Pierce™ TCEP-HCl, No-Weigh™ Format

Thermo Scientific Pierce TCEP-HCl ist ein wirkungsvolles, vielseitiges, geruchloses, Thiol-freies Reduktionsmittel für viele Protein-Anwendungen und andere Forschungsarbeiten mit Reduktion von Disulfid-Bindungen. Die einzigartige Verbindung ist leicht löslich und in vielen wässrigen Lösungen sehr stabil. TCEP reduziert Disulfid-Bindungen so effektiv wie Dithiothreitol (DTT), aber im Gegensatz zu DTT und anderen Thiol-haltigen Reduktionsmitteln muss TCEP vor bestimmten sulfhydrylreaktiven Vernetzungsreaktionen nicht entfernt werden.

Thermo Scientific No-Weigh Produkte sind Spezialreagenzien, die in einem voraliquotierten Format geliefert werden. Die vorgewogene Verpackung trägt dazu bei, den Verlust der Reagenzreaktivität und eine Kontamination im Laufe der Zeit zu verhindern, indem wiederholtes Öffnen und Schließen des Fläschchens eliminiert werden. Das Format ermöglicht die Verwendung frischer Reagenzfläschchen bei jedem Einsatz, wodurch das mühsame Abwiegen kleiner Reagenzienmengen vermieden und Bedenken hinsichtlich der Reagenzienstabilität reduziert werden.

Merkmale von TCEP-HCl:

• Geruchlos – Im Gegensatz zu DTT oder BME ist TCEP geruchlos, sodass Proteine bequem auf dem Labortisch reduziert werden können. Trägt zu einer gesünderen Laborumgebung bei
• Spezifisch – Selektive und vollständige Reduktion selbst der stabilsten, wasserlöslichen Disulfide über einen breiten pH-Bereich
• Einfach – Effektive Reduktion bei Raumtemperatur und pH 5 in weniger als 5 Minuten
• Stabil – Stabilität und Beständigkeit gegen Luftoxidation macht es überflüssig, besondere Vorsichtsmaßnahmen bei der Handhabung oder Lagerung zu ergreifen; nicht flüchtig und nicht reaktiv gegenüber anderen funktionellen Gruppen, die in Proteinen anzutreffen sind
• Effizient – Für die meisten Anwendungen bietet TCEP mit 5 bis 50 mM einen ausreichenden molaren Überschuss, um Peptid- oder Proteindisulfidbindungen bei Raumtemperatur innerhalb weniger Minuten effektiv zu reduzieren.
• Kompatibel – Bei TCEP ist vor den meisten Anwendungen (z. B. Histidin-markierte Proteinaufreinigung, Maleimid-Konjugationen) keine Entfernung des Reduktionsmittels erforderlich.

Bei der Verwendung von TCEP zu bedenken:
• TCEP ist im Allgemeinen in wässrigen Puffern bei nahezu jedem pH-Wert sehr löslich. Daher können Arbeitskonzentrationen und 10X-Stammlösungen in den meisten wässrigen Puffern problemlos hergestellt werden.
• TCEP ist in wässrigen, sauren und basischen Lösungen stabil. Wenn TCEP direkt in Wasser gelöst wird, beträgt der resultierende pH-Wert ca. 2,5.
• TCEP ist nicht besonders stabil in Phosphatpuffern, insbesondere bei neutralem oder alkalischem pH-Wert. Wenn TCEP daher in PBS-Puffern verwendet werden soll, wird empfohlen, die Arbeitslösung unmittelbar vor der Verwendung vorzubereiten.
• TCEP kann als Ersatz für DTT oder 2-Mercaptoethanol (2-ME) im Probenladepuffer für SDS-PAGE verwendet werden; eine Endkonzentration von 50 mM TCEP verwenden.
• Da TCEP in Lösung geladen wird, ist es nicht kompatibel für die Verwendung in isoelektrischer Fokussierung.