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Invitrogen™
SuperScript™ III Erststrang-Synthese SuperMix für qRT-PCR
Die hohe Temperaturbeständigkeit von SuperScript III Reverse-Transkriptase in einem optimierten SuperMix-Format für die Synthese von Erststrang-cDNA zur Verwendung in der quantitativen Real-Time RT-PCR (qRT-PCR)
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| Katalognummer | Anzahl Reaktionen |
|---|---|
| 11752250 | 250 Reaktionen |
| 11752050 | 50 Reaktionen |
Katalognummer 11752250
Preis (EUR)
3.894,65
Exklusiv online
4.100,00Ersparnis 205,35 (5%)
Each
Anzahl Reaktionen:
250 Reaktionen
Preis (EUR)
3.894,65
Exklusiv online
4.100,00Ersparnis 205,35 (5%)
Each
SuperScript™ III First-Strand Synthesis SuperMix für qRT-PCR bietet die hohe Temperaturbeständigkeit der SuperScript™ III Reverse Transkriptase in einem optimierten SuperMix-Format für die Synthese der Erststrang-cDNA zur Verwendung in quantitativen Real-Time PCR (qRT-PCR). Der einfache, zeitsparende Reaktionsaufbau verwendet lediglich zwei Röhrchen: ein 2X Reaktionsgemisch und ein Enzymgemisch.
Das Enzymgemisch
Die im RT-Enzymgemisch enthaltene SuperScript™ III Reverse Transkriptase ist eine Version der M-MLV-RT, die zur Reduzierung der RNase H-Aktivität entwickelt wurde und eine höhere thermische Stabilität bietet. Das Enzym kann zur Synthese von cDNA bei Temperaturen von 42 – 60 °C verwendet werden und bietet eine bessere Spezifität, höhere cDNA-Ausbeute und mehr Produkt in voller Länge als andere reverse Transkriptasen. Da SuperScript™ III RT nicht signifikant von ribosomaler und Transfer-RNA gehemmt wird, kann sie für die Synthese von cDNA aus Gesamt-RNA verwendet werden. Der ebenfalls im Enzymgemisch enthaltene RNaseOUT™ Rekombinante Ribonuklease-Inhibitor ist ein RNase-Inhibitorprotein, das gegen den Abbau von Ziel-RNA aufgrund von Ribonuklease-Kontaminierung der RNA-Vorbereitung schützt.
Reaktionsgemisch
Das 2X RT-Reaktionsgemisch enthält Oligo(dT)20, Random-Hexamers, MgCl2 und dNTPs in einer Pufferformulierung, die für qRT-PCR optimiert wurde. E. coli RNase H wird als ein separates Röhrchen im Kit geliefert, um das RNA-Template aus dem cDNA:RNA-Hybridmolekül nach der Erststrang-Synthese zu entfernen. Dies führt nachweislich zur Erhöhung der Empfindlichkeit in qRT-PCR.
Verwendung von SuperScript™ III SuperMix für die Erststrang-Synthese
Diese SuperMix-Formulierung kann verwendet werden, um weniger als 10 Kopien eines Ziel-Gens in qRT-PCR mit einem breiten dynamischen Bereich, der eine genaue Quantifizierung von einer hohen Kopienzahl von mRNA von bis zu 1 µg der Gesamt-RNA unterstützt, zu quantifizieren. Reagenzien werden für 50 oder 250 RT-Reaktionen von je 20 µl angeboten.
Das Enzymgemisch
Die im RT-Enzymgemisch enthaltene SuperScript™ III Reverse Transkriptase ist eine Version der M-MLV-RT, die zur Reduzierung der RNase H-Aktivität entwickelt wurde und eine höhere thermische Stabilität bietet. Das Enzym kann zur Synthese von cDNA bei Temperaturen von 42 – 60 °C verwendet werden und bietet eine bessere Spezifität, höhere cDNA-Ausbeute und mehr Produkt in voller Länge als andere reverse Transkriptasen. Da SuperScript™ III RT nicht signifikant von ribosomaler und Transfer-RNA gehemmt wird, kann sie für die Synthese von cDNA aus Gesamt-RNA verwendet werden. Der ebenfalls im Enzymgemisch enthaltene RNaseOUT™ Rekombinante Ribonuklease-Inhibitor ist ein RNase-Inhibitorprotein, das gegen den Abbau von Ziel-RNA aufgrund von Ribonuklease-Kontaminierung der RNA-Vorbereitung schützt.
Reaktionsgemisch
Das 2X RT-Reaktionsgemisch enthält Oligo(dT)20, Random-Hexamers, MgCl2 und dNTPs in einer Pufferformulierung, die für qRT-PCR optimiert wurde. E. coli RNase H wird als ein separates Röhrchen im Kit geliefert, um das RNA-Template aus dem cDNA:RNA-Hybridmolekül nach der Erststrang-Synthese zu entfernen. Dies führt nachweislich zur Erhöhung der Empfindlichkeit in qRT-PCR.
Verwendung von SuperScript™ III SuperMix für die Erststrang-Synthese
Diese SuperMix-Formulierung kann verwendet werden, um weniger als 10 Kopien eines Ziel-Gens in qRT-PCR mit einem breiten dynamischen Bereich, der eine genaue Quantifizierung von einer hohen Kopienzahl von mRNA von bis zu 1 µg der Gesamt-RNA unterstützt, zu quantifizieren. Reagenzien werden für 50 oder 250 RT-Reaktionen von je 20 µl angeboten.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
EndprodukttypcDNA (Erststrang)
FormatMaster-Mix
Anzahl Reaktionen250 Reaktionen
Optimale Reaktionstemperatur50 °C
Menge250 Reaktionen
ReaktionsformatMaster Mix
ReagenztypReverse Transkription
Reverse TranskriptaseSuperScript III
VersandbedingungTrockeneis
AusgangsmaterialRNA
VerfahrenReverse Transkription
NachweisverfahrenPrimer-Sonde
Zur Verwendung mit (Anwendung)Real-Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR PerformanceHoch
Reaktionsgeschwindigkeit30 min
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 2X RT-Reaktionsgemisch (2x 1,25 ml)
• RT-Enzymgemisch (500 μl)
• E. coli RNase (250 μl)
Ausreichend Reagenzien für 250 Reaktionen mit 20 μl Reaktionsvolumen.
Lagerung bei –20 °C.
Häufig gestellte Fragen (FAQ)
How can I remove genomic DNA contamination from my sample prior to performing RT-PCR?
How much RNA should be employed for first-strand cDNA synthesis?
Should I treat the cDNA with RNase H prior to downstream processing?
What percentage of RNA is converted to cDNA when performing reverse transcription?
I'm setting up my RT reaction and am trying to decide whether I should use random primers, oligo(dT) primer, gene-specific primer, or oligo(dT)/random mix primers. What would you suggest?
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Zitierungen und Referenzen
Abstract
Simvastatin downregulates the expression of hepcidin and erythropoietin in HepG2 cells.
Journal:Hemodial Int
PubMed ID:22716163
'Statin therapy may improve responsiveness to erythropoietin-stimulating agents in patients with end-stage renal disease. Although statins increase hepatic iron uptake and storage capacity in cholestatic rats, the underlying mechanisms are unclear. Therefore, we examined the effects of a statin (simvastatin) on the expression of hepcidin, erythropoietin receptor (EPOR) and erythropoietin
TDAG51 is an ERK signaling target that opposes ERK-mediated HME16C mammary epithelial cell transformation.
Journal:BMC Cancer
PubMed ID:18597688
'INTRODUCTION: Signaling downstream of Ras is mediated by three major pathways, Raf/ERK, phosphatidylinositol 3 kinase (PI3K), and Ral guanine nucleotide exchange factor (RalGEF). Ras signal transduction pathways play an important role in breast cancer progression, as evidenced by the frequent over-expression of the Ras-activating epidermal growth factor receptors EGFR and
Reprogramming of mouse fibroblasts into cardiomyocyte-like cells in vitro.
Journal:
PubMed ID:23722259
Cardiac fibroblasts can be reprogrammed to cardiomyocyte-like cells by the introduction of three transcription factors: Gata4, Mef2c and Tbx5 (collectively referred to here as GMT). Resident cardiac fibroblasts can be converted in vivo into induced cardiomyocyte-like cells (iCMs) that closely resemble endogenous cardiomyocytes and electrically integrate with the host myocardium.