Pierce™ F(ab')2 Preparation Kit

Los kits de preparación de fragmentos F(ab’)2 Thermo Scientific Pierce utilizan la pepsina inmovilizada para digerir de forma selectiva los anticuerpos IgG completos humanos o de otras especies para producir fragmentos F(ab’)2 que conservan la actividad de unión al antígeno.

Características del microkit de preparación F(ab’)2:

• Productos de digestión sin enzimas: la pepsina inmovilizada (resina de agarosa granulada) ayuda al control de la reacción de digestión y a la eliminación total de fragmentos de anticuerpos resultantes de la enzima proteolítica.
• Adecuado para humanos y otras especies de IgG: el procedimiento del kit está optimizado para los anticuerpos IgG humanos, de conejo y de ratón. La digestión basada en pepsina es eficaz para otras especies y subclases de IgG, aunque la fase de purificación requiere que el anticuerpo se una eficazmente a la proteína A. (Nota: Para obtener los mejores resultados con IgG1 de ratón, utilice el número de pieza 44980).
• Completos: los kits incluyen todos los reactivos necesarios para preparar y purificar fragmentos de anticuerpos
• Rápidos: el formato de centrifugación reduce en gran medida el tiempo de procesamiento de la muestra
• Flexible: se incluyen protocolos flexibles para múltiples especies y subclases de IgG, así como el tamaño y la concentración de la muestra.
• Eficientes: mayor rendimiento y pureza de las muestra

Estos kits de preparación F(ab')2 son adecuados para anticuerpos IgG humanos, de conejo y de ratón, así como para otras especies y subclases de IgG excepto los anticuerpos IgG1 de ratón. La reacción de digestión de los anticuerpos con agarosa de pepsina se realiza en prácticas columnas de centrifugación desechables que permiten extraer con eficacia la proteasa inmovilizada y recuperar por completo los fragmentos de IgG. Los kits también incluyen tampones y columnas de centrifugación NAb de proteína A Thermo Scientific para purificar eficazmente los fragmentos resultantes. La proteína A se une a los fragmentos Fc y a los anticuerpos IgG sin digerir, lo que permite recuperar los fragmentos F(ab')2 puros de la fracción no retenida. Los kits también incluyen columnas de desalación por centrifugación Thermo Scientific Zeba para preparar la muestra de IgG rápidamente sin dilución en lugar de utilizar pasos de diálisis que requieren mucho tiempo.

Los kits utilizan la pepsina, una endopeptidasa no específica, para digerir enzimáticamente la porción Fc de los IgG enteros para producir el fragmento conocido como F(ab')2. Este fragmento está compuesto por un par de unidades Fab’ conectadas por dos enlaces disulfuro. Puesto que la pepsina proteasa se proporciona inmovilizada como resina de agarosa en gránulos, la reacción de digestión se detiene fácilmente al extraer la resina de la solución de IgG; como resultado, se obtienen productos de digestión sin enzimas.

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