Thermo Scientific Pierce N-Ethylmaleimid (NEM) ist eine kleine Verbindung, die stabile, kovalente Thioether-Bindungen mit Sulfhydrylen (z. B. reduzierten Cysteinen) bildet, wodurch sie dauerhaft blockiert werden können, um die Bildung von Disulfid-Bindungen zu verhindern.

Merkmale von N-Ethylmaleimid (NEM):

• Dauerhaftes Blockieren von Sulfhydryle, um die Bildung von Disulfid-Bindungen zu verhindern.
• Überwachung der Reaktion durch Messung der Absorptionsabnahme bei 300 nm
• Blockieren von Sulfhydryl-haltigen Reagenzien, die in Enzym-Assays eingreifen

N-Ethylmaleimid (NEM) ist ein alkylierendes Reagenz, das mit Sulfhydrylen reagiert. Bei einem pH-Wert von 6,5 bis 7,5 ist die Maleimid-Reaktion spezifisch für Sulfhydryle; bei pH-Werten über 7,5 tritt jedoch eine Reaktivität mit Aminogruppen auf. Maleimid-Gruppen reagieren mit Sulfhydrylen durch Nukleophilenangriffe des Thiolat-Anions auf einen der Kohlenwasserstoffe der Doppelbindung. Wenn genügend Sulfhydrylle blockiert wurden, kann die Reaktion durch Messung der Abnahme der Absorption bei 300 nm überwacht werden, da die doppelte Bindung zu einer einzigen Bindung wird. Die resultierende Thioether-Gruppe ist nicht reversibel und endet in einer Ethylgruppe, die das Sulfhydryl blockiert oder kappt.

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