Platinum™ SuperFi Green PCR Mastermix
Platinum™ SuperFi Green PCR Mastermix
Invitrogen™

Platinum™ SuperFi Green PCR Mastermix

Invitrogen Platinum SuperFi II Green PCR-Mastermix (2x) enthält ein gebrauchsfertiges Gemisch aus Platinum SuperFi II DNA-Polymerase, Platinum SuperFi II BufferWeitere Informationen
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KatalognummerFarbeAnzahl Reaktionen
12369250Green5 x 500 Reaktionen
12369010Green100 Reaktionen
12369050Green500 Reaktionen
12368010Colorless100 Reaktionen
12368050Colorless500 Reaktionen
12368250Colorless5 x 500 Reaktionen
Katalognummer 12369250
Preis (EUR)
6.640,65
Exklusiv online
7.140,00
Ersparnis 499,35 (7%)
Each
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Farbe:
Green
Anzahl Reaktionen:
5 x 500 Reaktionen
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Preis (EUR)
6.640,65
Exklusiv online
7.140,00
Ersparnis 499,35 (7%)
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Invitrogen Platinum SuperFi II Green PCR-Mastermix (2x) enthält ein gebrauchsfertiges Gemisch aus Platinum SuperFi II DNA-Polymerase, Platinum SuperFi II Buffer und dNTPs für eine bequeme PCR-Vorbereitung sowie zwei Tracking-Farbstoffe für das direkte Laden von PCR-Produkten auf Gele. Platinum SuperFi II DNA-Polymerase ist eine Proofreading-DNA-Polymerase, die überlegene Genauigkeit mit dem innovativen SuperFi II Puffer kombiniert, um durch ein universelles Primer-Annealing für optimale Erfolgsraten in der PCR zu sorgen. Ideal für Klonierung, Mutagenese und andere Anwendungen, die von höchster Sequenzgenauigkeit profitieren.

Zu den Merkmalen des Platinum SuperFi II Green PCR Master Mix gehören:
• Außergewöhnliche >300X Taq-Genauigkeit
• Universelles Primer-Glühen bei 60 °C
• Hervorragende Spezifität, Empfindlichkeit und Ausbeute
• Robuste Amplifikation von schwer zu amplifizierenden Zielen (z. B. solche mit suboptimaler Reinheit oder mit einem GC-Gehalt von ˃ 65 %, Bedarf an langer PCR)

Platinum SuperFi DNA-Polymerase ist ein speziell entwickeltes Enzym mit hoher Prozessivität und erhöhter Resistenz gegen PCR-Inhibitoren. Sie ermöglicht auch schnelle Protokolle und Amplifikation langer Zielsegmente (bis zu 20 kb). Die Platinum Heißstart-Technologie basiert auf firmeneigenen Antikörpern, die die Enzymaktivität bis zum ersten PCR-Denaturierungsschritt hemmen und unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau verhindern. Diese Technologie ermöglicht zudem ein Ansetzen der Reaktion bei Raumtemperatur und sorgt für eine höhere Empfindlichkeit und Ausbeute.

Aufgrund der einzigartigen Zusammensetzung des SuperFi II PCR-Puffers beträgt die Annealing-Temperatur für die meisten Primerpaare, die gemäß den allgemeinen Konstruktionsregeln hergestellt wurden, 60 °C. Isostabilisierende Moleküle im Puffer erhöhen die Duplexstabilität des Primer-Templates während des Glühschritts und tragen zu einer verbesserten Spezifität bei, ohne dass die Glühtemperatur für jedes Primer-Paar optimiert werden muss. Mit der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase können verschiedene PCR-Assays unter Verwendung desselben Protokolls mit universeller Primer-Annealing-Temperatur und dem Extensions-Schritt, der für das längste zu amplifizierende Fragment ausgewählt wurde, zusammen durchgeführt werden.

Anwendungen der Platinum SuperFi II DNA-Polymerase:
• PCR mit hoher Wiedergabetreue
• Klonierung und Subklonierung
• Ortsspezifische Mutagenese
• Amplifikation von GC-reichen Templates
• Template-Generierung für die Sequenzierung
• Hochdurchsatz-PCR
• Amplifikation von Proben mit suboptimalem Reinheitsgrad
• Long-Range-PCR
• Schnelle PCR

Ebenfalls erhältlich ist der Platinum SuperFi II PCR Master Mix. Dabei handelt es sich um denselben Master Mix, jedoch ohne Tracking-Farbstoffe.

Weitere Informationen zu Platinum SuperFi II DNA-Polymerase-Produkten ›
Specifications
FarbeGreen
Wiedergabetreue (vs. Taq)>300X
Hot-StartIntegrierter Heißstart
Anzahl Reaktionen5 x 500 Reaktionen
ÜberhangStumpf
PolymerasePlatinum SuperFi II DNA-Polymerase
ProdukttypPCR-Mastermix
Menge5 x 500 reactions
ReaktionsformatSuperMix oder Master Mix
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)20 kb oder weniger
Konzentration2X
Zur Verwendung mit (Anwendung)Heißstart-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue
GC-Rich PCR PerformanceHoch
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
5 Kartons mit Platinum SuperFi II Green PCR Mastermix, jeweils mit:
  • 10 x 1,25 ml Platinum SuperFi II PCR-Mastermix
  • 10 x 1,25 ml Wasser, nukleasefrei
Ausreichend für 2500 50 µl-Reaktionen

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

How much volume of the Platinum SuperFi II PCR Master Mix (2X) or Platinum SuperFi II PCR Green Master Mix (2X) should I use per reaction?

Typically, for a 50 µL PCR reaction, we recommend using 25µµL of the 2X master mix so that its final concentration in the reaction is 1X.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What is the best way to quantify your PCR samples using the Platinum SuperFi II PCR Master Mix, Green (Cat, No. 12369250, 12369010, 12369050)? Is it possible to quantify using Tapestation or a Qubit fluorometer?

The dyes in the Platinum SuperFi II Green PCR Master Mix can interfere with the fluorescent readings on both Qubit fluorometer and Tapestation. To accurately quantify your samples, you should first use a PCR purification kit, such as the GeneJet PCR Purification Kit (Cat. No. K0701), to clean up your samples. Alternatively, you can use the Platinum SuperFi II PCR Master Mix (Cat. No. 12368010) which does not contain the interfering dyes, thus eliminating the need for a purification step.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What are your recommendations when working with long amplicons using Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Good lab practices are important for long fragment amplification. These include using high-quality templates (pure, fresh, and intact) and fresh primer solutions. Reducing primer concentration to 0.2 µM may also improve the results.

Can I use Platinum SuperFi DNA Polymerase cycling protocol and primer annealing temperature with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Yes, Platinum SuperFi II DNA Polymerase works at both universal 60 degrees C annealing temperature and at annealing temperatures calculated with a Tm calculator.

Can I perform TA cloning with Platinum SuperFi II DNA Polymerase?

Platinum SuperFi II DNA Polymerase produces blunt-ended PCR products that can be cloned directly into blunt-ended cloning vectors. TA cloning is also possible if 3' dA-overhangs are added after PCR. We recommend purifying the PCR products of Platinum SuperFi DNA Polymerase before adding the overhangs. The procedure for adding 3' dA-overhangs (TA cloning) includes the following steps:
- Purify the PCR product (e.g., with a PCR purification kit or phenol extraction/DNA precipitation). Before adding the overhangs, PCR product must be purified, as the strong proofreading activity of any remaining Platinum SuperFi DNA Polymerase will degrade the added 3' dA-overhangs.
- Perform 3' dA addition with a Taq DNA polymerase.
Reaction components:
Purified PCR product
0.2 mM dATP
1x Taq Buffer
1 U Taq DNA Polymerase
Incubate the reaction for 20 min at 72 degrees C.
- Proceed to TA cloning. For optimal ligation efficiency, we recommend using fresh PCR products, since 3' dA-overhangs can be lost during storage

Zitierungen und Referenzen (1)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Evaluation of a Yeast Two-Hybrid Library by High-Throughput Sequencing.
Authors:Yu Q, Hu Y, Su J, Li P, Zhang L, Fu X, Chen F, Song A
Journal:J Proteome Res
PubMed ID:32442380
'Yeast two-hybridization (Y2H) is a classical method to study protein-protein interactions in organisms, and the top limitation of Y2H is the high ratio of false negatives and false positives. The most efficient way to reduce this error is to improve the quality of the library. The traditional library quality evaluation ... More