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Flp-In™-CHO Cell Line
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Zitierungen und Referenzen (8)
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Flp-In™-CHO Cell Line

Die Flp-In™-Zelllinien sind für die schnelle Erzeugung stabiler Zelllinien entwickelt, die das Protein von Interesse aus dem Flp-In™ Expressionsvektor exprimieren.Weitere Informationen
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KatalognummerMenge
R75807
auch als R758-07 bezeichnet
1 ml
Katalognummer R75807
auch als R758-07 bezeichnet
Preis (EUR)
3.225,00
Each
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Die Flp-In™-Zelllinien sind für die schnelle Erzeugung stabiler Zelllinien entwickelt, die das Protein von Interesse aus dem Flp-In™ Expressionsvektor exprimieren. Die Zellen enthalten eine einzelne stabil integrierte FRT-Stelle an einem transkriptionsaktiven Genomlocus. Die gezielte Integration eines Flp-In™-Expressionsvektors gewährleistet eine starke Expression des Gens von Interesse. Es sind sechs Flp-In™-Zelllinien für die Erzeugung isogener stabiler Zelllinien und eine Flp-In™ T-REx™ Zelllinie für die Erzeugung von Tetracyclin-regulierten stabilen Zelllinien erhältlich. Flp-In-CV-1, Flp-In™-293, Flp-In-BHK, Flp-In-Jurkat und Flp-In™-3T3-Zelllinien wurden durch die Transfektion der Elternzelllinien mit pFRT/lacZeo und die Auswahl für stabile Zeocin™-resistente Klone erstellt. Die Flp-In™-CHO-Zelllinie wurde durch die Transfektion von CHO-Zellen mit pFRT/lacZeo2 und die Auswahl für Zeocin™-resistente Klone erstellt. Die Flp-In™ T-REx-293-Zelllinie enthält pFRT/lacZeo und pcDNA™6/TR (aus dem T-REx™ System) stabil integriert. Die Co-Transfektion der Flp-In™-Zelllinien mit einem Flp-In™-Expressionsvektor und dem FLP-Rekombinase-Vektor pOG44 führt zu einer gezielten Integration des Expressionsvektors in denselben Locus in jeder Zelle, wodurch homogene Ebenen der Genexpression gewährleistet werden.

Auswahl Ihrer Flp-In™ Vektor/Zelllinien-Kombination
Die Flp-In™-CV-1, Flp-In™-293, Flp-In™-CHO und Flp-In™-Jurkat-Zelllinien (Abbildung 1) funktionieren gut mit Flp-In™-Vektoren, die ein Gen vom CMV-Promotor exprimieren (pcDNA™5/FRT, pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ und pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™). Flp-In™-BHK- und Flp-In™-3T3-Zellen neigen dazu, den CMV-Promotor nach unten zu regulieren. Daher wird empfohlen, die Flp-in™-Vektoren, die den EF-1α-Promotor (pEF5/FRT/V5-DEST™ und pEF5/FRT/V5-D-TOPO™) enthalten, mit diesen Zelllinien zu verwenden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
ZelllinieFlp-In™-CHO-Zelllinie
Menge1 ml
SpeziesHamster
ProduktlinieFlp-In
ProteinmarkierungpSec
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
3 x 106 -Zellen werden eingefroren in 1 ml von 90 % des kompletten Mediums und 10 % DMSO geliefert. Die Zellen müssen in flüssigem Stickstoff gelagert werden. Zellen bleiben garantiert 6 Monate lang stabil, wenn sie sachgemäß gelagert werden.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Is multiple integration of the Flp-In expression construct possible? How do you screen for multiple integrants, and how stable is the Flp-In expression cell line?

In theory, one can get multiple integrations of the Flp-In expression construct—an FRT-specific integration event and a random, second-site integration. However, random integration is a relatively uncommon event. Limiting the amount of DNA in the transfection will reduce the chance of second-site integration. We have transfected 293 cells (lacking the FRT site) with the pcDNA5/FRT vector and have identified one potential second-site integrant after screening over 200 clones. DNA integrations can be detected by Southern blot. A single integrant will display a single band; double: two; triple: three, etc. We have maintained a number of Flp-In expression cell lines for over four months and have not observed any loss of the Flp-In expression construct, whether hygromycin selection was maintained or not.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

What kind of Flp-In T-REx cell lines do you offer?

We offer the Flp-In T-REx system that contains pFRT/lacZeo and pcDNA6/TR stably integrated into HEK 293 cells. This cell line has been functionally tested for its ability to regulate expression.

Zitierungen und Referenzen (8)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Detection of anti-type 3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibodies in the sera of Sjögren's syndrome patients by use of a transfected cell line assay.
Authors:Gao J, Cha S, Jonsson R, Opalko J, Peck AB,
Journal:Arthritis Rheum
PubMed ID:15334476
'OBJECTIVE: Sjögren''s syndrome (SS) is an autoimmune disease affecting primarily the salivary and lacrimal glands, leading to dry mouth and dry eyes. Recent studies have suggested that autoantibodies reactive with the type 3 muscarinic acetylcholine receptors (M3Rs) expressed on salivary and lacrimal gland cells may be highly specific for SS. ... More
The macrophage scavenger receptor CD163: endocytic properties of cytoplasmic tail variants.
Authors:Nielsen MJ, Madsen M, Møller HJ, Moestrup SK,
Journal:J Leukoc Biol
PubMed ID:16434690
'CD163 is the monocyte/macrophage-specific receptor for haptoglobin-hemoglobin (Hp-Hb) complexes. The cytoplasmic tail of human CD163 exists as a short tail variant and two long tail variants. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction analysis indicated that all three CD163 variants are substantially expressed in blood, liver, and spleen, and the short tail variant ... More
Effect of genetic variation on human cytochrome p450 reductase-mediated paraquat cytotoxicity.
Authors:Han JF, Wang SL, He XY, Liu CY, Hong JY,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16495354
Paraquat (1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridylium dichloride) is a widely used herbicide and is highly toxic to human and animals. The mechanisms of paraquat toxicity involve the generation of superoxide anion through the process of redox cycling. NADPH-cytochrome P450 oxidoreductase (POR) has been reported to be a major enzyme for one-electron reduction of paraquat ... More
The missense genetic polymorphisms of human CYP2A13: functional significance in carcinogen activation and identification of a null allelic variant.
Authors:Wang SL, He XY, Shen J, Wang JS, Hong JY,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16917071
Cytochrome P450 2A13 (CYP2A13), an enzyme predominantly expressed in human respiratory tissues, is highly efficient for the metabolic activation of two suspected human lung carcinogens 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK) and aflatoxin B1 (AFB1). Functional genetic polymorphisms of CYP2A13 may therefore be an important factor in human susceptibility to related lung cancers. Among ... More
Targeting of the dual oxidase 2 N-terminal region to the plasma membrane.
Authors:Morand S, Agnandji D, Noel-Hudson MS, Nicolas V, Buisson S, Macon-Lemaitre L, Gnidehou S, Kaniewski J, Ohayon R, Virion A, Dupuy C,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:15150274
Dual oxidase 2 (Duox2) is a cell surface glycoprotein that probably provides thyroperoxidase with the H2O2 required to catalyze thyroid hormone synthesis. No functional H2O2-generating system has yet been obtained after transfecting Duox2 into non-thyroid cell lines, because it is retained in the endoplasmic reticulum (ER). We investigated the level ... More
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