CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit with ROX, for ABI 7000, 7300, 7700, and 7900(HT) instruments
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Invitrogen™

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit with ROX, for ABI 7000, 7300, 7700, and 7900(HT) instruments

Das CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit sorgt für höchst empfindliche und spezifische Echtzeit-qPCR-Ergebnisse direkt aus Zellen und ohne RNA-Aufreinigungsschritt.Merkmale des CellsDirect™Weitere Informationen
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KatalognummerAnzahl Reaktionen
11754100100 Reaktionen
11754500500 Reaktionen
Katalognummer 11754100
Preis (EUR)
1.008,00
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Anzahl Reaktionen:
100 Reaktionen
Preis (EUR)
1.008,00
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Das CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit sorgt für höchst empfindliche und spezifische Echtzeit-qPCR-Ergebnisse direkt aus Zellen und ohne RNA-Aufreinigungsschritt.

Merkmale des CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit sind u. a.:

Effizienz – Bietet erhebliche Zeit- und Kosteneinsparungen für höheren Durchsatz
Anwenderfreundlichkeit – Enzymgemisch sowohl mit SuperScript™ III Reverse Transkriptase als auch Platinum™ Taq DNA-Polymerase
Empfindlichkeit – Kein separater RNA-Isolierungsschritt für größere Empfindlichkeit dank weniger Probenverlusten
Breiter Detektionsbereich – Target-Detektion bei Proben mit einzelner Zelle bis zu 10.000 Zellen
Vielseitigkeit – Kompatibel mit einer Vielzahl von Zelllinien und Proben, die mittels Laser Capture Microdissection (LCM) erfasst wurden

Optimieren Sie Ihren Arbeitsablauf
Bei der herkömmlichen quantitativen Echtzeit-PCR (qRT-PCR) muss zuerst RNA aus Zellen in einem sehr zeitintensiven Verfahren isoliert werden, was zu Materialverlusten führen kann. Mit dem CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit lysieren Sie die Zellen und fügen das vollständige Lysat direkt zu einer einstufigen qRT-PCR-Reaktion bei minimaler Handhabung und minimalem Probenverlust hinzu.

Ideal für Ihre qRT-PCR-Anwendung
Die CellsDirect™-Technologie ist für Genexpressionsstudien mit begrenzten Proben validiert und eignet sich für RNAi-Knockdowns. CellsDirect™ One-Step qRT-PCR-Kits sind besonders für Anwendungen mit hohem Durchsatz durch Vermeidung von teuren, zeitaufwändigen RNA-Aufreinigungsschritten ausgelegt (Abbildung 1). Das CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit kann zudem zur Detektion genomischer DNA-Targets verwendet werden.

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kits können zusammen mit Hydrolyse-Sonden (z. B. TaqMan™) oder LUX™ verwendet werden.

Hinweis: Dieses Kit enthält 2 Reaktionsgemische mit ROX™ Referenzfarbstoff. Ein äquivalentes Kit (11753-500) mit einem separaten Röhrchen ROX™ Referenzfarbstoff ist ebenfalls erhältlich.
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
Specifications
Zur Verwendung mit (Geräte)7000 System, 7300 System, 7700 System, 7900HT Fast System, 7900HT System, Eppendorf™ MasterCycler™ RealPlex, QuantStudio 3 und 5 Systeme, QuantStudio 6 und 7 Pro Systeme, QuantStudio 7 Flex System, QuantStudio 12k Flex System, QuantStudio 6 Flex System
Anzahl Reaktionen100 Reaktionen
ProduktlinieCellsDirect, Platinum, SuperScript
Menge100 Reaktionen
ProbentypZellen
Konzentration2X
NachweisverfahrenPrimer-Sonde
Zur Verwendung mit (Anwendung)RT-PCR
ReaktionsgeschwindigkeitSchnell oder standardmäßig
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• 10 ml Resuspensionspuffer
• 1 ml Lyseverstärker
• 500 µl DNase I, Amplifikationsgrad (1 U/µl)
• 160 µl 10X DNase I-Puffer
• 400 µl 25 mM EDTA
• 100 µl SuperScript™ III RT/Platinum™ Taq-Mix
• 2 × 1,25 ml 2X Reaktionsgemisch mit ROX™
• 1 ml 50 mM MgSO4
• 2 ml DEPC-behandeltes Wasser
• 10 µl HeLa Gesamt-RNA (10 ng/µl)
Das Kit wird auf Trockeneis geliefert und sollte bei –20 °C gelagert werden

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.