Der SuperScript VILO Master Mix ist ein Master Mix für die Erststrang-cDNA-Synthese zum Einsatz in zweistufigen RT-qPCR-Anwendungen. Der Master MixWeitere Informationen
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Der SuperScript VILO Master Mix ist ein Master Mix für die Erststrang-cDNA-Synthese zum Einsatz in zweistufigen RT-qPCR-Anwendungen. Der Master Mix kombiniert die SuperScript III Reverse Transkriptase (RT) und andere RT-Reaktionskomponenten in einem Einzelröhrchenformat, um eine zuverlässige Erststrang-Synthese und hohe cDNA-Ausbeute aus einer Vielzahl von RNA-Konzentrationen zu ermöglichen. Die hohe RT-Effizienz von SuperScript III RT und die optimierte Formulierung ermöglichen dem Master Mix eine hohe Linearität in der cDNA-Synthese über einen breiten Bereich von ursprünglichen RNA-Templates für quantitative, zweistufige RT-PCR (qRT-PCR)-Assays.
Hinweis: Für eine hervorragende cDNA-Synthese in RT-qPCR-Anwendungen empfehlen wir den SuperScript IV VILO Master Mix oder den SuperScript IV VILO Master Mix mit ezDNase-Enzym. Der SuperScript IV VILO Master Mix hebt die bewährte VILO Technologie mit der hochprozessiven und thermostabilen SuperScript IV RT und dem weiter optimierten Puffer auf das nächste Level. Der Master Mix ermöglicht in kürzerer Zeit und bei höheren Temperaturen eine effiziente cDNA-Synthese und bietet selbst bei suboptimalem Reinheitsgrad oder knappen Templates eine hervorragende cDNA-Ausbeute und Empfindlichkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
EndprodukttypErststrang-cDNA
FormatRörchen
Anzahl Reaktionen500 Reaktionen
Optimale Reaktionstemperatur42 °C
Menge500 reactions
ReaktionsformatMaster Mix
ReagenztypReverse Transkription
Reverse TranskriptaseSuperScript III
Ribonuklease-H-AktivitätKeine
VersandbedingungTrockeneis
Größe (Endprodukt)Bis 10 kb
AusgangsmaterialRNA
VerfahrenReverse Transkription
Konzentration5X
NachweisverfahrenEchtzeit-PCR
Zur Verwendung mit (Anwendung)Real-Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR PerformanceHoch
Reaktionsgeschwindigkeit60 min
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• SuperScript VILO Master Mix mit SuperScript III RT, RNaseOUT Rekombinantem Ribonuklease-Inhibitor, proprietärem Helferprotein, Random-Primern, dNTPs, MgCl2
Im Gefriergerät lagern (-5 bis -30 °C).
Häufig gestellte Fragen (FAQ)
What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?
If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:
- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)
What is the difference between SuperScript III RT and the RT in the SuperScript VILO kit?
The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript VILO kit is active at 42 degrees C due to the helper proteins.
How much of the first-strand cDNA reaction should I load for PCR?
While the volume is dependent on the starting amount of RNA used for the first-strand synthesis and the abundance of the target gene, we'd recommend starting with 10% of the first-strand reaction for your PCR reaction.
Zitierungen und Referenzen (1)
Zitierungen und Referenzen
Abstract
Hypothalamic distribution of somatostatin mRNA expressing neurones relative to pubertal and adult changes in pulsatile growth hormone secretion in mice.
'The age-associated decline in growth hormone (GH) secretion may be a consequence of the reduction in the number of GH-releasing hormone (GHRH) positive neurones. However, it remains unclear whether an alteration in the number or distribution of somatostatin (SST) neurones contributes to this change. In the present study, we characterised ... More