Protein Thermal Shift™ Färbungskit

Applied Biosystems® Protein Thermal Shift™ Kits enthalten einen Farbstoff, der an exponierte hydrophobe Rückstände bindet, um die thermische Stabilität vonWeitere Informationen

Katalognummer	Menge
4461146	1,000 reactions

Katalognummer 4461146

Preis (EUR)

221,00

Menge:

1,000 reactions

Preis (EUR)

221,00

Applied Biosystems® Protein Thermal Shift™ Kits enthalten einen Farbstoff, der an exponierte hydrophobe Rückstände bindet, um die thermische Stabilität von Proteinen mit einem Echtzeit-PCR-Instrument zu überwachen, Pufferbedingungen zu identifizieren, die das Protein von Interesse stabilisieren, oder Liganden für Verbindungen zu screenen, die das Protein von Interesse binden.

Sparen Sie Zeit und Geld mit Ihrem Probenscreening
Diese Lösung reduziert den Zeit- und Kostenaufwand, der mit dem Screening von Proben im Vergleich zu den derzeit verfügbaren Methoden verbunden ist, erheblich. Protein Thermal Shift™ Produkte, die auf unseren Echtzeit-PCR-Systemen ausgeführt werden, ermöglichen Forschern kostengünstige und effiziente:

• Screening-Proben auf relative thermische Stabilität von Proteinen
• Screening-Moleküle (z. B. Medikamentenkandidaten kleiner Moleküle, fragmentbasierte Bibliotheken und Antikörper) auf Ligandbindung an Proteine auf Hochdurchsatz-Screening
• -Proben auf Stabilitätsänderungen nach Proteinpunktmutationen oder -modifikationen
• Systematische Identifizierung geeigneter⁄optimaler Pufferbedingungen für die Messung von Protein-Ligand-Interaktionen, die Herstellung stabiler Proteinpräparate, Proteinkristallisation und die schnelle Speicherung von Proteinen
• QC-Protein-preps, um Proteinintegrität⁄-reinheit zu gewährleisten

Zwei Kits zur Auswahl
Protein Thermal Shift™ Kits und Puffer für die Durchführung von Protein-Thermal-Shift-Experimenten, ausreichend für bis zu 1000 Reaktionen. Das Protein Thermal Shift™ Starter-Kit enthält das Farb-Kit sowie ein Kontrollprotein und einen Kontrollliganden für Testexperimente und Fehlersuche. Die Bestandteile des Protein Thermal Shift™ Starter-Kits sind in zwei Schachteln verpackt, eine für die Lagerung bei -20 °C und die andere bei 4 °C für maximale Flexibilität bei der Reagenzienformulierung.

Einfache Analysen mit Protein Thermal Shift™ Software
Unsere komplette Protein Thermal Shift™-Lösung umfasst Analysesoftware, die mit den aus fünf unserer Echtzeit-PCR-Systeme generierten Laufdateien kompatibel ist: StepOne™ Real-Time PCR-System, StepOnePlus™ Real-Time PCR-System, 7500 Fast Real-Time-PCR-System und ViiA™7 Real-Time-PCR-System.

Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

Zur Verwendung mit (Geräte)7500 Fast System, 7500 System, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System

KittypFarbstoffkit

Anzahl Reaktionen1000 Reaktionen

ProduktlinieProtein Thermal Shift

Menge1,000 reactions

ProbentypProtein

VersandbedingungRaumtemperatur

ZielspezifitätNicht zielspezifisch

VerfahrenFluoreszenzintensitätsmessung

NachweisverfahrenPrimer-Sonde

Zur Verwendung mit (Anwendung)Pharma, Biopharma, Echtzeit-PCR (qPCR)

PCR-MethodeqPCR

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

Das Protein Thermal Shift™ Dye Kit enthält den Farbstoff und Puffer für die Durchführung von Protein-Thermal-Shift-Experimenten, ausreichend für bis zu 1000 Reaktionen. Bei 18 ° bis 25 °C lagern.

Garantierte Mindesthaltbarkeit 60 Tage (das genaue Verfallsdatum ist auf dem Produkt und COfA aufgedruckt).

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

In the Protein Thermal Shift Assay, my replicates have different levels of fluorescence. Is this a problem?

We recommend looking at the spread in Tm, which is more important than the relative fluorescence.

What can I do for a protein that starts out high and then shows a region of melt (flattening of the curve, but no real rise in signal) when performing a Protein Thermal Shift assay?

Some proteins have hydrophobic residues on the surface and the dye binds to these residues. Heating results in unfolding of the protein causing more hydrophobic residues to be exposed. The dyes bind preferentially to these inner locations and so there is a flattening (or a very low rise) of the melt discernable in the melt profile. If there is no positive slope, you will not get a Boltzmann Tm, but you should still get a derivative one. And you can always draw a manual region to get a Tm out. Some proteins will not work with this technology if the hydrophobic residues are already exposed on the surface and the dye binds strongly to it. Please contact Technical Support at techsupport@thermofisher.com about the possibility of other dyes being available for this issue.

I am getting an error message when I try to open my *.eds data file in the Protein Thermal Shift Software? What should I do?

Make sure that you first open the file in the corresponding instrument software, click “Analyze”, and then save the file, before trying to open with the Protein Thermal Shift Software. The file must first be analyzed before it can be used in the Protein Thermal Shift Software.

The software allows for data from different plates to be analyzed together, what should be considered when mixing data from multiple plates?

The software will allow for ≥100 plates per study. We allow the user this flexibility but do not recommend you mix data from multiple plates unless they have validated their results in advance. At a minimum, we recommend researchers include a reference assay in each plate to ensure reproducibility.

Which analysis method should I choose? The Boltzmann fit or the derivative method?

We provide two independent methods because they each have unique things to offer in terms of the analysis. The two-state Boltzmann model has a physical meaning and appeal. It also provides a great way to normalize across noisy undulations in the signal. However, those undulations may be of actual interest and not noise, such as for multi-domain proteins where they may correspond to different domains coming apart in stages. Here the two-state model is inappropriate. The derivative method can help get a temperature at which the local peaks occur. These are two completely unrelated approaches. If the two-state model is a great fit for your data, the results should be in close agreement.

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