El kit de extracción de gel de ADN de partículas de sílice Thermo Scientific es un sistema sencillo y eficaz para la extracción de ADN de geles de agarosa y mezclas de reacción. El kit utiliza el protocolo modificado de Vogelstein y Gillespie, empleando la solubilización del gel de agarosa y la absorción selectiva de ácidos nucleicos a una concentración salina elevada en partículas de sílice especialmente preparadas. Las partículas de sílice unidas al ADN se lavan para eliminar contaminantes y el ADN puro es eluido con un tampón TE o agua.
Este método requiere pocas manipulaciones y es más rápido y fácil de realizar que otros métodos de extracción de base orgánica. En comparación con los kits de extracción de gel basados en columna, el kit de extracción de gel de ADN ofrece flexibilidad para aumentar o reducir los volúmenes de reacción y elución. El ADN purificado es adecuado para todos los procedimientos comunes de biología molecular, incluyendo digestión de restricción, clonación, secuenciación, etc.
Aspectos destacados•
Flexible: tanto los volúmenes de reacción como los de elución son fáciles de aumentar y reducir
•
Práctico: más del 80 % de recuperación de ADN
•
Rápido: la purificación solo tarda entre 15 y 20 minutos
•
Eficaz: adecuado para fragmentos de ADN de hasta 100 bp
•
Seguro: no implica la extracción de fenol
Aplicaciones• Purificación de fragmentos de ADN a partir de geles de agarosa preparados con tampones
TAE o
TBE• Concentración de muestras de ADN para desalar o cambiar el tampón
• Eliminación de enzimas después de PCR, digestión de restricción, desfosforilación o reacciones de etiquetado
• Eliminación de nucleótidos, cebadores y dímeros de imprimación no incorporados
• Eliminación de los enlazadores tras la ligadura
• Eliminación de sales residuales, fenol, cloroformo o bromuro de etidio
• Purificación de ADN plasmídico libre de ARN
Incluye polvo de sílice, tampón de suspensión de unión, tampón de lavado, tampón de conversión TBE, protocolo detallado
NotaSe debe tener cuidado para evitar dañar el ADN con luz UV cuando el fragmento de ADN purificado en gel se utilice en reacciones de clonación posteriores. Utilice siempre una caja de luz ultravioleta de longitud de onda larga (360 nm) durante la excisión del fragmento del gel. Si solo dispone de una caja de luz ultravioleta de longitud de onda corta (entre 254 y 312 nm), reduzca la exposición a la luz ultravioleta a pocos segundos o conserve el gel en una placa de vidrio o plástico. Como alternativa, se pueden incluir tintes visibles en los geles estándar de agarosa con el fin de poder visualizar las bandas de ADN con la luz ambiental (2, 3).
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.