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Services d’engineering des lignées cellulaires
Partenaires d’une collaboration visant à accélérer vos recherches
La création de lignées cellulaires stables est un travail complexe et chronophage. Les développeurs de confiance et expérimentés des systèmes Invitrogen™ GeneArt™ TAL et des produits GeneArt™ CRISPR peuvent concevoir des lignées cellulaires stables sur mesure grâce à une des technologies les plus robustes et fiables du marché. En utilisant des produits de qualité tout au long du processus, nos scientifiques travailleront avec vous pour concevoir votre lignée cellulaire stable et effectuer des tests de contrôle qualité afin de s’assurer que la lignée cellulaire répond à vos exigences.
Création sur mesure d’une lignée de cellules de mammifères
Nous avons l’habitude de travailler avec une grande variété de bruits de fond cellulaire, allant des lignées cellulaires faciles à transfecter (HEK 293, 293FT, HCT116 ou HeLa par exemple) aux lignées cellulaires difficiles à transfecter (par exemple les fibroblastes, les cellules dérivées de neuroblastome, les cellules de carcinome hépatocellulaire, les cellules dérivées de la moelle osseuse et les cellules dérivées de l’endothélium). Chaque projet de modification de lignée cellulaire est personnalisé pour répondre aux besoins uniques du client, en se basant sur la modification souhaitée et le bruit de fond cellulaire ; nous proposons donc nos conseils pour évaluer la faisabilité technique de la modification de votre lignée cellulaire choisie. Nous prenons le temps de comprendre vos objectifs.
Notre gamme complète de solutions est notre force, que nous mettons à votre disposition pour un maximum d’efficacité. Nous apportons de réelles améliorations aux conditions de la culture cellulaire et à la méthode de transfection et nous validons la modification en fonction de vos spécifications pour être certains que la lignée cellulaire modifiée que vous recevrez vous apportera entière satisfaction. Nos services ont été développés en vous plaçant au cœur de nos priorités. Un chef de projet dédié travaillera avec vous pour vous aider à atteindre vos objectifs de recherche et à respecter vos délais : nous vous aidons à réussir.
Les services que nous offrons
Nous offrons un ensemble complet d’outils de modification pour obtenir quasiment tous les types de lignées cellulaires, sous forme de groupe stable ou de lignée cellulaire stable. Les effecteurs GeneArt TAL et CRISPR sont des outils efficaces pour créer des modifications précises du génome dans les cellules de mammifères. Notre équipe d’ingénierie cellulaire expérimentée vous aidera à déterminer la technologie la mieux adaptée à votre projet. Le tableau ci-dessous comporte une liste de services disponibles.
Discutez avec notre équipe et bénéficiez d’une consultation gratuite concernant la conception de la lignée cellulaire la mieux adaptée à vos travaux de recherche.
| Option de modification | Description | Lignées cellulaires |
|---|---|---|
| Activation | Ajoutez des marqueurs (par ex. : luciférase, GFP) au gène d’intérêt ; introduisez ou corrigez des mutations de points ; activez (Knock-In) un site refuge, modifiez des polymorphismes mononucléotidiques (SNP) | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Désactivation | Désactivez un gène endogène ou effectuez des délétions | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Activation de gènes | Activez / régulez à la hausse l’expression de gènes endogènes | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Répression de gènes | Réprimez / régulez à la baisse l’expression de gènes endogènes | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Expression du gène exogène | Introduire un gène exogène par intégration aléatoire | Vecteur d’expression de cellules de mammifères |
| Expression du gène exogène | Introduire un gène exogène par intégration aléatoire | pLENTI6.3V5-DEST (BSD) pLENTI7.3V5-DEST (emGFP) |
| Expression du gène exogène | Introduction du gène exogène avec la technologie Flp-In | Inductible : Lignée cellulaire Flp-In T-REx 293 Constitutive :
|
| Expression du gène exogène | Introduction du gène exogène avec la technologie Jump-In | Inductible :
Constitutive :
|
REMARQUE : Nous pouvons également générer des plateformes dans la lignée cellulaire de votre choix. Le forfait de services ci-dessus comprend :
- Service d’optimisation de transfection et de transfert de protocole
- Production sur mesure TALEN ou CRISPR
- Validation de l’efficacité TALEN ou CRISPR sur mesure
- Analyse de contrôle de la qualité d’une lignée cellulaire stable
Des forfaits personnalisés sont disponibles sur demande.
Processus de conception et d’engineering de la lignée cellulaire
La vitesse à laquelle nous pouvons générer un groupe stable ou une lignée cellulaire stable sur mesure dépend de la lignée cellulaire, des caractéristiques de croissance, ainsi que des exigences relatives à la mise en culture. Des services d’engineering des lignées cellulaires stables peuvent être achevés en moins de 10 semaines.
| Services de validation des outils | Services de validation des groupes | Services de validation clonale |
|---|---|---|
| Valider l’efficacité TALEN / CRISPR avec le dosage GCD (détection du clivage génomique) | Valider l’efficacité TALEN / CRISPR avec l’analyse NGS (séquençage de nouvelle génération) ciblée | Valider la modification avec l’analyse NGS ciblée |
| Valider l’efficacité TALEN / CRISPR avec le dosage NGS ciblé | Vérifier l’absence d’effets hors cible par NGS avec la technologie Ion AmpliSeq™ (CRISPR uniquement) | Vérifier l’absence d’effets hors cible par NGS avec la technologie Ion AmpliSeq (CRISPR uniquement) |
| Vérifier l’absence d’effets hors cible par NGS avec la technologie Ion AmpliSeq (CRISPR uniquement) | Vérifier les effets hors cible par GUIDE-Seq | |
| Répression de gènes | Séquençage Sanger ciblé de produits PCR | Séquençage Sanger ciblé de produits PCR |
| Services de validation des activateurs et répresseurs TALEN | Analyse PCR d’insertion et/ou d’excision | Analyse PCR d’insertion et/ou d’excision |
| Analyse de l’expression génétique avec des dosages Applied Biosystems™ TaqMan® | Analyse de l’expression génétique à l’aide des dosages TaqMan | Analyse de l’expression génétique à l’aide des dosages TaqMan |
| Analyser l’expression des protéines avec la technologie de transfert Western | Analyser l’expression des protéines avec la technologie de transfert Western | |
| Analyse de cytométrie en flux | Analyse de cytométrie en flux | |
| Analyse fonctionnelle (disponible sur demande ; notre gamme de services prend en charge un large éventail de stratégies de détection et de sondes) | Analyse fonctionnelle (disponible sur demande ; notre gamme de services prend en charge un large éventail de stratégies de détection et de sondes) |
- Service d’optimisation de transfection pour garantir la livraison appropriée des outils de modification du génome utilisés pour générer des lignées cellulaires stables
- Validation des courbes de bactéricidie des antibiotiques pour déterminer la concentration idéale d’antibiotiques nécessaire pour générer la lignée cellulaire stable (pour des projets d’activation [Knock-In])
Analyse des effets sur cible et hors cible
Accélère la réalisation de votre projet personnalisé et augmente la qualité de votre engineering de lignées cellulaires grâce à une méthode de contrôle qualité plus rigoureuse. Si le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) de cellules simples n’est pas effectué, le séquençage de nouvelle génération (NGS) peut supprimer les ambiguïtés de clonalité issues d’un clonage par dilution limite en testant la lignée cellulaire étendue qui a été modifiée.
Optimisation de la transfection
La gamme Invitrogen™ de réactifs d’ADN et de consommables repose sur l’expertise en biologie cellulaire et moléculaire. Elle représente le système de transfection et de sélection le plus cité et le plus fiable sur le marché. Nous testons plusieurs méthodes de transfection avant de déterminer la meilleure solution adaptée à votre lignée cellulaire. Dans le cadre de nos services d’engineering cellulaire, nous vous apportons notre expertise sur la méthode et les conditions optimales de transfection.
Création sur mesure d’une lignée de cellules de mammifères
Nous avons l’habitude de travailler avec une grande variété de bruits de fond cellulaire, allant des lignées cellulaires faciles à transfecter (HEK 293, 293FT, HCT116 ou HeLa par exemple) aux lignées cellulaires difficiles à transfecter (par exemple les fibroblastes, les cellules dérivées de neuroblastome, les cellules de carcinome hépatocellulaire, les cellules dérivées de la moelle osseuse et les cellules dérivées de l’endothélium). Chaque projet de modification de lignée cellulaire est personnalisé pour répondre aux besoins uniques du client, en se basant sur la modification souhaitée et le bruit de fond cellulaire ; nous proposons donc nos conseils pour évaluer la faisabilité technique de la modification de votre lignée cellulaire choisie. Nous prenons le temps de comprendre vos objectifs.
Notre gamme complète de solutions est notre force, que nous mettons à votre disposition pour un maximum d’efficacité. Nous apportons de réelles améliorations aux conditions de la culture cellulaire et à la méthode de transfection et nous validons la modification en fonction de vos spécifications pour être certains que la lignée cellulaire modifiée que vous recevrez vous apportera entière satisfaction. Nos services ont été développés en vous plaçant au cœur de nos priorités. Un chef de projet dédié travaillera avec vous pour vous aider à atteindre vos objectifs de recherche et à respecter vos délais : nous vous aidons à réussir.
Les services que nous offrons
Nous offrons un ensemble complet d’outils de modification pour obtenir quasiment tous les types de lignées cellulaires, sous forme de groupe stable ou de lignée cellulaire stable. Les effecteurs GeneArt TAL et CRISPR sont des outils efficaces pour créer des modifications précises du génome dans les cellules de mammifères. Notre équipe d’ingénierie cellulaire expérimentée vous aidera à déterminer la technologie la mieux adaptée à votre projet. Le tableau ci-dessous comporte une liste de services disponibles.
Discutez avec notre équipe et bénéficiez d’une consultation gratuite concernant la conception de la lignée cellulaire la mieux adaptée à vos travaux de recherche.
| Option de modification | Description | Lignées cellulaires |
|---|---|---|
| Activation | Ajoutez des marqueurs (par ex. : luciférase, GFP) au gène d’intérêt ; introduisez ou corrigez des mutations de points ; activez (Knock-In) un site refuge, modifiez des polymorphismes mononucléotidiques (SNP) | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Désactivation | Désactivez un gène endogène ou effectuez des délétions | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Activation de gènes | Activez / régulez à la hausse l’expression de gènes endogènes | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Répression de gènes | Réprimez / régulez à la baisse l’expression de gènes endogènes | Pratiquement toutes les lignées de cellules de mammifères (pas de cellules primaires / pas de iPSC) |
| Expression du gène exogène | Introduire un gène exogène par intégration aléatoire | Vecteur d’expression de cellules de mammifères |
| Expression du gène exogène | Introduire un gène exogène par intégration aléatoire | pLENTI6.3V5-DEST (BSD) pLENTI7.3V5-DEST (emGFP) |
| Expression du gène exogène | Introduction du gène exogène avec la technologie Flp-In | Inductible : Lignée cellulaire Flp-In T-REx 293 Constitutive :
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| Expression du gène exogène | Introduction du gène exogène avec la technologie Jump-In | Inductible :
Constitutive :
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REMARQUE : Nous pouvons également générer des plateformes dans la lignée cellulaire de votre choix. Le forfait de services ci-dessus comprend :
- Service d’optimisation de transfection et de transfert de protocole
- Production sur mesure TALEN ou CRISPR
- Validation de l’efficacité TALEN ou CRISPR sur mesure
- Analyse de contrôle de la qualité d’une lignée cellulaire stable
Des forfaits personnalisés sont disponibles sur demande.
Processus de conception et d’engineering de la lignée cellulaire
La vitesse à laquelle nous pouvons générer un groupe stable ou une lignée cellulaire stable sur mesure dépend de la lignée cellulaire, des caractéristiques de croissance, ainsi que des exigences relatives à la mise en culture. Des services d’engineering des lignées cellulaires stables peuvent être achevés en moins de 10 semaines.
| Services de validation des outils | Services de validation des groupes | Services de validation clonale |
|---|---|---|
| Valider l’efficacité TALEN / CRISPR avec le dosage GCD (détection du clivage génomique) | Valider l’efficacité TALEN / CRISPR avec l’analyse NGS (séquençage de nouvelle génération) ciblée | Valider la modification avec l’analyse NGS ciblée |
| Valider l’efficacité TALEN / CRISPR avec le dosage NGS ciblé | Vérifier l’absence d’effets hors cible par NGS avec la technologie Ion AmpliSeq™ (CRISPR uniquement) | Vérifier l’absence d’effets hors cible par NGS avec la technologie Ion AmpliSeq (CRISPR uniquement) |
| Vérifier l’absence d’effets hors cible par NGS avec la technologie Ion AmpliSeq (CRISPR uniquement) | Vérifier les effets hors cible par GUIDE-Seq | |
| Répression de gènes | Séquençage Sanger ciblé de produits PCR | Séquençage Sanger ciblé de produits PCR |
| Services de validation des activateurs et répresseurs TALEN | Analyse PCR d’insertion et/ou d’excision | Analyse PCR d’insertion et/ou d’excision |
| Analyse de l’expression génétique avec des dosages Applied Biosystems™ TaqMan® | Analyse de l’expression génétique à l’aide des dosages TaqMan | Analyse de l’expression génétique à l’aide des dosages TaqMan |
| Analyser l’expression des protéines avec la technologie de transfert Western | Analyser l’expression des protéines avec la technologie de transfert Western | |
| Analyse de cytométrie en flux | Analyse de cytométrie en flux | |
| Analyse fonctionnelle (disponible sur demande ; notre gamme de services prend en charge un large éventail de stratégies de détection et de sondes) | Analyse fonctionnelle (disponible sur demande ; notre gamme de services prend en charge un large éventail de stratégies de détection et de sondes) |
- Service d’optimisation de transfection pour garantir la livraison appropriée des outils de modification du génome utilisés pour générer des lignées cellulaires stables
- Validation des courbes de bactéricidie des antibiotiques pour déterminer la concentration idéale d’antibiotiques nécessaire pour générer la lignée cellulaire stable (pour des projets d’activation [Knock-In])
Analyse des effets sur cible et hors cible
Accélère la réalisation de votre projet personnalisé et augmente la qualité de votre engineering de lignées cellulaires grâce à une méthode de contrôle qualité plus rigoureuse. Si le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) de cellules simples n’est pas effectué, le séquençage de nouvelle génération (NGS) peut supprimer les ambiguïtés de clonalité issues d’un clonage par dilution limite en testant la lignée cellulaire étendue qui a été modifiée.
Optimisation de la transfection
La gamme Invitrogen™ de réactifs d’ADN et de consommables repose sur l’expertise en biologie cellulaire et moléculaire. Elle représente le système de transfection et de sélection le plus cité et le plus fiable sur le marché. Nous testons plusieurs méthodes de transfection avant de déterminer la meilleure solution adaptée à votre lignée cellulaire. Dans le cadre de nos services d’engineering cellulaire, nous vous apportons notre expertise sur la méthode et les conditions optimales de transfection.
Travaillons ensemble pour lancer votre projet d’engineering génomique
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