminasa de L-alanina y L-glutamato–piruvato se incluyen en la reacción para regenerar el L-ácido glutámico mediante la transaminación de α-cetoglutarato, lo que provoca varios ciclos de la reacción inicial y una amplificación significativa del peróxido de hidrógeno producido. El peróxido de hidrógeno reacciona con 10-acetil-3,7-dihidroxifenoxacina (reactivo Amplex™ Red) en una proporción estequiométrica 1:1 en una reacción catalizada por peroxidasa de rábano (HRP) para crear un producto altamente fluorescente, la resorufina.

Como la resorufina tiene unos valores máximos de absorción y emisión de fluorescencia de aproximadamente 571 nm y 585 nm respectivamente, hay poca interferencia de autofluorescencia en la mayoría de las muestras biológicas.

Utilice ensayos Amplex™ Red para una amplia gama de investigaciones
Hay disponible una amplia variedad de ensayos Amplex™ Red para el estudio de la señalización de células y lípidos, la neurobiología, el funcionamiento de procesos inflamatorios e inmunitarios, y el metabolismo. También ofrecemos el reactivo Amplex™ UltraRed (n.º de cat. A36006), un reactivo de segunda generación que proporciona una mayor sensibilidad y fluorescencia más brillante, y el reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed (n.º cat. A33855). El reactivo de parada Amplex™ Red/UltraRed ofrece comodidad y control, ya que permite terminar la reacción de generación de la señal de fluorescencia en un momento determinado por el usuario. Después de añadir el reactivo de parada, la señal de fluorescencia permanece estable durante al menos tres horas. También hay disponibles diseños de ensayos y envases personalizados.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteOtras etiquetas o colorantes
FormatoPlaca de 96 pocillos
Cantidad200 ensayos
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de ácido glutámico/glutamato oxidasa
Para utilizar con (equipo)Fluorímetro, Lector de microplacas
Línea de productosAmplex
Tipo de productoKit de ensayo de ácido glutamático/glutamato oxidasa Red
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Citations & References (13)

Citations & References
Abstract
Glutamate excitotoxicity is involved in cell death caused by tributyltin in cultured rat cortical neurons.
Authors:Nakatsu Y, Kotake Y, Komasaka K, Hakozaki H, Taguchi R, Kume T, Akaike A, Ohta S,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16207939
'Tributyltin, an endocrine-disrupting chemical, has been used as a heat stabilizer, agricultural pesticide, and component of antifouling paints. In this study, the neurotoxicity of tributyltin was investigated in cultured rat cortical neurons. Tributyltin caused marked time- and dose-dependent increases in the number of trypan blue-stained cells. Measurement of extracellular glutamate ... More
Iron alters glutamate secretion by regulating cytosolic aconitase activity.
Authors:McGahan MC, Harned J, Mukunnemkeril M, Goralska M, Fleisher L, Ferrell JB
Journal:Am J Physiol Cell Physiol
PubMed ID:15613494
'Glutamate has many important physiological functions, including its role as a neurotransmitter in the retina and the central nervous system. We have made the novel observations that retinal pigment epithelial cells underlying and intimately interacting with the retina secrete glutamate and that this secretion is significantly affected by iron. In ... More
Bispecific small molecule-antibody conjugate targeting prostate cancer.
Authors:Kim CH, Axup JY, Lawson BR, Yun H, Tardif V, Choi SH, Zhou Q, Dubrovska A, Biroc SL, Marsden R, Pinstaff J, Smider VV, Schultz PG,
Journal:
PubMed ID:24127589
'Bispecific antibodies, which simultaneously target CD3 on T cells and tumor-associated antigens to recruit cytotoxic T cells to cancer cells, are a promising new approach to the treatment of hormone-refractory prostate cancer. Here we report a site-specific, semisynthetic method for the production of bispecific antibody-like therapeutics in which a derivative ... More
Single cell glutamate analysis in Aplysia sensory neurons.
Authors:Drake TJ, Jezzini S, Lovell P, Moroz LL, Tan W
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:15848241
'Glutamate is the major excitatory neurotransmitter in the central nervous system. However, techniques and assays available for the determination and detection of glutamate are limited. Here we have applied an effective glutamate assay toward the high-throughput analysis of single neurons. Initial physiological studies and recent immunohistochemical data strongly suggested that ... More
P2X agonist BzATP interferes with amplex-red-coupled fluorescence assays.
Authors:León D, Marín-García P, Sánchez-Nogueiro J, de la O FO, García-Carmona F, Miras-Portugal MT,
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:17562321
'This paper does not have an abstract.'