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Materiales en línea y descargables para la cuantificación fluorimétrica Qubit
Los manuales, folletos, notas de aplicación, descargas, demostraciones, vídeos y otros recursos de esta sección le ayudarán a sacar el máximo partido a su fluorímetro Qubit.
Documentación y literatura
Solución de Qubit Flex SAE Software para compatibilidad con el cumplimiento de la norma 21 CFR Parte 11
Folleto de ensayos y fluorímetros Qubit
Folleto de cuantificación de ARN y ADN
Hojas de información de ensayos Qubit
Cuantificación fluorimétrica Qubit frente a mediciones de espectrofotómetro
Nota de aplicación Qubit Flex
Ensayos Qubit
Prácticas recomendadas de pipeteo
Detección de endotoxinas
Demostraciones y vídeos
Registre su instrumento
Registre su instrumento para recibir notificaciones de actualizaciones de firmware.
Actualizaciones de firmware
Descargue aquí el firmware más reciente para los fluorímetros Qubit 4 y Qubit Flex.
Qubit 4 Fluorometer
Qubit Flex Fluorometer
Solución de software Qubit Flex SAE para compatibilidad con el cumplimiento de la norma 21 CFR Parte 11
Archivos de componentes de software e instrucciones generales
Para implementar la solución de firmware Qubit Flex SAE para compatibilidad con el cumplimiento de la norma 21 CFR Parte 11 en los fluorímetros Qubit Flex, es necesario instalar, activar y conectar entre sí los siguientes componentes.
La solución de software Qubit Flex SAE para compatibilidad con el cumplimiento de la norma 21 CFR Parte 11 consta de:
- Software SAE: Se utiliza para configurar los ajustes de seguridad, auditoría y firma electrónica para el Qubit Flex Fluorometer. El software SAE consta de
- la consola de administración SAE (instalada en un servidor con una dirección IP estática)
- el perfil de aplicación Qubit Flex SAE
- Licencia SAE: Se utiliza para activar los ajustes de SAE para el Qubit Flex Fluorometer
- Modo SAE: Firmware del Qubit Flex Fluorometer (versión 1.7.0 o posterior) que se conecta de forma remota con la consola de administración SAE y se activa mediante el archivo de clave de licencia SAE
Para obtener más información sobre estos componentes, consulte la solución de software Qubit Flex SAE para compatibilidad con la norma 21 CFR Parte 11.
Software SAE
Para descargar el software de la consola de administración SAE y el perfil de la aplicación de Qubit Flex, haga clic en los botones de descarga correspondientes que aparecen a continuación. Las notas de la versión también están disponibles para el software de la consola de administración SAE.
IMPORTANTE: Únicamente el personal que gestiona los procedimientos de seguridad, auditoría y firma electrónica en la institución debe descargar el software de la consola de administración SAE. Así mismo, solo el personal que utilizará el software de la consola de administración SAE debe descargar el perfil de aplicación de Qubit Flex.
Licencia SAE
Se DEBE adquirir una licencia Qubit Flex SAE para obtener un archivo de clave de licencia que permita el modo SAE en el instrumento Qubit Flex. Visite la página del producto o póngase en contacto con su representante de ventas de Thermo Fisher Scientific para obtener más información.
Las instrucciones para descargar los archivos de clave de licencia se encuentran en la Guía del usuario de la consola de administración SAE para el Qubit Flex Fluorometer.
Modo SAE
El software de la consola de administración SAE permite la compatibilidad con la norma 21 CFR Parte 11 al activar el modo SAE en el instrumento Qubit Flex.
Consulte la Guía del usuario de la consola de administración SAE para el Qubit Flex Fluorometer para obtener más instrucciones sobre cómo activar el modo SAE en el instrumento Qubit Flex.
Servicio de asistencia
Los fluorímetros Qubit Flex ofrecen servicios de cualificación de la instalación (IQ) y cualificación operativa (OQ) realizados por nuestros ingenieros de servicio de campo (FSE) formados y certificados por el fabricante. Este servicio garantizará que el instrumento Qubit Flex esté instalado correctamente y que funcione de acuerdo con las especificaciones del fabricante.
Además de la IQ/ OQ del instrumento, se puede realizar un servicio adicional de IQ/ OQ para el software Qubit Flex SAE durante la misma visita. La IQ/OQ del SAE garantizará que el software SAE esté correctamente instalado y que se pueda conectar con el instrumento. Además, incluirá pruebas para verificar que el software SAE funcione de manera adecuada. La IQ/OQ del SAE solo se puede completar junto con la IQ/OQ del instrumento.
Preguntas frecuentes
A continuación se incluyen preguntas y respuestas frecuentes sobre los fluorímetros Qubit y la cuantificación fluorimétrica Qubit. Le invitamos a ponerse en contacto con el servicio de asistencia técnica si tiene preguntas adicionales o necesita más información.
Comparación con la absorbancia UV
Los instrumentos NanoDrop utilizan la absorbancia UV para medir las concentraciones de ADN y ARN. Las mediciones basadas en absorbancia tienen limitaciones a la hora de distinguir entre ADN, ARN y nucleótidos libres, que absorben a 260 nm.
Los ensayos Qubit se basan en fluorescencia. Están diseñados para cuantificar solo el analito diana. Además, la cuantificación de ácidos nucleicos basada en fluorescencia proporciona un intervalo dinámico más sensible que los instrumentos basados en la absorbancia.
Cuando se utilizan con ensayos Qubit, los fluorímetros Qubit pueden medir con precisión concentraciones bajas de muestras, mientras que los espectrofotómetros NanoDrop pueden detectar la presencia de contaminantes comunes.
Las lecturas de absorbancia UV miden todo lo que absorbe a 260 nm, como el ADN, el ARN, las proteínas, los nucleótidos libres y el exceso de sales. La cuantificación fluorimétrica Qubit mide solo la molécula en la que está interesado, por lo que el número es casi siempre inferior a la lectura A260.
Preguntas técnicas generales
El Qubit 4 Fluorometer tiene una pantalla táctil en color grande y sólida para que el desplazamiento por el flujo de trabajo sea impecable y para poder guardar los datos en una unidad USB a través de un cable USB conectado directamente a un ordenador o mediante una conexión Wi-Fi a la red en la nube Thermo Fisher Connect, de forma que la gestión de datos sea eficaz. Además, el instrumento se puede personalizar para mostrar solo los ensayos que se emplean con frecuencia, para añadir nuevos ensayos (como los ensayos definidos por el usuario que se crean con la herramienta de diseño de ensayos MyQubit) y para mostrar el idioma que desee, entre otros, el inglés, el francés, el español, el italiano y el alemán, el chino simplificado y japonés. Por último, el Qubit 4 Fluorometer dispone de un ensayo de sistema de validación especializado para comprobar el rendimiento del instrumento.
No, solo se puede calibrar en los espacios de tubos donde se analizarán las muestras. Es posible que necesite actualizar el firmware del Qubit Flex Fluorometer a la versión 1.5.0 o posterior para activar esta opción.
En cada ensayo, puede realizar una nueva calibración o utilizar los valores de la calibración anterior. Cuando utilice el instrumento por primera vez, lleve a cabo siempre una nueva calibración. A medida que se familiarice con los ensayos, el instrumento, la precisión del pipeteo y las fluctuaciones de temperatura significativas en el laboratorio, puede determinar el nivel de comodidad con el uso de los datos de calibración almacenados desde la última vez que se calibró el instrumento. Le recomendamos que ejecute una nueva curva de calibración cada vez que prepare una nueva solución de trabajo.
Los patrones diluidos se pueden emplear durante un máximo de tres horas si se utiliza la misma solución de trabajo para las muestras.
Para cumplir con los estándares legales de seguridad cibernética, el firmware más reciente de los fluorímetros Qubit 4 y Qubit Flex requiere que los usuarios inicien sesión para acceder a determinadas opciones de menú, como la Configuración de instrumentos, la Actualización de software y la Verificación del sistema. Cuando no haya iniciado sesión en un perfil de usuario, estas opciones de menú aparecerán inactivas.
Cuantificación de proteínas y ácidos nucleicos
Hemos visto una diferencia del 20 al 30 %. Para las diferentes formas de ADN plasmídico, recomendamos utilizar un patrón que represente con mayor similitud la composición del ADN plasmídico en la muestra.
El ensayo de proteínas Qubit es compatible con cantidades muy pequeñas de detergente. Consulte la Tabla 2, «Contaminantes tolerados por el ensayo de proteínas Qubit», en la página 6 del manual del producto Qubit Protein Assay Kit para ver las cantidades específicas. El Qubit Protein BR Assay es compatible con muestras que contienen hasta un 5 % de detergente.
Preguntas sobre el dispositivo
Los kits de ensayo de verificación de sistema Qubit 4 y Qubit Flex ofrecen un método rápido, fácil de usar y basado en reactivos para poner a prueba los componentes internos de un fluorímetro Qubit. Lleve a cabo la verificación del sistema cuando sospeche que puede haber un problema con el instrumento. No es necesario realizar la verificación de forma periódica.
Hay dos fuentes de iluminación LED en los fluorímetros Qubit 4 y Qubit Flex. Está previsto que duren 5 años.
Utilice un tubo de PCR de 0,5 mL transparente de pared fina en el instrumento Qubit 4. En el Qubit Flex Fluorometer, utilice las tiras de tubos Qubit Flex Assay, que se suministran como tubos de polipropileno de pared fina de 8 x 200 µL con fluorescencia muy baja.
Cómo crear ensayos personalizados MyQubit (Qubit 3.0 y 4)
La funcionalidad MyQubit permite crear nuevos ensayos para los fluorímetros Qubit 3.0 y 4 en minutos, con parámetros que se pueden cargar fácilmente en el instrumento mediante una unidad USB, sin cambiar los ensayos que ya existen. Los nuevos ensayos pueden ser versiones optimizadas de otros ensayos basados en fluorescencia que ya existen o pueden ser completamente nuevos.
Para crear ensayos MyQubit personalizados para el fluorímetro Qubit 2.0, vea Recursos para modelos Qubit anteriores.
Paso 1: Recogida de datos y definición de constantes de los ensayos MyQubit
Recopilación de datos. Prepare las muestras con los reactivos del ensayo y léalas en modo de fluorímetro en el instrumento Qubit. El modo de fluorímetro permite seleccionar manualmente la fuente de luz de excitación que elija, LED azul o LED rojo, mientras lee los valores de fluorescencia en bruto en los canales de emisión verde y rojo lejano. Los valores sirven para generar los datos necesarios para el desarrollo de un ensayo nuevo.
Definición de las constantes Le recomendamos que todos los usuarios nuevos en el desarrollo de ensayos MyQubit utilicen la hoja de cálculo de Excel Guía MyQubit EZ del ordenador para procesar los datos del modo de fluorímetro y para generar los parámetros de sus ensayos. La guía permite introducir lecturas del modo de fluorímetro recogidas a partir de muestras de concentraciones conocidas y, a continuación, calcula las constantes que se pueden utilizar para definir la forma de la curva estándar que se utilizará para calibrar el nuevo ensayo.
Solo hay que introducir los valores de fluorescencia que se han obtenido en el modo de fluorímetro en el fluorímetro Qubit junto con las concentraciones correspondientes del analito. Una vez que los datos replicados se han introducido en la hoja de cálculo, ajuste los parámetros N y K para optimizar el algoritmo de ajuste de la curva. El objetivo es ajustar N y K para lograr la puntuación de calidad más baja posible, tal y como se muestra en el ejemplo.
Paso 2: Defina su ensayo con la MyQubit Assay Design Tool
Puede utilizar MyQubit Assay Design Tool para crear el archivo .qbt MyQubit que define su nuevo ensayo. A continuación, puede cargar el archivo .qbt para que se ejecute en el fluorímetro Qubit 3.0 o 4.
En la herramienta de diseño de ensayos MyQubit, introduzca los valores de los parámetros para el ensayo personalizado según se calcula en la hoja de cálculo de la guía de MyQubit EZ. Los campos pueden aparecer o desaparecer a medida que se seleccionan los valores. Desplace el cursor sobre los iconos de ayuda para obtener orientación sobre cómo rellenar los campos de la herramienta.
Paso 3: Cargue su ensayo en su fluorímetro Qubit 3.0 o 4
Para cargar el nuevo archivo .qbt de ensayo, puede importarlo a su instrumento desde una unidad USB o directamente desde un ordenador externo a través de un cable USB. El fluorímetro Qubit le guiará a través del proceso de carga de los nuevos ensayos. Los nuevos ensayos se pueden cargar de forma permanente sin afectar a los ensayos que ya existen.
Importe ensayos desde una unidad USB
1. Transfiera los archivos de ensayo MyQubit (.qbt) que desea instalar al directorio raíz (de nivel superior) de una unidad USB.
No descargue los archivos .qbt en una carpeta de la unidad USB.
2. Introduzca la unidad USB que contiene los nuevos archivos de ensayo en el puerto USB del fluorímetro Qubit.
3. Vaya a la pantalla Configuración y toque Importar nuevo ensayo. El instrumento busca en la unidad USB archivos de ensayo y muestra sus nombres en la pantalla Importar nuevo ensayo.
4. Toque para seleccionar los ensayos que desea importar. Vuelva a tocar un ensayo para anular la selección. Puede seleccionar uno o varios ensayos para importarlos.
5. Toque Siguiente. La pantalla Importar nuevo ensayo muestra el nombre del primer ensayo que se está importando y enumera las carpetas de destino en las que se pueden guardar. Cada carpeta puede contener hasta nueve ensayos.
6. Seleccione la carpeta de destino del nuevo ensayo y pulse Guardar. Verá su elección en la pantalla Verificación (paso 8).
También puede tocar Nueva carpeta para crear una nueva carpeta de destino (paso 7).
7. En la pantalla Nueva carpeta, toque el campo de texto Nueva carpeta. En el teclado que aparece, escriba un nombre de carpeta con un máximo de 11 caracteres. El nombre puede incluir espacios excepto al principio o al final
Toque la tecla Enter y, a continuación, toque Hecho para volver a la pantalla Importar nuevo ensayo. La nueva carpeta aparecerá en la lista de carpetas.
Seleccione la nueva carpeta de destino y toque Guardar. Verá su elección en la pantalla Verificación.
8. En la pantalla Verificación, toque Hecho para finalizar la importación. Si solo se importa un ensayo, volverá a la pantalla de inicio.
Si va a importar varios ensayos, volverá a la pantalla Importar nuevo ensayo, donde podrá seleccionar la carpeta de destino para el siguiente ensayo que se va a importar.
Importación de ensayos desde un equipo
Puede transferir archivos de ensayo MyQubit (.qbt) directamente desde el ordenador al fluorímetro Qubit 3.0 o 4 mediante un cable USB.
Nota: El cable USB debe permanecer conectado al fluorímetro Qubit y al ordenador durante este procedimiento.
- Si es necesario, descargue el archivo de ensayo MyQubit (.qbt) en el equipo.
- Conecte el fluorímetro Qubit al ordenador mediante un cable USB. El ordenador debe reconocer el fluorímetro como un dispositivo externo.
- Copie y pegue (o haga clic y arrastre) los archivos .qbt que desea importar a la ventana del instrumento Qubit del ordenador.
- Nota: Los ensayos no serán visibles en el fluorímetro Qubit hasta que realice el siguiente paso.
- Vaya a la pantalla Configuración del fluorímetro Qubit y toque Importar nuevo ensayo. En la pantalla Importar nuevos ensayos, verá los nombres de los ensayos que se encuentran en el equipo.
- Siga los pasos del 4 al 8 del procedimiento de importación que se describe en la sección Importar ensayos desde un dispositivo USB anterior.
Paso 4: Analice su ensayo
Una vez que lo haya cargado, su nuevo ensayo MyQubit estará listo para utilizarlo. Consulte el manual del producto Qubit 4 para obtener una descripción detallada de la función del instrumento y del flujo de trabajo del ensayo.
Conexión a un ordenador Windows™ (Qubit 3.0 o 4)
La conexión de un fluorímetro Qubit 3.0 o 4 a un ordenador que ejecuta el sistema operativo Windows™ requiere la instalación de un controlador. Descargue tanto el controlador como las instrucciones de instalación a continuación.
Citas
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- Mardis E, McCombie WR. Library quantification: fluorometric quantitation of double-stranded or single-stranded DNA samples using the qubit system. Cold Spring Harb Protoc. 2017; 2017: pdb-prot094730. PubMed
Recursos educativos
Los recursos formativos para la cuantificación fluorimétrica Qubit contienen materiales en línea sobre análisis y cuantificación de ácidos nucleicos y proteínas.
Recursos para modelos Qubit anteriores
Encuentre manuales, folletos, notas de aplicación, descargas, demostraciones, vídeos y otros recursos que le ayudarán a sacar el máximo partido de su fluorímetro Qubit.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.