Pierce™ c-Myc-Tag Magnetic IP/Co-IP Kit

Das Thermo Scientific Pierce magnetische c-Myc-Tag-IP/Co-IP-Kit enthält spezielle Immunaffinitäts-Magnetbeads und Reagenzien für Immunpräzipitations-Assays von c-Myc-Fusionsproteinen oder Co-IP-Experimente mit c-Myc-markierten Köderproteinen.

Im Gegensatz zu herkömmlichen IP-Verfahren, die auf der Erfassung mittels Protein A/G-Beads basieren, verwendet dieses Kit magnetische Beads, die bereits immobilisierte Anti-c-Myc-Antikörper enthalten. Diese magnetischen Pierce Anti-c-Myc Beads gewährleisten die spezifische Bindung c-Myc-getaggter Proteinkomplexe aus biologischen Proben. Da der Antikörper kovalent an den Beads angebracht ist, lassen sich IP-Targets leicht eluieren und ohne Antikörperkontamination zurückgewinnen. Das IP-Komplettpaket enthält die magnetischen Beads, Lyse-/Waschpuffer, Elutionspuffer mit niedrigem pH-Wert, Neutralisationspuffer, Positivkontroll-Lysat mit c-Myc-Tag und nicht reduzierenden Probenpuffer für SDS-PAGE. Es sind Protokolle für manuelle und automatisierte Arbeitsabläufe erhältlich. Es ist genügend Material für die Durchführung von 40 IP- oder Co-IP-Assays vorhanden.

Merkmale des magnetischen c-Myc-Tag-IP/Co-IP-Kits:

• Spezifische Magnetbeads – kovalent immobilisierte, hochwertige monoklonale Anti-c-Myc-Antikörper ermöglichen eine hohe Ausbeute an Immunpräzipitationsprodukten
• Geringe unspezifische Bindungen – stabile, vorblockierte Beads und spezifische Antikörper minimieren die Off-Target-Bindung
• Problemlose Elution – Elutionspuffer mit niedrigem pH-Wert gewährleistet die Rückgewinnung von c-Myc-markierten Proteininteraktionskomplexen ohne Kontamination durch das Auslaugen von Antikörpern
• Praktisch und schnell – das komplette Kit und die leicht zu befolgenden Anweisungen bieten optimierte Protokolle zur Durchführung von IP- oder Co-IP-Experimenten in etwa 1 Stunde
• Vielseitig – die Magnetbeads eignen sich sowohl für manuelle als auch automatisierte Arbeitsabläufe (z. B. Thermo Scientific KingFisher Instrumente)

Das c-Myc-Peptid (EQKLISEEDL) aus der C-Terminus-Region von humanem c-Myc-Protein ist eines von mehreren Fusionsprotein-Tags zur rekombinanten Proteinexpression. Das Pierce c-Myc magnetische IP/Co-IP-Kit nutzt spezifische, immobilisierte Antikörper mit hoher Affinität (Klon 9E10), die eine schnelle Immunpräzipitation von c-Myc-markierten Fusionsproteinen aus Bakterien- und Säugetier-Zelllysaten sowie von Lysaten, die mit Pierce Human In-vitro-Translations-Kits vorbereitet wurden, erlauben. Die Beads werden mit einem Zelllysat inkubiert, das das c-Myc-getaggte Protein enthält. Das Fusionsprotein wird aus dem Lysat erfasst und die Beads werden anschließend gewaschen und dann mit einem Elutionspuffer mit niedrigem pH-Wert oder einem nichtreduzierenden Probenpuffer eluiert. Das Protokoll und die Puffer wurden sowohl für IP- als auch für co-IP-Reaktionen optimiert, sodass spezifische Proteininteraktionskomplexe in der elutierten Probe angereichert werden. Anti-c-Myc-Antikörper können verwendet werden, um c-Myc-markierte Proteine mittels Western-Blot-Analyse nachzuweisen.

Informationen über das Bindungsvermögen und weitere Eigenschaften der in diesem Kit verwendeten Magnetbeads finden Sie unter Pierce Anti-c-Myc-Magnetbeads (Kat.-Nr. 88842).

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