Pierce™ Recombinant Protein A, Peroxidase Conjugated

Verwenden Sie Thermo Scientific Pierce Rekombinantes Peroxidase-konjugiertes Protein A, um Kaninchen- und Human-Antikörper, insbesondere IgG-Isotypen, in Western Blotting-, ELISA-, IHC- und anderen Immunassay-Protokollen zu untersuchen und nachzuweisen.

Merkmale von rekombinantem Peroxidase-konjugiertem Protein A:

• Enthält vier Fc-bindende Domänen pro Protein
• Besser als Protein G für polyklonales IgG von Kaninchen-, Schwein-, Hund- und Katzenserum
• Schlechter als Protein G für Maus-IgG1, humanes IgG3 und Ratten, Ziegen- und Kuhantikörper

Protein A ist eine Zellwandkomponente, die von mehreren Staphylococcus aureus-Stämmen erzeugt wird und aus einer einzelnen Polypeptidkette besteht und wenig oder kein Kohlenhydrat enthält. Rekombinantes Protein A wird in E. coli hergestellt und funktioniert im Wesentlichen genauso wie natives Protein A. Das Protein-A-Molekül enthält vier Bindungsstellen mit hoher Affinität, die mit der Fc-Region von IgG verschiedener Arten, einschließlich Mensch und Kaninchen, interagieren können. Die Bindung ist zwar bei pH 8,2 optimal, erfolgt jedoch auch bei neutralen oder physiologischen Bedingungen (pH 7,0 bis 7,6) effizient.

Eigenschaften von rekombinantem Protein A:
• Quelle: E. coli
• Molekulargewicht: ∼44.600 (Apelent MW nach SDS-PAGE: 45.000)
• Form: salzfreies Pulver
• A280 aus 0,1 %-iger Lösung: ca. 0,165
•Isoelektrischer Punkt (pI): 4,7 bis 4,8

Die Wechselwirkung zwischen Protein A und IgG ist nicht für alle Arten äquivalent. Auch innerhalb einer Spezies interagiert Protein A mit einigen Unterklassen von IgG und nicht mit anderen. Zum Beispiel binden humanes IgG1, IgG2 und IgG4 stark, während IgG3 nicht bindet. Es gibt auch viele Fälle, in denen monoklonale Antikörper nicht an Protein A binden, insbesondere die Mehrheit der Immunglobuline von Ratten sowie Maus-IgG1.

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