Alexa Fluor™ 647 Hydrazide
Alexa Fluor™ 647 Hydrazide
Invitrogen™

Alexa Fluor™ 647 Hydrazide

La hidrazida Alexa Fluor™ 647 es útil como trazador de células y como tinte reactivo para etiquetar aldehídos o cetonasMás información
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Número de catálogoCantidad
A205021 mg
Número de catálogo A20502
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 mg
La hidrazida Alexa Fluor™ 647 es útil como trazador de células y como tinte reactivo para etiquetar aldehídos o cetonas en polisacáridos y glicoproteínas. Alexa Fluor™ 647 es un colorante con fluorescencia rojo lejano brillante y una excitación adaptada idealmente para la línea de láser de 633 nm. El tinte Alexa Fluor™ 647, empleado para la generación estable de señales para la obtención de imágenes en citometría de flujo, es soluble en agua e insensible al pH entre pH 4 y pH 10. Además de las formulaciones de colorante reactivo, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 647 conjugado con una serie de anticuerpos, péptidos, proteínas, marcadores y sustratos de amplificación optimizados para la detección y el etiquetado celular (más información).

Información detallada acerca de esta hidracida Alexa Fluor™:

• Etiqueta de fluoróforo: Clorante Alexa Fluor™ 647
• Grupo reactivo: hidrazida
• Reactividad: Aldehídos o cetonas en polisacáridos y glicoproteínas
• Ex/em del conjugado: 649/666 nm
• Coeficiente de extinción: 250 000 cm - 1M - 1
• Colorantes espectralmente similares: APC, Cy5
• Peso molecular: ∼1200

Aplicaciones de seguimiento y rastreo de células
Las hidroxilaminas y las hidrazidas Alexa Fluor™ son útiles como trazadores de células de bajo peso molecular, que no penetran en la membrana y con fijación de aldehídos, que presentan fluorescencia brillante y mayor fotoestabilidad que los rastreadores celulares derivados de otros fluoróforos espectralmente similares. Estos se cargan fácilmente en células mediante microinyección, infusión con pipeta de parche o inducidos por absorción mediante nuestro reactivo de carga de célula pinocítica Influx™. Obtenga más información acerca del seguimiento y rastreo de células.

Aplicaciones de etiquetado de glicoproteínas y polisacáridos
Las hidroxilaminas y las hidrazidas Alexa Fluor™ son moléculas reactivas que se pueden usar para añadir una etiqueta fluorescente a biomoléculas que contienen aldehídos o cetonas. Los aldehídos y las cetonas se pueden introducir en los polisacáridos y las glicoproteínas mediante oxidación y cetonas pueden ser introducidas en polisacáridos y glicoproteínas mediante oxidación con periodato de dioles vecinales. La galactosa oxidasa también se puede utilizar para oxidar los residuos de galactosa terminal de las glucoproteínas a los aldehídos.

Hidracida frente a hidroxilamina
Los derivados de la hidracina reaccionan con cetonas y aldehídos para producir hidracinas relativamente estables. Los derivados de la hidroxilamina (compuestos aminoácidos) reaccionan con los aldehídos y las cetonas para producir oximas. Las oximas son superiores a las hidrazonas con respecto a la estabilidad hidrolítica. Tanto las hidrazonas como las oximas pueden reducirse con el borohidruro de sodio (NaBH4) para aumentar aún más la estabilidad del enlace.

Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de proteínas y anticuerpos Molecular Probes™ para adaptarse a su material inicial y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.

Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaÁcido carboxílico, cetona, aldehído
Emisión666 nm
Excitación649 nm
Etiqueta o tinteAlexa Fluor™ 647
Tipo de productoHidracida
Cantidad1 mg
Fracción reactivaAmina, hidracida
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de etiquetaColorantes Alexa Fluor
Línea de productosAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar a temperatura ambiente y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

What dye can I use that is non-reactive and can show an injection site?

The non-reactive Alexa Fluor and Alexa Fluor hydrazide derivatives may be used for injection site visualization. Other options include the fluorescent polystyrene microspheres, FluoSpheres, and dye-conjugated dextrans. The hydrazide derivatives and 'fixable' dextrans are retained by cross-linking using an aldehyde-based fixative.

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I injected a fluorescent tracer, but cannot detect it after tissue is fixed and sectioned. What am I doing wrong?

Confirm that the tracer you are using crosslinks to proteins or has a primary amine for fixation-either a hydrazide, lysine fixable dextran, or a protein conjugate.
Use aldehyde-based fixatives to cross link the amines on the tracer.
Inject a larger amount or higher concentration of the tracer. Tracers are generally injected at 1-20% concentrations (10 mg/mL or higher).
Confirm that you are using the correct fluorescent filter for detection. You can perform a spot test by pipetting a small amount of the undiluted stock solution of the tracer onto a slide, then view under the filter you are using on your microscope. This will confirm if the tracer fluorescence can be detected and the fluorescent microscope filter is working properly.
Review tissue fixation and handling procedures to confirm if any reagents or processing procedures could be affecting the tracer.

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I have labeled my neurons with an Alexa Fluor conjugated biocytin to look at transport but I wanted to examine only retrograde transport and biocytin appears to be moving retrograde and anterograde. What should I do?

Observing both types of transport is typical for biocytin. The conjugated cholera toxin subunit B products have been observed to travel only retrogradely.

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Do you have a neuronal tracer similar to Lucifer Yellow but in another fluorescent color?

Lucifer Yellow CH is a hydrazide, so any of our Alexa Fluor or fluorescent hydrazides could potentially be used. A listing of them can be found here. (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cell-tracing-tracking-and-morphology/neuronal-tracing/hydrazides-biocytins.html#prd)

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How do I know which tracer to choose for my experiment?

Factors to consider are size of tracer, method of delivery (injection, direct application to tissue, etc.), and if the tracer needs to be fixable. Here are some links to details about the various classes of neuronal tracers we offer and how to choose between them:

Neuronal Tracing (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cell-tracing-tracking-and-morphology/neuronal-tracing.html)
Choosing a Tracer (https://www.thermofisher.com/us/en/home/references/molecular-probes-the-handbook/fluorescent-tracers-of-cell-morphology-and-fluid-flow/choosing-a-tracer.html)
Imaging Analysis (http://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-Materials/bioprobes-50-journal.pdf)

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Citations & References (4)

Citations & References
Abstract
Zebrafish calls for reinterpretation for the roles of p/q calcium channels in neuromuscular transmission.
Authors:Wen H, Linhoff MW, Hubbard JM, Nelson NR, Stensland D, Dallman J, Mandel G, Brehm P,
Journal:J Neurosci
PubMed ID:23616544
A long-held tenet of neuromuscular transmission is that calcium-dependent neurotransmitter release is mediated by N-type calcium channels in frog but P/Q-type channels in mammals. The N-type assignment in frog is based principally on pharmacological sensitivity to ?-conotoxin GVIA. Our studies show that zebrafish neuromuscular transmission is also sensitive to ?-conotoxin ... More
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