pENTR™ 5'-TOPO™ TA Cloning™ Kit, with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli
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Invitrogen™

pENTR™ 5'-TOPO™ TA Cloning™ Kit, with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli

El kit pENTR™ 5’-TOPO™ TA Cloning™ combina la tecnología TOPO™ Cloning de Invitrogen y las tecnologías MultiSite Gateway™ para facilitarMás información
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Número de catálogoCantidad
K5912020 reacciones
Número de catálogo K59120
Precio (MXN)
-
Cantidad:
20 reacciones
El kit pENTR™ 5’-TOPO™ TA Cloning™ combina la tecnología TOPO™ Cloning de Invitrogen y las tecnologías MultiSite Gateway™ para facilitar la clonación en un solo paso en cinco minutos de un producto PCR amplificado con polimerasa Taq que codifica un promotor eucariótico de interés en un vector de entrada MultiSite Gateway™ con una eficacia ≥85 % Una vez clonado, su promotor eucariótico puede ser transferido desde el vector pENTR™ 5'-TOPO™ a un vector de destino MultisSite Gateway™ adecuado en una reacción de recombinación MultiSite Gateway™ LR con otros clones de entrada adecuados para generar una construcción de expresión.

Este kit se puede utilizar en combinación con el kit de vectores lentivíricos ViraPower™ HiPerform sin promotor Gateway™ o el kit de construcción de vectores en tres fragmentos MultiSite Gateway™.

Ventajas
• Elija el mejor promotor para sus experimentos y la línea celular al expresar de forma eficaz el gen de interés de múltiples construcciones de promotores
• Cuando se utiliza junto con el kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ lentivírico sin promotor, puede transducir y expresar de manera eficaz el gen de interés impulsado por el promotor de elección tanto en células de mamíferos que se dividen y no se dividen


Características principales
• Clonación de PCR rápida con tecnología de clonación TOPO™ para la clonación del elemento 5’
• Sitios attL4 y attR1 para la compatibilidad con la reacción MultiSite Gateway™ LR para una mayor flexibilidad

El kit incluye
• Kit pENTR™ 5´-TOPO™ TA Cloning™
• E. coli químicamente competente One Shot™ TOP10 (C4040-03)

SKU relacionados
• Sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ lentivírico sin promotor Gateway™ (A111451)
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ sin promotor Gateway™ (A11146)
• Kit de construcción de vectores en tres fragmentos MultiSite Gateway™ (12537-023)

Para uso exclusivo en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de productoKit de clonación de TA
Cantidad20 reacciones
VectorpENTR, vectores TOPO-TA Cloning
Método de clonaciónTOPO-TA
Línea de productosOne Shot
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit de clonación pENTR™ 5´-TOPO™ TA Cloning™ con E. coli TOP10 One Shot™ químicamente competente contiene dos cajas.

La caja de clonación TOPO™ contiene suficiente vector pENTR™ 5´-TOPO™ linealizado y activado con topoisomerasa I para 20 reacciones de clonación, dNTP, solución de sal, cebadores y muestras de control y cebadores de secuenciación. Conservar a -20°C.

La caja One Shot™ TOP10 contiene reactivos de transformación, incluidos 20 alícuotas de 50 μl de un solo uso de células competentes One Shot™, medio S.O.C. y control de plásmidos superenrollado pUC19. Conservar a -80°C.

Preguntas frecuentes

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best molar ratio of PCR product:vector to use for TOPO TA cloning? Is there an equation to calculate the quantity to use?

We suggest starting with a molar ratio of 1:1 (insert:vector), with a range of 0.5:1 to 2:1. The quantity used in a TOPO cloning reaction is typically 5-10 ng of a 2 kb PCR product.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 (insert:vector ratio)

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio