Kollagenase, Typ I, Pulver
Kollagenase, Typ I, Pulver
Gibco™

Kollagenase, Typ I, Pulver

Kollagenase ist eine Protease, die die Bindung zwischen einer neutralen Aminosäure (X) und Glycin in Pro-X-Gly-Pro aufspaltet, eine Sequenz, dieWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
171000171 g
17018029500 mg
Katalognummer 17100017
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Kollagenase ist eine Protease, die die Bindung zwischen einer neutralen Aminosäure (X) und Glycin in Pro-X-Gly-Pro aufspaltet, eine Sequenz, die häufig in Kollagen zu finden ist. Als einzige Protease ist die Kollagenase in der Lage, die Tripelhelix der nativen Kollagenfibrillen im Bindegewebe, zum Beispiel in der Haut, in Sehnen, Blutgefäßen und Knochen, abzubauen. Diese Eigenschaft der Kollagenase kann für Gewebekulturen aus menschlichen Tumoren, Mausnieren, adultem und fötalem Gehirn oder auch Epithelgewebe genutzt werden. Die Kollagenase wirkt relativ schonend, löst gut bei physiologischem Temperatur- und pH-Wert und erfordert keine spezielle Ausrüstung oder mechanische Einwirkung.

Gibco™ Kollagenase Typ I wird aus Clostridium histolyticum isoliert und als lyophilisiertes, nicht steriles Pulver für Forschungszwecke bei Zell- oder Gewebedissoziation und Organperfusionen verpackt. Die Aktivität von Gibco™ Kollagenase Typ I ist für mehr als 125 Einheiten/mg garantiert. Im Vergleich zu anderen Kollagenasepräparaten enthält Gibco™ Kollagenase Typ I eine durchschnittliche Menge an Kollagenase, Caseinase, Clostripain und tryptischen Aktivitäten und eignet sich gut für die Verdauung von Zellen oder Gewebe aus Fett, Nebennieren oder Leber.
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
Specifications
Menge1 g
Haltbarkeit24 Monate
VersandbedingungRaumtemperatur
FormLyophilisiert
ProdukttypKollagenase
SterilitätUnsteril
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Lagerbedingungen: 2 bis 8 °C. Vor Licht schützen.
Versandbedingungen: Haltbarkeit bei
Raumtemperatur: 24 Monate ab Herstellungsdatum

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can collagenase be used to dissociate feeder free hESC when cultured on CELLstart medium?

Yes, collagenase can be used. It is recommended to use a 10 mg/ml collagenase IV solution (0.5 ml per 6 cm dish). After 1 minute, remove collagenase and rinse cells. Scrape cells into wash buffer (see product manual for more information), pellet, and re-plate as desired.

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How do I make the 1000X stock (100 U/µL) solution from Collagenase powder?

1. Add 1 mL Hanks' Balanced Salt Solution (HBSS) with calcium and magnesium directly to 1 g vial of Collagenase. Vortex gently to ensure complete dissolution. Transfer to a clean tube.
2. Determine volume of HBSS (with calcium and magnesium) required to bring collagenase solution to 100 U/µL (1000X stock solution). The activity is lot- specific. Rinse vial with this volume of HBSS (with calcium and magnesium), and combine. Filter sterilize 1000X stock solution with a low protein binding filtration unit.
Example: Assuming the lot you have purchased has an activity of 265 U/mg, this lot will have 265000 Units per mL when you reconstitute collagenase into HBSS (with calcium and magnesium) at 1 g/mL. In order to dilute 265000 U/L to 100000 U/mL (= 100 U/µL), you need to dilute the 1 g/mL enzyme solution 2.65 fold.

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What reagents do you offer for cell dissociation, and what are the main differences between them?

Please use this selection chart that compares our cell dissociation reagents (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/trypsin.html).

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Zitierungen und Referenzen (1)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
FRET measurements of intracellular cAMP concentrations and cAMP analog permeability in intact cells.
Authors:Börner S, Schwede F, Schlipp A, Berisha F, Calebiro D, Lohse MJ, Nikolaev VO,
Journal:Nat Protoc
PubMed ID:21412271
'Real-time measurements of second messengers in living cells, such as cAMP, are usually performed by ratiometric fluorescence resonance energy transfer (FRET) imaging. However, correct calibration of FRET ratios, accurate calculations of absolute cAMP levels and actual permeabilities of different cAMP analogs have been challenging. Here we present a protocol that ... More