Essential 8™ Adaptation Kit
Essential 8™ Adaptation Kit
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Essential 8™ Adaptation Kit

El kit de adaptación Essential 8™ incluye el medio Essential 8™ y laminina humana recombinante 521 (rhLaminina-521) para una supervivenciaMás información
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Número de catálogoCantidad
A259351 Kit
Número de catálogo A25935
Precio (MXN)
-
Cantidad:
1 Kit
El kit de adaptación Essential 8™ incluye el medio Essential 8™ y laminina humana recombinante 521 (rhLaminina-521) para una supervivencia óptima durante la transición de un cultivo dependiente del alimentador a un cultivo libre del alimentador. Se ha demostrado que la rhLaminin-521 promueve la supervivencia celular en condiciones estresantes en ausencia de inhibidores de moléculas pequeñas. Además, se ha demostrado que la rhLaminina-521 respalda el crecimiento de PSC para > 20 pases sin signos de anomalías cariotípicas y que mantiene la capacidad de las PSC de diferenciarse en los tres linajes de líneas de gérmenes. La rhLaminina-521 también se puede adquirir por separado.

El kit de adaptación Essential 8 es:
• Sólida: transición de las células entre sistemas de cultivo dependientes de alimentación y sin alimentación con un esfuerzo mínimo
•Fisiológicamente relevante: las células se expanden con una diferenciación mínima
•Ampliable: pases de líneas de células madre como células individuales sin impacto en la estabilidad genética

Transición sin problemas
Cuando se utiliza con el medio Essential 8, la rhLaminina-521 proporciona una matriz de cultivo sólida que favorece la adherencia y expansión de células madre pluripotentes durante la transición desde sistemas de cultivo dependientes de alimentación.

Expansión segura
La rhLaminina-521 se expresa en blastocistos y, por lo tanto, proporciona un entorno que imita el nicho de células madre humanas.

Ampliación sencilla
La rhLaminina-521 favorece el mantenimiento estable de células madre pluripotentes como células individuales en ausencia de inhibidores ROCK.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de célulaCélulas madre pluripotentes
Línea de productosEssential 8
Tipo de productoKit de adaptación de células madre
Cantidad1 Kit
Condiciones de envíoSuplemento y matriz, hielo seco, basal, ambiente
ClasificaciónSin componentes xenobióticos
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 100 µg de rhLaminina-521, almacenar a -10 a -30 °C, proteger de la luz
• 500 ml de medio basal, almacenar a 2-8 °C, proteger de la luz
• 10 ml de suplemento, almacenar de -5 a -20 °C, proteger de la luz

Preguntas frecuentes

Can I use the Poly-D-Lysine matrix with other coatings?

iPSC-derived neurons have been cultured successfully on Poly-D-Lysine with a secondary coating of mouse and human laminin.

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I am interested in using StemFlex Medium in somatic cell reprogramming. What protocol should I follow for blood cells?

We have evaluated the use of Cytotune-iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit (Cat. No. A16517) for somatic cell reprogramming of CD34+ blood cells. For CD34+ cells, follow the instructions provided in the Cytotune 2.0 reprogramming manual for feeder-free reprogramming (pgs. 39-44). On Day 3, you can utilize rhVTN-N (Cat. No. A14700), Geltrex (Cat. No. A1413302), or rhLaminin-521 (Cat. No. A29248 or A29249). From Day 8 onward, rather than feeding daily with Essential 8 Medium, reprogrammed CD34+ cells should be fed every-other-day with StemFlex Medium.

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I am interested in using StemFlex Medium in somatic cell reprogramming. What protocol should I follow for human fibroblasts?

We have evaluated the use of Cytotune-iPS 2.0 Sendai Reprogramming Kit (Cat. No. A16517) for somatic cell reprogramming of both neonatal and adult human dermal fibroblasts. For fibroblasts, follow the instructions provided in the Cytotune 2.0 reprogramming manual for feeder-free reprogramming (pgs. 16-20). On Day 7, you may use rhVTN-N (Cat. No. A14700), Geltrex matrix (Cat. No. A1413302), or rhLaminin-521 (Cat. No. A29248 or A29249). From Day 8 onward, rather than feeding daily with Essential 8 Medium, we recommend that you feed reprogrammed fibroblasts every-other-day with StemFlex Medium.

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Can I use Geltrex matrix instead of rhLaminin-521 for clonal expansion workflows where cells are seeded at 1-5 cells per well of a 96-well plate?

We have not yet evaluated the Geltrex matrix system for clonal expansion in the presence of StemFlex Medium. However, rhLaminin-521 does provide optimal survival of cells following single-cell passaging and thus this matrix is recommended for such critical applications.

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What protocol is recommended for delivery of Cas9 protein:guide RNA complex to my PSCs cultured in StemFlex Medium?

We recommend use of the Neon Electroporation device for electroporation of PSCs with Cas9 protein:guide RNA complex following the protocol guidance in the following demonstrated protocol (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/PG1584-PJT1313-COL31227-Demonstrated-Protocol-Performing-CRISPR-Cas9-FHR.pdf); see the section entitled “Knockout by electroporation of RNP using the Neon Transfection System.” We have seen that the Neon electroporation protocols 7 and 14 provide optimal indel formation while maintaining cell survival. However, the electroporation conditions may need to be optimized for your pluripotent cell line.

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