Thermo Scientific Pierce Streptavidin-Agarose-Säulen sind Säulen mit 5 ml Kapazität und 1 ml Streptavidin-Agarose für die Verwendung in einer Vielzahl von biotin-bindenden Affinitätsreinigungsverfahren
Merkmale von Streptavidin-Agarose:
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Streptavidin—gereinigtes rekombinantes Streptavidin-Protein (53 kDa, nahezu neutraler pl); tetramerisch mit vier Biotin-bindenden Stellen pro Molekül
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Agarose-Harz—Träger sind vernetzte 6 %-ige Agarose-Beads (CL-6B), das beliebteste Harz für Proteinaffinitätsaufbereitungsverfahren
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Inert und stabil—Streptavidin wird durch lastenfreie, laugenresistente kovalente Bindungen immobilisiert. Dies führt zu einer geringen unspezifischen Bindung und ermöglicht mehrere Anwendungen ohne Ertragsverlust
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Standardkapazität— Diese Beads haben eine normale Belastung von immobilisiertem Streptavidin und bieten eine Bindungskapazität von 1 bis 3 mg biotinyliertem BSA pro ml Harz
Eigenschaften von vernetzten 6%-igen Agarose-Beads (CL-6B):• Träger-pH-Stabilität: 2 bis 14 (kurzfristig); 3 bis 13 (langfristig)
• Durchschnittliche Partikelgröße: 45 bis 165 Mikrometer
• Ausschlussgrenze: 10.000 bis 4.000.000 Dalton
• Maximale volumetrische Durchflussrate: Ca. 1 ml/Minute (für Säulen mit einem Durchmesser von 1 cm)
• Maximale lineare Geschwindigkeit: 30 cm pro Stunde
• Maximaler Druck: Weniger als 1,5 bar (25 psi)
Anwendungen:• Aufreinigung von Membranantigenen in Verbindung mit biotinylierten monoklonalen Antikörpern
• Isolierung von Zelloberflächenproteinen, die mit einem keilbaren Biotinylierungsreagenz markiert wurden•
Isolierung von Zelloberflächen-Glykoproteinen mit biotinyliertem Koncanavalin A
• Wiederherstellung von einsträngiger biotinylierter DNA zur Dideoxy-Sequenzierung
• Streptavidin-beschichtete Platten zur direkten Festphasensequenzierung
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In-vitro-Mutagenese mit Streptavidin-beschichteten Platten
• DNA-Fingerprinting mit Streptavidin-beschichteten Platten
Pierce Streptavidin-Agarose besteht aus gereinigtem rekombinantem Streptavidin, das kovalent auf qualitativ hochwertigen vernetzten 6 %-igen Agarose-Beads immobilisiert wurde. Bei Streptavidin handelt es sich um ein tetrameres Biotin-bindendes Protein. Die Agarose-Beads weisen physikalische und chemische Eigenschaften auf, die ihren Einsatz in einer Vielzahl von Batch- oder Säulen-Affinitätsverfahren ermöglichen. Mit diesem Streptavidin-Harz können biotinylierte Antikörper, Proteine, Peptide, Nukleinsäuren und andere Moleküle oder Interaktionskomplexe erfasst, immunpräzipittiert, entfernt oder aus Proben gereinigt werden.
Streptavidin ist ein tetramerisches Protein, das vier biotin-bindende Stellen ähnlich wie Avidin enthält. Das native Protein aus
Streptomyces avidinii ist Kohlenhydrat-frei, hat einen sauren pI von 5,5 und eine Masse von 75 kDa. Das rekombinante Protein, das zur Herstellung von Thermo Scientific Pierce Streptavidin-Harzen verwendet wird, hat einen nahezu neutralen isoelektrischen Punkt und eine Masse von 53 kDa. Streptavidin hat aufgrund des Fehlens von Kohlenhydraten im Allgemeinen weniger unspezifische Bindungen als Avidin (aus Hühnereiweiß).
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