SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA Synthesis Kit

Das SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit ist für die Synthese von Erststrang-cDNA direkt aus einem Säugetierzelllysat optimiert, ohne zuvor die RNA zu isolieren. Lyse und reverse Transkription werden im gleichen Röhrchen durchgeführt, und die daraus resultierende Erststrang-cDNA ist für PCR und qPCR einsatzbereit.

Merkmale des SuperScript IV Kits:
• Kompatibel mit einer Vielzahl von Säugetierzelltypen, die unter verschiedenen Behandlungsbedingungen kultiviert wurden
• Einzelröhrchenformat minimiert Reagenzienverlust, Probenverlust und Behandlungszeit
• Das Gesamtlysatvolumen wird bei der Erststrang-Synthesereaktion für cDNA verwendet, wodurch eine begrenzte Anzahl von Zellen mit höheren Ausbeuten erzielt wird und seltene Transkripte nachgewiesen werden können
• Qualitativ hochwertige cDNA, die für die Verwendung in einer Vielzahl von Anwendungen erzeugt wurde, einschließlich PCR und qPCR
• Einfaches Protokoll, das etwa 37 Minuten dauert
• Kompatibel mit dem TaqMan und SYBR Green qPCR Master Mix von verschiedenen Herstellern
• Optimierte Leistung für 1 – 10.000 Zellen je Probe, Ergebnisse wie bei aufgereinigter RNA

Das SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit enthält SuperScript IV reverse Transkriptase. Merkmale dieses Enzyms:
• Reduzierte RNase H-Aktivität
• Höhere thermische Stabilität
• Hohe cDNA-Ausbeute bei der Erststrang-Synthesereaktion für eine höhere Empfindlichkeit und einen verbesserten Nachweis seltener Transkripte
• Überlegene Toleranz gegenüber verschiedenen RT-Inhibitoren

SuperScript IV reverse Transkriptase ist eine ausgezeichnete Wahl für alle RT-PCR- und qRT-PCR-Anwendungen. Proprietäre MMLV-Mutante mit hervorragender Stabilität und Zuverlässigkeit bei RT-Reaktionen. Deutliche Verbesserung der Inhibitorresistenz, Prozessivität und Reaktionsgeschwindigkeit im Vergleich zur SuperScript III reversen Transkriptase bei gleichzeitiger Bewahrung aller Vorteile des vorherigen Enzyms, einschließlich erhöhter Thermostabilität, hocheffizienter Synthese von Volllängen-cDNA und reduzierter RNase-Aktivität.

Funktionsweise
Bei der herkömmlichen RT-PCR muss in einem sehr zeitaufwändigen Verfahren zuerst RNA aus Zellen isoliert werden, was zu Materialverlust führen kann. Mit dem SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit werden die Zellen lysiert und die cDNA aus dem Lysat in einem einzigen Röhrchen mit minimalem Aufwand und ohne Probenverlust erzeugt. Die DNase I-Behandlung ist ein optionaler Schritt und kann zur Entfernung genomischer DNA vor der Erststrang-Synthese verwendet werden. Dieses Kit wurde für kleine Zellproben optimiert, von 10.000 Zellen bis hin zu einer einzelnen Zelle.