NucBlue™ Live ReadyProbes™ Reagenz (Hoechst 33342)

Höchst 33342 ist eine beliebte zelldurchlässige nukleäre Gegenfärbung mit einer blauen Fluoreszenz bei Anbindung an DNA. Mit NucBlue™ Live ReadyProbes™ Reagent steht diese klassische Färbung in einer bei Raumtemperatur stabilen Lösung bereit, die in einer praktischen Tropfflasche erhältlich ist. Zum Färben von Zellen einfach zwei Tropfen pro Milliliter auf die Probe geben.

• Kein Verdünnen, Wiegen oder Pipettieren
• Praktische Tropfflasche – nur zwei Tropfen pro ml
• Stabil bei Raumtemperatur – kann deshalb im Arbeits- oder Zellkulturbereich aufbewahrt werden
• Angeregt durch UV-Licht emittiert es blaue Fluoreszenz bei 460 nm bei Bindung an DNA

Weitere ReadyProbes™ Reagenzien für die Zellfärbung
Andere Kernfärbemittel für die Bildgebung

Zellbildgebung
Die spektralen Eigenschaften von Hoechst 33342 (2'-[4-Ethoxyphenyl]-5-[4-methyl-1-piperazinyl]-2,5'-bi-1H-benzimidazol), einschließlich einer großen Stokes-Verschiebung, machen es ideal für die Verwendung mit grünen (Alexa Fluor™ 488, FITC, GFP) und roten (Alexa Fluor™ 594,Texas Red™, Rhodamin, mCherry, mKate-2) Fluorophoren in mehrfarbigen Experimenten. Aufgrund seiner hohen DNA-Affinität wird Hoechst 33342 auch häufig für Zellzählungen sowie Zellzyklus- und Zellreplikationsstudien verwendet, um kondensierte Zellkerne in apoptotischen Zellen erkennbar zu machen, sowie für Zellzyklusstudien in Kombination mit Click-iT™ EdU- oder BrdU-Färbung, zur nukleären Segmentierung bei der High-Content-Bildanalyse und zum Sortieren von Zellen auf der Grundlage ihres DNA-Gehalts.

Anwendungsvorschläge
NucBlue™ Lebendzellfärbemittel kann direkt zu Zellen in Vollmedien oder Pufferlösungen hinzugefügt werden.
• In den meisten Fällen sorgen 2 Tropfen/ml und eine Inkubationszeit von 15 bis 30 Minuten für eine helle Zellkernfärbung; für einige Zelltypen, Bedingungen und Anwendungen kann jedoch eine Optimierung erforderlich sein. In solchen Fällen einfach mehr oder weniger Tropfen hinzufügen, bis die optimale Intensität der Färbung erreicht ist. In den meisten Fällen steigt die Farbintensität mit der Zeit, wenn Zellen nicht vor der Bildgebung gewaschen werden.
• NucBlue™ Lebendzellfärbemittel wird durch UV-Licht bei 360 nm angeregt, wenn der Farbstoff an DNA gebunden ist, und hat ein Emissionsmaximum bei 460 nm. Der Nachweis erfolgt durch einen Blau/Cyan-Filter, z. B. einen DAPI-Filter, blaue GFP-Filter oder den Semrock BrightLine™ Alexa Fluor™ 350 Farbstoff-Filtersatz.