Pierce™ DSP, formato No-Weigh™

Thermo Scientific Pierce DSP (reactivo de Lomant) es un entrecruzador de éster N-hidroxisucinimida (éster NHS) homo-bifuncional insoluble en agua que es escindible con tiol, reactivo a aminas primarias y útil para numerosas aplicaciones. DSP contiene un éster NHS reactivo a aminas en cada extremo de un brazo del separador de 8 carbonos. Los ésteres NHS reaccionan con las aminas primarias a un pH 7–9 para formar enlaces amida estables liberando N-hidroxisucinimida. Las proteínas, incluidos los anticuerpos, suelen tener varias aminas primarias en la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido que están disponibles como dianas para los reactivos de entrecruzamiento de ésteres de NHS. DSP es no sulfonada e insoluble en agua, por lo que primero debe disolverse en un disolvente orgánico y luego añadirse a la mezcla de reacción acuosa. Debido a que DSP no posee un grupo cargado, es lipofílico y permeable a la membrana, por lo que resulta útil para conjugación intracelular e intramembranal. Un análogo sulfonado de DSP (DTTSP) es soluble en agua. DSS, el análogo no separable del entrecruzador DSP, también está disponible para aplicaciones que requieren un brazo separador estable que no se puede escindir en presencia de agentes reductores.

Los productos Thermo Scientific No-Weigh son reactivos especiales suministrados en un formato previamente indicado. El envase prepesado evita la pérdida de reactividad del reactivo y la contaminación con el tiempo eliminando la apertura y el cierre repetitivos del vial. El formato permite el uso de un vial de reactivo fresco cada vez, lo que elimina la molestia de pesar pequeñas cantidades de reactivos y reduce las preocupaciones sobre la estabilidad del reactivo.

DSP contiene un éster N-hidroxosulfosucinimida (NHS) reactivo a aminas en cada extremo de un brazo del separador de 8 carbonos. Los ésteres NHS reaccionan con las aminas primarias a un pH 7-9 para formar enlaces amida estables, junto con la liberación del grupo de salida de N-hidroxisucinimida. Las proteínas, incluidos los anticuerpos, suelen tener varias aminas primarias en la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido que están disponibles como dianas para los reactivos de entrecruzamiento de ésteres de NHS. DSS, el análogo no escindible del entrecruzador DSP, también está disponible para aplicaciones que requieren un brazo separador estable que no se puede escindir en presencia de agentes reductores.

Características del reactivo de Lomant:

• Grupos reactivos: Éster NHS (ambos extremos)
• Reactivo a: grupos amino (aminas primarias)
• El éster NHS reactivo a aminas reacciona rápidamente con cualquier molécula que contenga una amina primaria
• El enlace de disulfuro en el agente separador se divide fácilmente por 10-50 mM de DTT o TCEP a pH 8,5
• El agente separador también es escindible con la reducción del tampón de carga de muestras SDS-PAGE
• El entrecruzador escindible permite la separación de productos entrecruzados
• Insoluble en agua (disolver primero en DMF o DMSO); en comparación con DTSSP (Sulfo-DSP)
• Membrana permeable, permitiendo el entrecruzamiento intracelular

Aplicaciones:
• Entrecruzamiento químico de proteínas intracelulares antes de la inmunoprecipitación y la lisis celular
• Interacciones de proteínas fijas para permitir la identificación de interacciones de proteínas débiles o transitorias
• Fijación de tejidos para la inmunotinción sin dañar el ARN
• Entrecruzamiento de proteínas para crear bioconjugados mediante reacciones de un paso
• Inmovilización de proteínas en superficies recubiertas con aminas

Propiedades de DSP
• Nombres alternativos: Reactivo de Lomant, DTSP
• Fórmula molecular: C₁₄H₁₆N₂O₈S₂
• Peso molecular: 404,42
• Longitud del agente del separador: 12,0 Å (8 átomos)
• Número orden de compra (CAS): 57757-57--0
• Grupos reactivos: Los ésteres NHS, reaccionan con aminas primarias a pH 7,0–9,0

Especificaciones del DSP:
Fabricamos el DSP con las mejores especificaciones posibles para producir los bioconjugados más específicos, garantizar la integridad de los datos y proporcionarle el mayor grado de uniformidad. Se prueba que cada lote de DSP cumpla las siguientes especificaciones mínimas.
• Identidad: La secuencia IR solo muestra los picos característicos de la estructura y los grupos funcionales de DSP
• Pureza: > 95 % por RMN cuantitativa (el estándar más alto de la pureza de entrecruzado)

Referencias del producto
Guía de aplicación del entrecruzado -- busque referencias bibliográficas recientes de este producto