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Citas y referencias (7)
Invitrogen™
pBAD/TOPO™ ThioFusion™ Expression Kit
El kit de expresión pBAD/TOPO™ ThioFusion™ está diseñado para la clonación en un solo paso y la expresión regulada deMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| K37001 | 20 reacciones |
Número de catálogo K37001
Precio (MXN)
-
Cantidad:
20 reacciones
El kit de expresión pBAD/TOPO™ ThioFusion™ está diseñado para la clonación en un solo paso y la expresión regulada de proteínas de fusión de tiorredoxina en E. coli (Figura 1). El vector pBAD/Thio-TOPO™ codifica la tiorredoxina His-Patch como socio de fusión N-terminal. La fusión de la tiorredoxina puede aumentar significativamente la solubilidad de muchas proteínas difíciles de expresar y mejorar la producción de proteínas. El vector presenta las siguientes características adicionales (Figura 2):
• El vector presenta un promotor de araBAD para una expresión completamente regulada en el vector activado por E. coli I para la clonación TOPO™ en 5 minutos de productos de PCR amplificados por Taq
• Etiqueta de polihistidina C-terminal (6xHis) para la purificación con resina quelante de níquel y para la detección con un anticuerpo anti-His (C-terminal)
• Epítopo C-terminal V5 para la detección con un anticuerpo anti-V5
• Sitio de escisión de enterocinasa para una escisión eficaz de la etiqueta de fusión N-terminal con enterocinasa EKMax™
• El vector presenta un promotor de araBAD para una expresión completamente regulada en el vector activado por E. coli I para la clonación TOPO™ en 5 minutos de productos de PCR amplificados por Taq
• Etiqueta de polihistidina C-terminal (6xHis) para la purificación con resina quelante de níquel y para la detección con un anticuerpo anti-His (C-terminal)
• Epítopo C-terminal V5 para la detección con un anticuerpo anti-V5
• Sitio de escisión de enterocinasa para una escisión eficaz de la etiqueta de fusión N-terminal con enterocinasa EKMax™
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Resistencia bacteriana a los antibióticosAmpicilina (AMPR)
Cepa bacteriana o de levaduraTOP10
HendiduraSitio de reconocimiento de EK (enterocinasa)
Sistema constitutivo o inducibleInducible
Mecanismo de expresiónExpresión basada en células
Sistema de expresiónE. coli
Agente inductorArabinosa
Tipo de productoKit de expresión lentiviral
Cantidad20 reacciones
Agente de selección (eucariótico)Ninguno
VectorpBAD
Método de clonaciónTOPO-TA
Línea de productosTOPO, ThioFusion
PromotoraraBAD
Etiqueta de proteínaEtiqueta His (6x), Etiqueta de epítopo V5, Tiorredoxina
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Cada kit de expresión pBAD/TOPO™ ThioFusion™ contiene dos cajas y el medio E. coli LMG194. La caja de expresión pBAD/TOPO™ ThioFusion™ contiene todos los reactivos necesarios para la PCR (excepto polimerasa Taq), entre los que se incluyen 200 ng de vector pBAD/Thio-TOPO™ activado por topoisomerasa I, agua estéril, dNTP, tampón 10X para PCR, solución salina, plantilla de control y cebadores, L-arabinosa al 20%, cebadores para secuenciación o cribado por PCR y un plásmido de control de expresión. Conservar a -20°C. La caja One Shot™ contiene todos los reactivos necesarios para la transformación, entre los que se incluyen 21 alícuotas de un solo uso de 50 μl de E. coli TOP10 químicamente competente, medio S.O.C. y plásmido de control superenrollado de pUC19. Conservar la caja One Shot™ a -80°C. Conservar el medio E. coli LMG194 entre 2 y 8°C. Se garantiza la estabilidad de todos los componentes durante 6 meses si se almacenan correctamente.
Preguntas frecuentes
How much L-arabinose should I use to induce expression with the pBAD expression system?
Should I use TOP10 cells or the LMG194 E. coli strain you offer for expression with my pBAD system?
What competent cells do you recommend I use for expression with my pBAD expression system?
Can you tell me the sequence of primers that can be used in pBAD vectors to sequence my gene of interest?
Do you have a list of the cap colors for the pBAD vectors?
Citations & References (7)
Citations & References
Abstract
A protein kinase encoded by the t complex responder gene causes non-mendelian inheritance
Journal:Nature
PubMed ID:10647005
'Males heterozygous for the t-haplotype form of mouse chromosome 17 preferentially transmit the t-chromosome to their progeny. Several distorter/sterility loci carried on the t-haplotype together impair flagellar function in all spermatozoa whereas the responder, Tcr, rescues t-sperm but not wild-type sperm. Thus, t-sperm have anadvantage over wild-type sperm in fertilizing
The cathepsin B of Toxoplasma gondii, toxopain-1, is critical for parasite invasion and rhoptry protein processing.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:12000756
'Cysteine proteinases play a major role in invasion and intracellular survival of a number of pathogenic parasites. We cloned a single copy gene, tgcp1, from Toxoplasma gondii and refolded recombinant enzyme to yield active proteinase. Substrate specificity of the enzyme and homology modeling identified the proteinase as a cathepsin B.
Bacterial cell killing mediated by topoisomerase I DNA cleavage activity.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:16159875
'DNA topoisomerases are important clinical targets for antibacterial and anticancer therapy. At least one type IA DNA topoisomerase can be found in every bacterium, making it a logical target for antibacterial agents that can convert the enzyme into poison by trapping its covalent complex with DNA. However, it has not
Degradation of corn fiber by Clostridium cellulovorans cellulases and hemicellulases and contribution of scaffolding protein CbpA.
Journal:Appl Environ Microbiol
PubMed ID:16000754
'Clostridium cellulovorans, an anaerobic bacterium, degrades native substrates efficiently by producing an extracellular enzyme complex called the cellulosome. All cellulosomal enzyme subunits contain dockerin domains that can bind to hydrophobic domains termed cohesins which are repeated nine times in CbpA, the nonenzymatic scaffolding protein of C. cellulovorans cellulosomes. In this
Factor B and the mitochondrial ATP synthase complex.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11744738
Factor B is a subunit of the mammalian ATP synthase complex, whose existence has been controversial. This paper describes the molecular and functional properties of a recombinant human factor B, which when added to bovine submitochondrial particles depleted of their factor B restores the energy coupling activity of the ATP