Countess Automated Cell Counter 3 FL

Además de contar células, las capacidades de fluorescencia del instrumento Countess 3 FL se utilizan a menudo para evaluar la viabilidad celular, la apoptosis, la eficacia de transfección y la expresión de las proteínas fluorescentes. Sin embargo, las aplicaciones se extienden a cualquier parámetro celular que sea autofluorescente o que pueda etiquetarse con tintes fluorescentes. Encontrará datos que ilustran el control de calidad del cultivo celular, la detección de células CAR-T, la eficacia de edición CRISPR-Cas9 y otras aplicaciones de fluorescencia en Datos de muestras.

Viabilidad celular. La evaluación de la viabilidad celular es un paso clave en el cultivo celular cotidiano y es necesaria para un procesamiento posterior preciso y eficaz. Las opciones de fluorescencia de Countess 3 FL ofrecen un control de viabilidad sensible y específico que se puede realizar rápida y fácilmente antes del análisis de muestras posterior.

Aunque el azul de tripano se utiliza ampliamente para la evaluación de viabilidad en el recuento de células de campo brillante, puede alterar la morfología celular en ciertos casos. Por ejemplo, cuando se tiñen con azul de tripano las CMSP de ratón muertas, estas pueden expandirse y hundirse en un plano focal diferente al de las células vivas, lo que complica la detección y el recuento exactos. Como alternativa de fluorescencia, la tinción de viabilidad verde/roja Invitrogen ReadyCount  contiene naranja acridina y yoduro de propidio (AO/PI) en una combinación optimizada. La tinción fluorescente proporciona una gran sensibilidad y una mayor especificidad del estado vivo/muerto en una población de células mixtas sin alterar la morfología de la célula.

Con las capacidades de fluorescencia del Countess Automated Cell Counter 3 FL, puede visualizar fácilmente proteínas fluorescentes y realizar ensayos de apoptosis o proliferación en la sala de cultivo celular. 

El instrumento Countess 3 FL dispone de dos canales de fluorescencia opcionales, que detectarán los colores fluorescentes determinados por la inserción de cada uno de los cubos de luz. Con 14 cubos de luz intercambiables de los que elegir, el instrumento Countess 3 FL no está limitado a la detección de células que expresan GFP y RFP. 

Los cubos de luz LED Invitrogen EVOSque alimentan estas aplicaciones de fluorescencia en el Countess 3 FL proporcionan más de 50 000 horas de iluminación brillante (pero ajustable) que permanece constante con una degradación mínima a lo largo del tiempo. Los cubos de luz LED EVOS son económicos,respetuosos con el medio ambiente y optimizados espectralmente, se han diseñado para ofrecer un control preciso, un mantenimiento mínimo y una fiabilidad excepcional.

Cada cubo contiene un LED, óptica de iluminación y filtros. Los cubos de luz los puede intercambiar el usuario y los detecta automáticamente el sistema Countess 3 FL para facilitar la conexión plug-and-play.

Consejo: Los cubos de luz no se incluyencon el contador de células Countess 3 FL para permitir la personalización basada en los tintes y proteínas fluorescentes utilizadas. 

Elija cubos de luz con espectros que coincidan con los tintes y la aplicación de recuento que desee utilizar. Los cubos de luz son sencillos de intercambiar y se pueden comprar en cualquier momento para cumplir con los nuevos requisitos de aplicación. Son compatibles con una amplia gama de tintes.

Aunque muchos investigadores eligen GFP y RFP para la detección de proteínas fluorescentes, hay 14 opciones diferentes de cubos de luz LED EVOS. DAPI es un tinte nuclear usado tradicionalmente. En la tabla se muestran los tintes más comunes que detectan los siete cubos de luz más reconocidos.

Suponga que está interesado en medir tanto la apoptosis como la viabilidad de las células de una población. Puede utilizar un indicador de apoptosis que mida la activación de la caspasa, como el reactivo de detección CellEvent Caspase-3/7 Green con el cubo de luz EVOS GFP 2.0. Además, utilice un tinte de viabilidad como la solución de células muertas SYTOX Red con el EVOS Cy5 2.0 light cube para medir las células muertas que han progresado más allá de la apoptosis. Esta combinación de tinción, junto con los dos cubos de luz EVOS, ofrece un método múltiplex rápido y sencillo para obtener datos sobre apoptosis y viabilidad.

La tinción de fluorescencia puede proporcionar datos abundantes sobre células, especialmente en muestras heterogéneas, pero las tinciones comerciales pueden ser difíciles de mezclar, titular y aplicar para un rendimiento óptimo. Los reactivos Invitrogen ReadyCount son tinciones fluorescentes estables de sobremesa, que están preoptimizadas para su uso con el Countess Automated Cell Counter 3 FL. 

Los reactivos ReadyCount permiten la tinción específica de células nucleadas dentro de una población mixta, reduciendo así la complejidad y mejorando la repetibilidad de recuento a recuento y de muestra a muestra cuando se combinan con el cubo de luz EVOS apropiado. Solo tiene que mezclar 10 µL de muestra celular con 10 µL de tinción, pipetear la solución en una cámara Countess o un portaobjetos reutilizable e insertar el portaobjetos en el instrumento.