Pierce™ Far-Western Blot Kit for Biotinylated Proteins

Das Thermo Scientific Pierce Far-Western Blot-Kit für biotinylierte Proteine ermöglicht den Western Blot-Nachweis von Zielproteinen durch Interaktion mit jedem als Primärsonde verwendeten biotinmarkierten Testprotein im Gel der auf der Membran.

Merkmale des Far-Western Blot-Kits für biotinylierte Proteine:

• Option für Nachweis auf der Membran oder im Gel — Der Nachweis auf der Membran bietet eine höhere Empfindlichkeit; Der Nachweis im Gel ist schneller und verhindert Probleme durch unvollständige oder ineffiziente Übertragung
• Nicht radioaktive Alternative für Far Western Analyse — zuverlässige und empfindliche Biotin/Streptavidin-HRP-Chemie in Kombination mit Nachweis durch chemische Lumineszenz bietet eine praktische und sichere Alternative zur Markierung des Köderproteins durch Strahlung
• Nützlicher Interaktionsbereich — effektiv für Interaktionspaare, die mäßige bis starke Bindung zwischen dem Ziel- und dem biotinylierten Köderprotein aufweisen
• Primärantikörperfreier Nachweis — verwendet ein biotinyliertes Protein als Sonde, weder Primärantikörper noch Vorkenntnisse über Zielproteinidentitäten erforderlich
• Kompatibel mit SDS-PAGE und nativen Gelen — bietet die Option, Zielproteine in einer nativen Umgebung zu untersuchen, da reduzierte oder denaturierende Systeme möglicherweise nicht immer die beabsichtigte Interaktion erlauben
• Weniger unspezifische Bindung — Biotin/Streptavidin-HRP-Systeme weisen im Vergleich zu Antikörpern weniger unspezifische Bindung mit dem Köderprotein auf
• Kompatibel mit Proteinfärbung — Gele können nach dem Nachweisschritt durch chemische Lumineszenz im Gel für die Gesamtproteinfärbung verwendet werden. Es müssen keine zwei Gele verwendet werden

Dieses Far Western Blotting-Kit stellt die Reagenzien und das Protokoll bereit, die für die Untersuchung von Zielproteinen aufgrund ihrer Interaktion mit einem bestimmten Bindungspartner erforderlich sind, den der Forscher in gereinigter, biotinylierter Form liefert. Das Kit eignet sich für die Analyse von Interaktionen zwischen Proteinen, bei denen die Zielproteine (Beuteproteine) gebunden werden können, nachdem sie durch Gelelektrophorese getrennt wurden. Das Kit enthält Reagenzien und Verfahren für die Chemolumineszenz-Untersuchungen und Nachweise mit Blots oder direkt aus Mini-Gelen.

Lieferumfang:
• Streptavidin-HRP-Konjugat-, Verdünnungs- und Waschpuffer, Substratlösungen für chemische Lumineszenz und Zellophanblätter für Mini-Gele

Anwendungen:
• Nachweis von Proteininteraktionen — Suchen Sie nach Proteinen in Zelllysaten, die eine Bindungsaffinität zu dem gereinigten biotinylierten Protein aufweisen
•Bestätigung von Proteininteraktion — charakterisieren und identifizieren Sie das Vorhandensein von nativen oder nicht ans Ziel bindenden Interaktionen, die ein bestimmtes biotinyliertes Protein und bestimmte Proben mit einbeziehen

Far-Western Blotting erfordert die Suche nach Zielen zuerst mit einem möglichen Interaktionsprotein statt mit einem Primärantikörper. Die Methode wird als Far Western Blotting bezeichnet, da Primärantikörper sekundär zum Nachweis der primären Interaktionssonde und nicht des Zielproteins verwendet werden. Das Pierce Far-Western Blot-Kit für biotinylierte Proteine eliminiert die Verwendung von Antikörpern. Die primäre Sonde (d. h. das vom Forscher gelieferte biotinylierte Köderprotein) wird sekundär mit Streptavidin-HRP-Konjugat nachgewiesen, dessen Aktivität durch Reaktion mit einem sehr empfindlichen chemilumineszierenden Substrat visualisiert wird.