BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit

Das BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit ist eine schnelle, einfache Aufreinigungsmethode für DNA-Sequenzierungsreaktionen, die nicht eingebaute BigDye™ Terminatoren und Salze entfernt.Keine Farbstofftropfen mehr!Die Aufreinigung ist nach weniger als 40 Minuten abgeschlossen und erfordert weniger als 10 Minuten Arbeitsaufwand.

•Wegfall des Flüssigkeitstransfers – Verwendung einer einzelnen Platte
•Restloses Entfernen von Farbstofftropfen
•Stabilisierung der Proben vor der Analyse
•Verbesserung des Sequenzierungsablaufs
• Manuelle oder automatisierte Protokolle
• Schnelle, zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse.

Einfacher Aufreinigungsprozess
Traditionelle Aufreinigungsmethoden wie Ethanolfällung erfordern die Zugabe mehrerer Reagenzien sowie Dekantier- und Zentrifugationsschritte.Das BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit benötigt lediglich zwei weitere Reagenzien, die nacheinander oder bereits vorgemischt hinzugefügt werden können:

• XTerminator™ Lösung – Entfernt nicht eingebaute Farbstoff-Terminatoren und löst Salze aus der Reaktion nach der Sequenzierung.
• SAM™ Lösung – Verbessert die Leistung der XTerminator™ Lösung und stabilisiert die Nachreinigungsreaktionen.

Das Protokoll ist sehr einfach (siehe Abbildung 1):
1.Führen Sie das Cycle-Sequencing-Verfahren mit BigDye™ Terminatoren durch.
2Zentrifugieren Sie anschließend die Reaktionsplatte kurz und pipettieren Sie dann die korrekte Menge SAM™ Lösung in jedes Well der Platte.
3.Pipettieren Sie die korrekte Menge XTerminator™ Lösung in jedes Well:
4.Der Behälter mit der XTerminator™ Lösung wird kurz mit einem Vortexmischer gemischt.
5.Unter Verwendung einer Pipettenspitze mit breiter Öffnung (zu empfehlen) wird die angemessene Flüssigkeitsmenge in jedes Well pipettiert.
6.Versiegeln Sie die Platte durch Heißversiegelung oder mittels transparenter Klebefolie (P⁄ N 4306311).30 Minuten lang Vortexmischen (empfohlen werden Vortexmischer für 96-Well-Mikrotiterplatten und für 384-Well-Mikrotiterplatten), dann die Reaktionsplatte kurz zentrifugieren.
7.Setzen Sie die Reaktionsplatte in den Applied Biosystems DNA-Analysator ein.Wählen Sie das Modul und die Platte für den Analyselauf aus.

Ausgezeichnete Rückgewinnung langer Fragmente
Mit dem BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit gehen Sie nicht auf Kosten der Sequenzlänge.Abbildung 2 zeigt Daten der Abteilung für DNA-Technologie des Plant Biotechnology Institute (NRC-PBI) in Saskatoon, Kanada.Die Leselänge der Q20-Basis beträgt 1044 bp.

Verbesserte Rückgewinnung kurzer Fragmente
Mit dem BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit erhalten Sie qualitativ hochwertigere Daten.Abbildung 3 zeigt einen Vergleich zwischen dem BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit und der Aufreinigung mittels Ethanolfällung, der von der Abteilung für DNA-Technologie des Plant Biotechnology Institute (NRC-PBI) in Saskatoon, Kanada durchgeführt wurde.Das BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit sorgt für qualitativ hochwertige Rückgewinnung kurzer Fragmente.Sequenzdaten aus der Aufreinigung mittels Ethanolfällung wurden durch Farbstofftropfen beschädigt.

Erhöhte Stabilität
Versiegelte Reaktionsplatten sind bei Raumtemperatur 48 Stunden lang, oder bei 4 °C 10 Tage lang stabil. Im Fall eines Strom- oder Rechnerausfalls, bzw. einer anderen Störung, kann dieselbe Probe neu analysiert werden, ohne das Experiment wiederholen zu müssen.Dies erhöht Ihre Flexibilität beim Laden einer Reaktionsplatte auf ein CE-Gerät.

Verfügbare Betriebsmodule
Applied Biosystems bietet herunterladbare Betriebsmodule für die Verwendung mit dem BigDye XTerminator™ Aufreinigungskit und der Datenerfassungssoftware.Diese Module sind für die 3100, 3100–Avant (mit Data Collection v2.0 oder höher), 3130⁄3130xl und 3730⁄3730xl Analysatoren bestimmt.Die Softwaremodule für das BigDye XTerminator Aufreinigungskit sind mit den Betriebssystemen Windows™ 2000 und Windows™ XP kompatibel und sind auf unserer Software-Download-Seite verfügbar:

Applied Biosystems Integrierte Systeme für die genetische Analyse ›

Nur für Forschungszwecke.Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.