Pierce™ Recombinant Protein A/G

Gereinigtes (nicht konjugiertes) Thermo Scientific Pierce Recombinant Protein A/G ist die Grundlage für die Vorbereitung verschiedener Arten von Sonden oder Affinitätsmedien für den Nachweis oder die Reinigung von Kaninchen- und menschlichen Antikörpern, insbesondere IgG-Isotypen, in Immunassays und Antikörperreinigungsprotokollen.

Merkmale von Recombinant Protein A/G:

• Enthält vier Fc-bindende Domänen von Protein A und zwei von Protein G
• Bietet Bindung für alle Antikörperspezies und Subklassen, die entweder von Protein A oder Protein G erkannt werden

Die erweiterten Fc-bindenden Eigenschaften von Protein A/G machen es zu einem beliebten Werkzeug bei der Untersuchung und Aufreinigung von Immunglobulinen. Protein A/G bindet an alle Human-IgG-Subklassen, IgA, IgE, IgM und in geringerem Maße IgD; es bindet jedoch nicht IgA, IgM oder Serumalbumin der Maus. Protein A/G ist ein ideales Hilfsmittel für die Aufreinigung und den Nachweis monoklonaler Antikörper der Maus aus IgG-Subklassen ohne Interferenzen dieser anderen Serumproteine. Einzelne Subklassen von monoklonalen Mauszellen haben am wahrscheinlichsten eine stärkere Affinität zu diesem chimären Protein, als zu Protein A oder Protein G.

Eigenschaften von Recombinant Protein A/G:
• Quelle: E. coli
• Molekulargewicht: 50.460 (anscheinendes MW nach SDS-PAGE: 40.000 bis 45.000)
• Form: Salzfreies Pulver
• A280 von 0,1 % Lösung: Ca. 0,505
• Isoelektrischer Punkt (pI): 4,65

Die Genfusion der Fc-bindenden Domänen von Protein A und Protein G hat zur Produktion eines strukturell und funktionell chimären Proteins mit einer breiteren Bindung als Protein A oder Protein G allein geführt. Während der Fusion wird die Protein G-Gensequenzkodierung für die Serumalbumin-bindende Stelle eliminiert. Dieses Protein wird in E. coli exprimiert und während der Fermentation in das umgebende Medium abgesondert. Das gewonnene Produkt ist in Qualität und Ausbeute konsistent, da der Bakterienwirt so konstruiert ist, dass ihm wichtige Proteolyseaktivitäten fehlen. Die Bindung ist weniger pH-abhängig als bei Protein A oder Protein G allein und tritt bei pH 5 bis 8 auf.

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