Pierce EDTA-kompatibles Ni-IMAC-Harz mit hoher Kapazität wurde zur Aufreinigung von überexprimierten His-markierten Proteinen aus Zellkulturmedien entwickelt.Die Matrix ist eine 6 %-quervernetzte Agarose mit optimalen Eigenschaften für FPLC-Säuleinreinigungen in Chargen, mit Schwerkraftsäulen und mit Forschungs-/Pilotskalierung.Das Harz hat eine hohe Bindungskapazität (bis zu 80 mg Protein pro ml Harz) und kann die hohe EDTA- und Reduktionsmittel-Konzentration tolerieren, die zur Hemmung von Metalloproteasen und zur Stabilisierung empfindlicher intrazellulärer Proteine verwendet werden.
Merkmale des EDTA-kompatiblen Ni-IMAC-Harzes mit hoher Kapazität:
•Chelatorstabil — bis zu 20 mM EDTA und DTT ohne Leistungsverlust
• Kompatibel mit der Aufreinigung von überexprimierten, sezernierten Proteinen in Zellkulturmedien (z. B. Expi293, ExpiCHO und ExpiSf-Expressionssysteme)
• Hohe Bindungskapazität—>80 mg/ml Bindungskapazität für His-markierte rekombinante Proteine
• Wiederverwendbar — kann mit dem CIP-Protokoll bis zu 10-mal regeneriert werden
EDTA und Reduktionsmittel wie DTT und TCEP beeinträchtigen die Leistung von Ni-IMAC-Supporten durch Abisolieren des Metalls.Aufgrund seiner Chelator-Stabilitätseigenschaft (EDTA-tolerant) eignet sich Pierce EDTA-kompatibles Ni-IMAC-Harz mit hoher Kapazität besonders zur Aufreinigung von exprimierten, His-markierten Proteinen, die in Zellkulturmedien abgesondert werden, oder zur Aufreinigung intrazellulärer His-markierter Proteine, die EDTA zur Aufrechterhaltung von Stabilität und Funktion benötigen.In beiden Fällen können große Probenmengen ohne Abisolieren des Ni-Metalls des Trägers aufgereinigt werden, wodurch eine gleichbleibend hohe Ausbeute erzielt wird.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.