Uracil-DNA-Glykosylase (Uracil-N-Glykosylase) entfernt Uracil-Rückstände aus dem Zuckergehalt von ein- und doppelsträngiger DNA, ohne das Phosphodiester-Rückgrat zu zerstören, wodurch seine Verwendung als Hybridisierungsziel oder als Vorlage für DNA-Polymerasen verhindert wird.UDG entfernt Uracil nicht aus RNA.

Anwendungen:Trägt zur Eliminierung von Verschleppungskontaminationen in der PCR bei, was zu weniger falsch-positiven Ergebnissen (1,2) beim Klonen von PCR-Fragmenten führt (3).

Quelle:Gereinigt aus E. coli, die das E. coli ung-Gen auf einem Plasmid exprimieren (4,5).

Leistungs- und Qualitätstests:Exonuklease-, Endonuklease- und Phosphatase-Assays.

Einheitendefinition:Eine Einheit katalysiert die Freisetzung von 1 nmol freiem Uracil aus ³H-poly(dU) in 1 h bei 37 °C.

Reaktionsbedingungen der Einheit:30 mM Tris-HCl (pH 8,3), 50 mM KCl, 5 mM MgCl₂, 4 μg/ml ³H-poly(dU)n bei 7 x 10 5 cpm/μg und 1 Einheit
Enzym in 50 μl für 10 min bei 37 °C (4).