RiboPure™ RNA Purification Kit, blood
RiboPure™ RNA Purification Kit, blood
Invitrogen™

RiboPure™ RNA Purification Kit, blood

Los kits RiboPure™-Blood sirven para el aislamiento de ácido ribonucleico (ARN) de alta calidad directamente a partir de sangre completa.Más información
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Número de catálogoCantidad
AM192840 preparaciones
Número de catálogo AM1928
Precio (MXN)
-
Cantidad:
40 preparaciones
Los kits RiboPure™-Blood sirven para el aislamiento de ácido ribonucleico (ARN) de alta calidad directamente a partir de sangre completa. El kit combina dos métodos de purificación de ARN para eliminar eficazmente los componentes sanguíneos (proteínas, ADN genómico, hemo y ARNasas) que pueden comprometer los procedimientos posteriores. El kit incluye reactivos suficientes para 40 purificaciones de ARN a partir de muestras de sangre completa de 0,3 a 0,5 ml cada una. Ventajas del kit RiboPure™-Blood:

• Purifique el ARN total directamente a partir de sangre completa, sin recuperación previa de leucocitos
• Procedimiento rápido y sencillo: de sangre a ARN en menos de 30 minutos
• Incluye una solución RNAlater™: para almacenar las muestras de sangre 3 días o más a temperatura ambiente
• Incluye reactivos DNAfree™: para disponer de ARN apto para análisis de matriz y transcripción inversa y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR)

Aplicaciones
El kit RiboPure™-Blood genera altas producciones de ARN puro directamente a partir de sangre completa, lo que elimina la necesidad de aislar leucocitos antes de la purificación del ARN. El ARN recuperado con el kit RiboPure™-Blood puede ser utilizado en las aplicaciones más exigentes, incluidos el análisis de matriz y la RT-PCR en tiempo real. Las producciones medias de ARN son de entre 2 y 4 µg/0,5 ml de sangre completa (la variación se debe a diferencias en el número de leucocitos entre muestras).

Estabilizar el ARN en la sangre completa
Al recoger muestras de sangre para el análisis de ARN, suele ser necesario almacenar las muestras antes del aislamiento del ARN. El kit RiboPure-Blood™ contiene una solución RNAlater para la estabilización del ARN en la sangre completa. Además, “congela” el perfil de expresión génica de las células. Las muestras tratadas se pueden almacenar de forma segura a temperatura ambiente durante largos períodos (hasta tres días o más). Las muestras de sangre almacenadas en la solución RNAlater™ producen ARN de calidad comparable a las muestras de sangre procesadas directamente (consulte la figura).

Procedimiento sencillo para ARN de alta pureza
El procedimiento RiboPure™-Blood consta de tres pasos: 1) adición de solución de lisis directamente en sangre completa fresca o tratada con RNAlater; 2) purificación inicial de ARN inicial mediante la extracción de fenol/cloroformo y 3) purificación final de ARN en un filtro de fibra de vidrio. Se puede realizar un tratamiento de ADNasa adicional con los reactivos DNAfree™ incluidos en el kit. El procedimiento completo, incluido el tratamiento con ADNasa, puede completarse en menos de 1 hora.

Productos acompañantes
El ARN se puede enriquecer posteriormente el ARNm de glóbulos blancos (leucocitos) utilizando nuestros kits GLOBINclear™ con el objeto de eliminar de forma selectiva las transcripciones de la globina. El kit de aislamiento de ARN Mouse RiboPure™-Blood (núm. de cat. AM0951) también está disponible para la recuperación de ARN total (opcionalmente también de micro ARN) directamente de sangre de ratón o de rata. Mouse RiboPure-Blood™ incluye tubos de muestra precargados con solución RNAlater para evitar la degradación del ARN y conservar los perfiles de ARN.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de producto finalARN total
Para utilizar con (aplicación)Análisis de micromatrices, PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR), PCR de transcriptasa inversa (RT-PCR), northern blot
Compatibilidad de alto rendimientoNo compatible con alto rendimiento (manual)
N.º de reacciones40 preparaciones
Escala preparativaMuestras de sangre de 100 µl a 1 ml (tamaño medio)
Línea de productosAmbion, RiboPure
Tiempo de purificación30 min
Cantidad40 preparaciones
Cantidad de material de partidaHasta 0,5 ml de sangre completa
Producción4 µg
FormatoCartucho de filtro, tubo
Isolation TechnologyExtracción orgánica, columna de centrifugación
Tipo de muestraSangre
TargetARN total
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• 25 ml de solución de elución (4 °C)
• 40 ml de solución de lisis (4 °C)
• 25 ml de ácido fenol:cloroformo (4 °C)
• 5 ml de solución de acetato de sodio (4 °C)
• 35 ml de solución de lavado 1 (temperatura ambiente/4 °C)
• 70 ml de concentrado de lavado 2/3 (temperatura ambiente/4 °C)
• 100 ml de solución RNAlater™ (temperatura ambiente)
• 40 cartuchos filtrantes (temperatura ambiente)
• 80 tubos de recogida (temperatura ambiente)
• 100 µl de ADNasa I, 8 U/µl (–20 °C, sin escarcha)
• 850 µl 20X tampón ADNasa (–20 °C)
• 1,2 ml de reactivo de inactivación de ADNasa (–20 °C)
• 1 ml de colorante de carga de formaldehído (–20 °C)

Este kit contiene suficientes reactivos para el aislamiento de 40 ARN a partir de 300 a 500 µl de sangre completa.

Preguntas frecuentes

What is the difference between the RiboPure Blood Purification Kit (Cat. No. AM1928) and Mouse RiboPure Blood RNA Isolation kit (Cat. No. AM1951)?

The former (Cat. No. AM1928) is for isolation of RNA from human blood and the latter (Cat. No. AM1951) is for isolation of RNA from mouse and rat blood. Both kits have the same columns but differ in protocol and the wash 1 buffer, wash 2/3 buffer, and sodium acetate solutions. We do not recommend using the mouse kit for human blood samples. The mouse kit accommodates the difference in viscosity of mouse/rat vs. human blood and also the higher mouse and rat blood RNA yield. The mouse kit allows recovery of either total RNA containing small RNAs or total RNA depleted of small RNAs based on which protocol in the manual was followed. With the RiboPure Blood Purification Kit, using the standard protocol in the manual, you can isolate total RNA depleted of small RNAs, but with an alternate protocol, you can isolate total RNA containing small RNAs. Alternatively, if you need small RNAs alone, then you should follow the above alternate protocol for isolation of total RNAs containing small RNAs, and then follow Section IVA in the mirVana miRNA Isolation Kit manual (Cat. No AM1560).

What is the composition of the elution solution in the RiboPure-Blood Purification Kit (Cat. No. AM1928)?

Its composition is 0.1 mM EDTA in nuclease-free water.

What is the column cut-off size for the RiboPure RNA Purification Kits?

The column cut-off size is 200 nt. Using a RiboPure kit is not appropriate for miRNA recovery. For miRNA isolation, we would suggest using a mirVana kit, the TRIzol Plus RNA Purification Kit, or the PureLink RNA Micro Kit.

What are the differences in technology between the PureLink RNA Mini Kit and RiboPure RNA Purification Kits?

The PureLink RNA Mini Kit provides rapid column-based purification of total RNA, without organic lysis (phenol/chloroform). You can obtain up to 1,000 µg of purified RNA from a single extraction. The RiboPure RNA Purification Kits combine a phenol/guanidine thiocyanate solution with a glass-fiber filter purification method.

Do you have any tips for RNA isolation when working with blood samples?

Please visit our website for tips for working with blood samples.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our RNA Sample Collection, Protection, and Isolation Support Center.

Citations & References (5)

Citations & References
Abstract
Stability of cord blood RNA measured by house keeping transcripts: relevance for large-scale studies of childhood leukaemia.
Authors:Olsen M, Madsen HO, Hjalgrim H, Ford A, Schmiegelow K
Journal:Leukemia
PubMed ID:17051240
Comparison of the MagNA pure LC automated system and the RiboPure-Blood RNA manual method for RNA extraction from multiple myeloma bone marrow samples conserved in an RNA stabilizer.
Authors:Garcia-Effron G, Gamarra S, Crooke A, Martínez-Sánchez P, Lahuerta J, Martínez-López J
Journal:Int J Lab Hematol
PubMed ID:17474887
'A total of 62 frozen bone marrow specimens conserved in RNA later (Ambion) were processed using two different extraction methods, the MagNA Pure LC system (MAG; Roche) and the manual RiboPure-Blood RNA method (RIBO; Ambion); Beta glucoronidase RNA (GUS) was amplified by LightCycler PCR to evaluate the quality of both ... More
Expression profile of MicroRNAs in young stroke patients.
Authors:Tan KS, Armugam A, Sepramaniam S, Lim KY, Setyowati KD, Wang CW, Jeyaseelan K
Journal:PLoS One
PubMed ID:19888324
The methods currently available for diagnosis and prognosis of cerebral ischaemia still require further improvements. Micro-RNAs (small non-coding RNAs) have been recently reported as useful biomarkers in diseases such as cancer and diabetes. We therefore carried out microRNA (miRNA) profiling from peripheral blood to detect and identify characteristic patterns in ... More
MicroRNA expression in the blood and brain of rats subjected to transient focal ischemia by middle cerebral artery occlusion.
Authors:Jeyaseelan K, Lim KY, Armugam A
Journal:Stroke
PubMed ID:18258830
Several hundred small RNAs called microRNAs (miRNAs) have been identified and characterized from various organisms, including humans. In humans, some of these miRNAs have been found to regulate (patho)physiologic conditions such as tumor progression/regression, cholesterol and glucose homeostasis, etc. In this report, we present data on the miRNAs expressed under ... More
Nonsense mutations in hERG cause a decrease in mutant mRNA transcripts by nonsense-mediated mRNA decay in human long-QT syndrome.
Authors:Gong Q, Zhang L, Vincent GM, Horne BD, Zhou Z
Journal:Circulation
PubMed ID:17576861
Long-QT syndrome type 2 (LQT2) is caused by mutations in the human ether-a-go-go-related gene (hERG). More than 30% of the LQT2 mutations result in premature termination codons. Degradation of premature termination codon-containing mRNA transcripts by nonsense-mediated mRNA decay is increasingly recognized as a mechanism for reducing mRNA levels in a ... More