Estreptavidina agarosa Pierce™ de alta capacidad

La agarosa estreptavidina de alta capacidad Thermo Scientific Pierce es una resina granulada de proteína de estreptavidina recombinante inmovilizada que une proteínas biotiniladas a más de 10 mg/ml de gránulos.

Características de la agarosa estreptavidina de alta capacidad:

• Estreptavidina: proteína de estreptavidina recombinante purificada (53 kDa, pl casi neutro); tetramérico con cuatro sitios de unión de biotina por molécula
• Resina de agarosa: el soporte es agarosa granulada al 6 % entrecruzada (CL-6B), la resina más utilizada en métodos de purificación de proteínas por afinidad.
• Inerte y estable: la estreptavidina se inmoviliza mediante uniones covalentes, sin carga y resistentes a la lixiviación, lo que produce una unión inespecífica y permite múltiples usos sin disminuir el rendimiento
• Alta capacidad: esta variedad de gránulos tiene una carga densa de estreptavidina inmovilizada, lo que ofrece una capacidad de unión superior a 10 mg de BSA biotinilada por ml de resina
• Dos formatos: disponible en varios frascos de pulpa de resina de varios tamaños o envasada en cartuchos de cromatografía de 1 ml y 5 ml

Aplicaciones:
• Purificación de antígenos de membrana junto con anticuerpos monoclonales biotinilados
• Aislamiento de proteínas de la superficie celular que se han etiquetado con un reactivo biotinilización divisible
• Aislamiento de glicoproteínas de la superficie celular mediante concanavalina A biotinilada
• Recuperación de ADN monocatenario biotinilado para una secuenciación didesoxi
• Placas con revestimiento de estreptavidina utilizadas para la secuenciación directa de la fase sólida
• Mutagénesis in vitro con placas revestidas de estreptavidina
• Obtención de huellas de ADN con placas con revestimiento de estreptavidina

Propiedades de la agarosa granulada al 6 % entrecruzada (CL-6B):
• Estabilidad pH del soporte: de 2 a 14 (corto plazo); de 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño medio de partícula: de 45 a 165 micrómetros
• Límite de exclusión: de 10.000 a 4.000.000 daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (en una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1,5 bar)

La agarosa estreptavidina de alta capacidad Pierce consta de estreptavidina recombinante purificada que ha sido inmovilizada covalentemente a alta densidad en agarosa granulada entrecruzada al 6 % de gran calidad. La estreptavidina es una proteína tetramérica de unión de biotina. Los gránulos de agarosa tienen propiedades fisicoquímicas que permiten su uso en distintos procedimientos de afinidad en columnas o en lotes. Los anticuerpos biotinilados, las proteínas, los péptidos, los ácidos nucleicos y otras moléculas o complejos de interacción se pueden capturar, inmunoprecipitar, eliminar o purificar a partir de muestras utilizando esta resina de estreptavidina.

La estreptavidina es una proteína tetramérica que contiene cuatro sitios de unión de biotina, de forma similar a la avidina. La proteína nativa de Streptomyces avidinii no posee carbohidratos, tiene un pI acídico de 5,5 y una masa de 75 kDa. La proteína recombinante empleada para la fabricación de resinas de estreptavidina Thermo Scientific Pierce tiene un punto isoeléctrico casi neutro y una masa de 53 kDa. La estreptavidina suele tener menos fuerza de unión inespecífica que la avidina (clara de huevo) debido a la ausencia de carbohidratos.

Los gránulos de agarosa estreptavidina tienen una carga densa de estreptavidina inmovilizada, lo que ofrece una capacidad de unión superior a 10 mg de BSA biotinilada por ml de resina. Esto corresponde a una capacidad de unión de biotina entre 2 y 3 veces superior a la de los productos de otros proveedores, lo que permite el uso de pequeñas cantidades de resina para experimentos.

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