MagMAX™ FFPE DNA/RNA Ultra Kit
MagMAX™ FFPE DNA/RNA Ultra Kit
Applied Biosystems™

MagMAX™ FFPE DNA/RNA Ultra Kit

MagMAX™ FFPE DNA/RNAウルトラキットは、同じホルムアルデヒドまたはパラホルムアルデヒド固定パラフィン包埋(FFPE)組織サンプルからDNAおよびRNAを連続的に単離できるように設計されています。DNAとRNAは別々の溶出液で回収され、リアルタイムPCRや次世代シーケンシングなどの幅広い用途に対応しています。このキットは、同じFFPEサンプルからRNAとDDNAを単離できるため詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
A318811 kit
製品番号(カタログ番号) A31881
価格(JPY)
114,400
Each
お問い合わせください ›
数量:
1 kit
MagMAX™ FFPE DNA/RNAウルトラキットは、同じホルムアルデヒドまたはパラホルムアルデヒド固定パラフィン包埋(FFPE)組織サンプルからDNAおよびRNAを連続的に単離できるように設計されています。DNAとRNAは別々の溶出液で回収され、リアルタイムPCRや次世代シーケンシングなどの幅広い用途に対応しています。このキットは、同じFFPEサンプルからRNAとDDNAを単離できるため、Oncomine™ ComprehensiveおよびOncomine™ Focusアッセイでのサンプル調整に最適です。

MagMAX FFPE DNA/RNAウルトラキットの特長:
•RNAやDNAの手動/自動単離が可能な柔軟な設計
• 最小要件5 µm切片またはカール入力
• 40 µm FFPE切片またはカールを処理可能。代替プロトコルで40 µmより大きい切片を処理可能
• ターゲットRNAとDNAシーケンシングパネルに対応
• RNA、microRNA、DNAの一貫した単離が可能なDynabeads™ MyOne™シランを含む
• RNAまたはDNAのみを単離可能な代替プロトコル

FFPEサンプルに含まれる情報を解明することは、がん研究に不可欠です。一般的な核酸分離法では、サンプルから回収する核酸を選択する必要がありますが、他の核酸(およびその分析によって得られた可能性のある情報)は失われます。あるいは、DNAとRNAを共精製するか、サンプルを半分に分割してそれぞれを精製することもできます。

少ないサンプルからより多くの情報を取得
MagMAX FFPE DNA/RNAウルトラキットプロトコルは、まずFFPEサンプルからDNAを単離し、次にDNA除去上清からRNAを回収することで、これらの問題に対処します。核酸は個別の溶出液として調製され、下流分析に使用できます。これにより、ホットスポット変異、CNV、融合遺伝子、インデルなどの重要なバイオマーカーの調査など、貴重なサンプルのより完全な分析が可能になります。

MagMAX磁気ビーズベースで精製するメリット
このキットの磁気ビーズベースの精製フォーマットで、磁気スタンドやKingFisher™ DuoプライムやKingFisher™ Flexプロセッサなどの磁性粒子プロセッサを用いた手動でのサンプル処理が可能。処理するサンプル数を簡単にスケールアップできます。

磁気ビーズは、核酸を分離する他の技術と比べて多くの利点を提供します。ビーズはガラス繊維フィルターよりも効率的にRNAおよびDNAを結合し、より高く、一貫性に優れた収率を生じます。さらに、フィルターと真空マニホールドが使用されないため、抽出工程中に未消化の組織の粒子状物質によってこれらの部分が詰まるリスクがありません。この目詰まりの問題は、プロテイナーゼK処理中に完全に消化されない線維FFPE組織サンプルで特に懸念されます。

最適化されたビーズ表面化学
MagMAX FFPE DNA/RNAウルトラキットに使用されているDynabeads MyOneシランは、高特異的な表面積を持つ最適化されたシリカ様表面化学を有しており、核酸の回収において効率的なカイネティクスと高感度を実現します。これらの側面から、Dynabeads MyOneシランはFFPEサンプル中のRNAおよびDNAターゲットの両方の回収に最適です。捕捉したこれらの核酸は、両方とも50 µLの容量で個別に溶出され、ダウンストリームアプリケーションに使用できます。

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
使用対象(アプリケーション)次世代シーケンシング, RT-PCR(終点), リアルタイムPCR, PCR, microRNA解析
高スループット適合性ハイスループット対応
製品ラインMagMAX
製品タイプFFPE DNA/RNA Ultraキット
数量1 kit
サンプルタイプFFPE、固定サンプル, Fixed Samples
出荷条件室温または氷水またはドライアイスでの出荷が承認されています
ターゲットトータルRNA, miRNA, 全核酸, ゲノムDNA, mRNA, トランスクリプトームRNA
フォーマットキット
Isolation Technology磁気ビーズ
Unit SizeEach
組成および保存条件
• 1 x 385 µLプロテアーゼ、-5℃~-30℃で保管
• 1 x 10 mLプロテアーゼ消化バッファー、室温で保管
• 1 x 38.5 mL結合溶液、室温で保管
• 1 x 1.95 mL核酸結合ビーズ、2℃~8℃
• 1 x 38.5 mL DNA洗浄バッファー、室温で保管
• 1 x 210 mL洗浄溶液2濃縮液、室温で保管
• 1 x 5 mL溶出液、室温で保管
• 1 x 115 mLRNA洗浄バッファー濃縮液、室温で保管
• 1 x 1.92 mL DNase、-5℃~-30℃で保管
• 1 x 960 µL DNaseバッファー、-5℃~-30℃で保管

よくあるご質問(FAQ)

How can I increase my chances of successful extraction of FFPE samples in terms of DNA quality and yield?

There are a number of factors that can impact the overall quality and yield of DNA isolated from FFPE tissues. Here are recommendations to address several key factors:

- Upstream tissue procurement and tissue specimen preparation - if possible, tissues should be fixed within one hour of surgical resection. The optimal fixation time is 12-24 hours using neutral-buffered formalin or paraformaldehyde. Fixed tissues should be thoroughly dehydrated prior to the embedding process.
- Block storage - storage of blocks without cut faces, when possible, prevents ongoing damage from exposure to atmospheric oxygen, water, and other environmental factors such as light and infestation (fungi, insects, etc.).
- Tissue type, size, and amount being used for DNA isolation - the recommended tissue thickness is 10-20 µm. The number of sections used is determined by the tissue type (which impacts cell density) and surface area (recommended size: 50-300 mm^2). Excess starting material can cause filter clogging, resulting in poor yield.
- Excessive amount of paraffin used for embedding tissues - when possible, excess paraffin should be trimmed away prior to starting the purification protocol. For xylene-based purification methods, two xylene treatments at room temperature should be sufficient for complete deparaffinization. If desired, a more rigorous 37-55 degrees C treatment can be performed for up to 30 minutes. After the xylene deparaffinization, it is crucial that the 100% ethanol is completely removed and the pellets are dry after the two 100% ethanol washes. The magnetic bead method employs novel chemistries to deal with the paraffin that limits input to 20 µm sections.

Read more about extraction of nucleic acids from FFPE samples here (http://www.thermofisher.com/us/en/home/references/Invitrogen-tech-support/rna-isolation/general-articles/extraction-of-nucleic-acids-from-ffpe-samples.html).

What can I use to extract DNA from FFPE (formalin fixed paraffin embedded) samples?

We offer 2 kits: RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPE and MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit Read more about the differences between these kits here (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/dna-extraction/genomic-dna-extraction/dna-extractions-working-with-ffpe-samples.html).

Is there a limit to the size of curls that can be processed with the MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit (Cat. No. A31881)?

There is no specific upper limit to curl size for use with the MagMAX FFPE DNA/RNA Ultra kit (Cat. No. A31881). If all of the tissue is able to be submerged in the 200 µL of buffer, then the large volume of protocol should work. Please keep in mind when processing sections that are thicker than 40 µm, additional digestion buffer, binding solution, and wash buffer, may need to be purchased separately (Cat. No. A32796).

Can I use a heat block for the AutoLys M tube incubation?

No. The AutoLys M tubes don't fit in a standard 1.5 mL or 2.0 mL heat block. We recommend incubating the tubes in the tube racks in an incubator or oven.

What kind of centrifuge do I need to spin down the AutoLys M Tubes (Cat. No. A38738)?

Any centrifuge with plate adapters will work. The AutoLys M Tube Racks fit nicely into those adapters.