EZ-Link™ Alkoxyamine-PEG4-Biotin

La alcoxiamina-PEG4-biotina EZ-Link de Thermo Scientific es un reactivo de biotinilización que contiene un agente espaciador largo de polietilenglicol (PEG) de cuatro unidades para la biotinilización de macromoléculas en grupos de carbohidratos que han sido oxidados para formar aldehídos.

Características de la alcoxiamina-PEG4-biotina EZ-Link:

• Etiquetado de glicoproteína: proteínas glicosiladas biotiniladas en residuos de ácido siálico para la detección o purificación utilizando sondas o resinas de estreptavidina
• Etiquetado de superficie celular: biotinile y aísle glicoproteínas; el reactivo no permea las membranas de células completas
• Reactivo al aldehído: reacciona con aldehídos formados por la oxidación de periodato de grupos de azúcar
• Activado por alcoxiamina: el grupo de aminoácidos forma unos enlaces más estables que los reactivos de hidracida
• Pegilado: el brazo espaciador contiene un grupo de polietilenglicol (PEG) hidrófilo de cuatro unidades
• Mejora la solubilidad: la pegilación aporta hidrosolubilidad a la molécula biotinilada, lo que ayuda a evitar la agregación de anticuerpos biotinilados que se almacenan en solución
• Irreversible: forma enlaces estables (permanentes) de oxima; el brazo espaciador no se puede escindir
• Solubilidad: normalmente disuelta en DMSO para hacer la solución madre concentrada
• Longitud media: el brazo espaciador (longitud total añadida al objetivo) es de 27,0 angstroms, suficiente para minimizar el impedimento estérico para la unión

Los reactivos de aminoácidos-biotina, como este, son útiles para biotinilizar glicoproteínas y otras moléculas que tengan grupos polisacáridos oxidables. El grupo de alcoxiamina (también llamado grupo de aminoácidos) se conjuga con aldehídos de azúcares oxidados. Los reactivos alcoxiamina-PEG-biotina EZ-Link contienen un brazo espaciador extendido multifuncional que es un polietilenglicol (PEG) flexible, no inmunogénico e hidrófilo, que imparte solubilidad en agua a moléculas etiquetadas. En consecuencia, los anticuerpos etiquetados con reactivos de biotina pegilada muestran menos agregación cuando se almacenan en solución que los anticuerpos etiquetados con reactivos que solo tienen espaciadores de hidrocarburos.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, consistencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los reactivos de biotinilación difieren en reactividad, longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de ruptura. Las hidracidas y las alcoxiaminas son dos tipos de grupos reactivos al carbonil. Las alcoxiaminas (—O-NH2) reaccionan específicamente con grupos de aldehídos en condiciones casi neutras para formar enlaces de oxima estables. La reacción es más eficaz en presencia de anilina (n.° de referencia 88944). Alternativamente, las alcoxiaminas pueden conjugarse a ácidos carboxílicos utilizando la química carbodiimida de EDC.

Los grupos de aldehídos reactivos se pueden generar en glicoproteínas y otros compuestos de polisacáridos por oxidación de los dioles de azúcar constitutivos utilizando el periodiato de sodio (n.° de pieza 20504). Los residuos de ácido siálico son componentes comunes de la glicosilación de proteínas y se convierten fácilmente a aldehídos con 1 mM de NaIO4.